酶法制备L-鸟氨酸-L-精氨酸二肽的方法技术

本发明专利技术公开了酶法制备L

【技术实现步骤摘要】
酶法制备L
‑
鸟氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽的方法


[0001]本专利技术涉及一种酶法(利用非核糖体肽合成酶腺苷化结构域(A
‑
domain))制备L
‑
鸟氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽的方法，属于生物


技术介绍

[0002]二肽是由一分子氨基酸的羧基和另一分子氨基酸的氨基脱水缩合形成的酰胺键连接形成的肽。在体内二肽可被二肽酶水解而成两个游离氨基酸，除了具有相应氨基酸的功能，二肽还具有特殊的生理功能。因此二肽的研究受到了广泛关注。例如，阿斯巴甜(N
‑
L
‑
α
‑
门冬酰胺
‑
L
‑
苯丙氨酸1
‑
甲酯)、肌肽(β
‑
丙氨酸
‑
L
‑
组氨酸)、丙谷二肽(L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺)和Lr/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.酶法制备L
‑
鸟氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽的方法，其特征在于：以L
‑
鸟氨酸和L
‑
精氨酸为原料，加入ATP、Mg
2+
和非核糖体肽合成酶腺苷化结构域，在缓冲液pH值为6.0
‑
8.5，25
‑
40℃温度条件下通过酶促反应催化合成L
‑
鸟氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽。2.根据权利要求1所述的酶法制备L
‑
鸟氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)构建非核糖体肽合成酶腺苷化结构域基因的重组表达载体pET28a
‑
A
‑
domain；(2)将步骤(1)中的重组表达载体转化至大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)，获得基因工程重组菌株E.coli Rosetta(DE3)pET28a
‑
A
‑
domain；(3)培养步骤(2)中的重组菌株，从而获得表达重组蛋白的菌体；(4)破碎步骤(3)中的菌体获得粗酶液，经纯化后获得纯酶液；(5)将步骤(4)中获得的酶液加入终浓度为20mM L
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：徐得磊，陈奕轩，杜军军，文艳河，张心怡，张子涵，朱益波，吴凌天，张紫薇，
申请(专利权)人：常熟理工学院，
类型：发明
国别省市：