一种细叶萼距花精致组分和单体化合物的制备方法及其在化妆品中的应用技术

本发明专利技术属于化妆品技术领域，具体公开了细叶萼距花提取物及其在制备化妆品中的应用，所述提取物指细叶萼距花精致组分和7种单体化合物。精致组分是细叶萼距花中抗氧化活性、抑制酪氨酸酶活性以及抑制基质金属蛋白酶活性最强的组分；7种单体化合物是细叶萼距花乙醇提取物经大孔树脂柱层析、甲醇

【技术实现步骤摘要】
一种细叶萼距花精致组分和单体化合物的制备方法及其在化妆品中的应用


[0001]本专利技术属于化妆品
，具体地涉及细叶萼距花精致组分、细叶萼距花单体化合物，以及两者在制备美白抗衰化妆品中的应用。

技术介绍

[0002]年龄老化、长期暴露在不利的环境中、营养不良、疲劳等因素，会导致细胞和皮肤组织新陈代谢功能的降低，皮肤血液循环的减少，皮肤水分缺失，结构和功能缺陷的累积，内分泌失调，皮肤自身修复能力的降低，最终引起皮肤外观、生理功能及肌理的变化。皮肤老化最明显的改变包括细纹、皱纹的出现，皮肤失去弹性，皮肤下垂、松弛、失色，出现色斑等。
[0003]细胞代谢过程中产生的氧自由基会对细胞内生物大分子产生累积性损伤，引起细胞衰老与增殖能力丧失，这种氧化与抗氧化体系的失衡被认为是引起皮肤衰老的重要诱因。酪氨酸酶又称多酚氧化酶，是一种广泛存在于动植物、微生物及人体中的氧化还原酶，是黑色素合成的关键限速酶，与人体雀斑、褐斑等黑色素过度沉积等疾病的发生密切相关。近年来对其在医药、美容、食品和环保等领域的应用，引起了国内外的广泛关注。市场上的美白剂大多基于对酪氨酸酶的抑制从而达到美白效果。
[0004]外界因素引起的体内基质金属蛋白酶(MMPs)的激活，可导致支撑皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，从而出现皮肤皱缩、无弹性等衰老症状。在正常发育过程中，MMPs负责降解存在于骨骼、软骨和皮肤中的胶原、弹性蛋白、明胶、基质糖蛋白和蛋白多糖等细胞外基质(ECM)。其中，基质金属蛋白酶
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1)是一种钙、锌依赖的脊椎动物胶原酶亚类，是MMP家族中能够高效降解I型和III型间质胶原的成员，参与肿瘤、心血管疾病、多发性硬化症和皮肤衰老等一系列生理和病理过程。通过抑制MMP
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1的表达或活性，可减少细胞外基质成分的特异性降解。因此，消除生命活动中过度的自由基损伤，抑制胶原酶活性从而减少胶原蛋白的降解流失，被认为能有效延缓皮肤衰老。
[0005]随着消费者对用于美白抗氧化、延缓皮肤老化的化妆品需求日益增长，源自植物的美容功效成分已被广泛应用于化妆品产业中。这些活性成分来源于植物的各部位，例如根、茎、叶、树皮、种子、果实、愈伤组织、原生质体及分生组织，以纯或半纯组分，固体或液体提取物或衍生物等不同形式掺入化妆品中。植物化妆品以其崇尚自然、温和、安全性高等特点深受消费者的喜爱，打造植物源化妆品已成为化妆品行业发展的必然趋势。
[0006]细叶萼距花(Cuphea hyssopifolia Kunth)为千屈菜科萼距花属植物，一年或多年生，叶对生，叶色浓绿，四季常青且具有光泽。花精巧，边孕蕾边开花，花期长，有较强的观赏价值和园林绿化功能。现在我国广东、广西、云南、福建、北京等省区已引种栽培并广泛应用于园林绿化中。本专利技术是专利技术人在自己的前期研究成果(详细内容请参见在先申请CN102525860A)基础上所获得的进一步研发成果，主要涉及细叶萼距花精致组分、单体化合物及其在抗氧化、美白及抗衰老方面的应用。

