一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌制造技术

本发明专利技术公开了一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，属于农业微生物应用技术领域，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年03月21日，保藏编号为CCTCC M 2022296，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09。本菌株对多种有害菌具有抑菌活性，该菌具有良好的耐酸能力，并对多种抗生素敏感，具有开发为微生态制剂的潜力。有开发为微生态制剂的潜力。有开发为微生态制剂的潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌


[0001]本专利技术属于农业畜牧应用领域，具体涉及一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)MZ09。

技术介绍

[0002]对民猪源抑制致病菌微生物的筛选而得到的微生物，可以减轻许多致病菌对动物体造成的损害。贝莱斯芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种，在农业生产上有促进植物生长和抵御病原微生物作用,具有广谱抗菌活性,是开发生物药剂潜力较大的微生物。其代谢产物具有提高机体免疫力、增加饲料转化率、还可使动物肠道微生物平衡、抑制氧化应激的发生、诱导植物抗性及促进植物生长等多种功能，还与食品加工、药品生产和水资源品质提升有关。
[0003]近期，养猪行业因致病微生物的存在造成了很大的经济损失，仔猪感染了金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等有害菌后，会引发仔猪腹泻等等的疾病，之前在仔猪治疗疾病及防疫过程中一直使用抗生素作为主要手段，但长期使用抗生素会使仔猪产生细菌耐药性等等副作用的出现，在使用抗生素的同时有很大几率也会杀死对机体有益的菌群，从而破坏肠道内部稳态和菌群的结构，对人类健康也会出现很大影响，除此之外还会对环境造成污染。民猪生长向好的趋势与消化道内微生物的菌群平衡有很大关系，消化道内的有益菌群会抑制外来致病菌，结肠微生物区系是消化系统最为复杂的，所以有很多种类和数量的微生物可供筛选和分离鉴定。所以该实验选用结肠内容物进行筛菌实验，不仅可以探究仔猪消化率还可以筛选出优势。此外，现在我国要求替抗，贝莱斯芽孢杆菌可以用于一种新型抗生素的替代物，源于动物用于动物，安全系数很高。可以使动物的生产性能提高。在民猪肠道内容物中筛选出优势菌种对抑制致病菌生长具有很重要的意义。

技术实现思路

[0004]基于以上畜牧养殖生产过程中实际问题及需求，本专利技术目的在于提供一种具有抑制多种致病菌微生物生长的民猪源贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)MZ09，在在生长过程中，产生乙酸和异戊酸，对多种有害菌具有抑菌活性，有助于提高动物的抗病性，该菌具有良好的耐酸能力，并对多种抗生素敏感，具有开发为微生态制剂的潜力。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年03月21日，保藏编号为CCTCC M 2022296，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09。
[0006]进一步的，所述的贝莱斯芽孢杆菌对抗生素具有敏感性，所述的抗生素包括万古霉素、庆大霉素、链霉素、红霉素、卡那霉素、四环素、克林霉素和氯霉素。
[0007]本专利技术还提供如上所述的贝莱斯芽孢杆菌的培养方法，如下：取OD
600
＝1.0种子液按体积比1％的接种量至培养基中，温度范围为30℃
‑
50℃，pH＝2
‑
7，所述的培养基采用LB
液体培养基。
[0008]进一步的，在温度37℃，pH＝5.5，220r/min条件下摇床振荡培养。
[0009]本专利技术还提供如上所述的贝莱斯芽孢杆菌在制备民猪肠道有害菌抑制剂的应用。
[0010]进一步的，所述的民猪肠道有害菌包括大肠杆菌ATCC25922、大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、大肠杆菌1799、肺炎链球31001、表皮葡萄球菌12228、黑曲霉2377或/和鸡白痢沙门氏菌C7913均具有抑菌活性。
[0011]本专利技术还提供一种益生菌制剂，含有如上所述的贝莱斯芽孢杆菌。
[0012]本专利技术的优点及有益效果：本专利技术所提供的贝莱斯芽孢杆菌菌株对多种有害菌具有抑菌活性，包括大肠杆菌ATCC25922、大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、大肠杆菌1799、肺炎链球31001、表皮葡萄球菌12228、黑曲霉2377和鸡白痢沙门氏菌C7913；对该菌的抑菌物质进行分析发现，添加蛋白酶的无细胞上清液与正常的无细胞上清液的抑菌能力相比没有显著差异，添加过氧化氢的无细胞上清液与正常的无细胞上清液的抑菌能力相比没有显著差异。且该菌中的胞外多糖也不是抑菌成分，后又对该菌进行了短链脂肪酸含量测定，发现乙酸、异戊酸含量很高，故可以判断乙酸和异戊酸是该菌的抑菌物质。综上所述，民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09是一株具有较高应用价值的猪源益生菌，其对畜牧业和饲料发酵工业的发展具有重要意义。
附图说明
[0013]图1为本专利技术的菌体形态图；
[0014]图2为民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的生长曲线图；
[0015]图3为民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的系统发育树图；
[0016]图4为不同温度条件下菌株生长能力实验结果图；
[0017]图5为不同pH条件下菌株生长能力实验结果图；
[0018]图6为不同NaCl条件下菌株生长能力实验结果图；
[0019]图7为不同胆盐浓度条件下生长能力实验结果图；
[0020]图8为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
蛋白(指示菌为金黄色葡萄球菌29213)；
[0021]图9为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
蛋白(指示菌为大肠杆菌K88)；
[0022]图10为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
过氧化氢(指示菌为金黄色葡萄球菌29213)；
[0023]图11为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
过氧化氢(指示菌为大肠杆菌K88)；
[0024]图12为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
胞外多糖(指示菌为金黄色葡萄球菌29213)；
[0025]图13为对民猪源贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MZ09的抑菌物质分析
‑‑
过氧化氢(指示菌为大肠杆菌K88)；
具体实施方式
[0026]通过以下实施例对本
技术实现思路
进一步说明，但这并不构成对本专利技术任何意义的限定。
[0027]供试材料：大肠杆菌ATCC25922、大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、大肠杆菌1799、肺炎链球31001、表皮葡萄球菌12228、黑曲霉2377和鸡白痢沙门氏菌C7913，由东北农业大学动物营养研究所提供；民猪粪便采集自东北农业大学阿城实验基地。
[0028]实施例1
[0029]菌株筛选与鉴定具体按以下步骤进行：
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年03月21日，保藏编号为CCTCC M 2022296，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillusvelezensis MZ09。2.根据权利要求1所述的一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述的贝莱斯芽孢杆菌对抗生素具有敏感性，所述的抗生素包括万古霉素、庆大霉素、链霉素、红霉素、卡那霉素、四环素、克林霉素和氯霉素。3.根据权利要求1所述的一种民猪肠道中可抑制多种有害菌生长的贝莱斯芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，取OD
600
＝1.0种子液按体积比1％的接种量至培养基中，温度范围为30℃
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：石宝明，胥天奇，鲍嘉欣，赵轩，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：