技术实现思路

[0007]为克服现有技术中存在的缺点，本专利技术的专利技术目的是提供具有抗氧化、美白及抗衰老功效的细叶萼距花有效成分，所述有效成分为细叶萼距花经提取、分离而得，其包括7种化合物，所述7种化合物的成分明确。
[0008]为实现上述目的，本专利技术首先获得细叶萼距花(Cuphea hyssopifolia Kunth)精致组分，所述精致组分的制备方法如下：
[0009]将干燥的细叶萼距花和80％(v/v)乙醇溶剂按料液比1g：5mL～1g：50mL混合(可分多次加入)，在20～30℃下静置提取合计9
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21天(优选为15天)，提取后经过滤分离，滤液在50℃下减压浓缩干燥，得到细叶萼距花粗提取物；
[0010]将细叶萼距花粗提取物加水稀释，在20
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30℃下依次用石油醚、乙酸乙酯溶剂进行萃取，所获得的萃取部分和水液部分在50℃下减压浓缩干燥，得到细叶萼距花粗提取物的萃取组分和水层成分，具体为石油醚层组分、乙酸乙酯层组分及水层组分。
[0011]所述制备细叶萼距花精致组分的方法，还包括以下步骤：
[0012](1)柱层析一次分离：
[0013]细叶萼距花粗提取物依次经石油醚、乙酸乙酯萃取得到的所述水层组分，采用D101大孔树脂柱层析进一步纯化：依次用甲醇
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水(v/v)0：100、50：50、100：0梯度洗脱，洗脱液在50℃下减压浓缩干燥依次得到组分Ⅰ、组分Ⅱ和组分Ⅲ。
[0014](2)柱层析二次分离(相对于在先申请CN102525860A的进一步分离)：
[0015]将经步骤(1)柱层析一次分离后收集的所述组分Ⅱ采用羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH
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20)柱层析进一步纯化，依次采用甲醇
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水(70：30，v/v)溶液和氯仿
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甲醇(50：50，v/v)溶液洗脱，甲醇
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水(70：30，v/v)溶液和氯仿
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甲醇(50：50，v/v)溶液各洗脱3
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5个柱体积，洗脱完成后分别回收两部分洗脱溶液。其中甲醇
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水(70：30，v/v)溶液洗脱部分为有效成分，氯仿
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甲醇(50：50，v/v)溶液洗脱部分为杂质成分；
[0016]以上述柱体积的洗脱液洗脱，能够最大限度获得有效成分并去除杂质。
[0017](3)柱层析三次分离：
[0018]将经所述柱层析二次分离后收集的甲醇
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水(70：30，v/v)溶液洗脱部分采用十八烷基硅烷键合硅胶柱层析进行纯化，流速为20mL/min，以甲醇
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水溶液梯度洗脱，具体洗脱条件：用于梯度洗脱的甲醇
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水溶液中甲醇和水的体积比依次为0：100、20：80、40：60、60：40、80：20、100：0，每个体积比的洗脱液都为5个柱体积。其中，甲醇和水的体积比为20：80、40：60的甲醇
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水溶液洗脱获得的洗脱液，分别收集后再混合，所得混合液在50℃下减压浓缩干燥得到细叶萼距花精致组分。
[0019]本专利技术还提供了所述细叶萼距花精致组分含有的7种单体化合物，获得7种单体化合物的方法如下：
[0020]将经所述柱层析三次分离得到的细叶萼距花精致组分，采用高效液相色谱进行纯化，采用乙腈浓度为10％(v/v)～30％(v/v)的乙腈水溶液进行梯度洗脱，流动相流速为4mL/min，收集得到细叶萼距花精致组分中7种单体化合物，经鉴定分别为：Myricitrin(1)、Tellimoside(2)、Myricetin 3
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galloyl)
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β
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.结构式为的化合物在制备具有抑制酪氨酸酶、抑制基质金属蛋白酶
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1和美白活性中至少一种功效的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述产品为化妆品。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述产品为面霜。4.含有结构式为的化合物的产品；所述产品具有抑制酪氨酸酶、抑制基质金属蛋白酶
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1和美白活性中至少一种功效。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：所述产品为化妆品。6.根据权利要求4或5所述的产品，其特征在于：所述产品为面霜。7.一种从细叶萼距花中提取7种单体化合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：细叶萼距花的60
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100％v/v乙醇提取物依次经石油醚、乙酸乙酯萃取，得到石油醚层组分、乙酸乙酯层组分及水层组分；将所述水层组分经D101大孔树脂柱层析纯化：依次用甲醇和水的体积比为0：100、50：50、100：0的甲醇
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水溶液进行梯度洗脱，收集甲醇和水的体积比为50：50的甲醇
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水溶液洗脱所得到的洗脱液，减压浓缩干燥得到组分Ⅱ；将所述组分Ⅱ经羟丙基葡聚糖凝胶柱层析纯化：用甲醇和水的体积比为70：30的甲醇
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水溶液洗脱3
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5个柱体积，得到有效成分；将所述有效成分经十八烷基硅烷键合硅胶柱层析纯化：依次采用甲醇和水的体积比为0：100、20：80、40：60、60：40、80：20、100：0的甲醇
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水溶液进行梯度洗脱，将甲醇和水的体积比为20：80、40：60的甲醇
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水溶液洗脱获得的洗脱液分别收集后再混合，将所得混合液减压浓缩干燥，制得细叶萼距花精致组分；将所述细叶萼距花精致组分经高效液相色谱纯化：采用乙腈浓度为10％v/v～30％v/v的乙腈
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水溶液进行梯度洗脱，分别收集洗脱液后减压浓缩干燥，获得Myricitrin、Tellimoside、Myricetin 3
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galloyl)
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β
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glucopyranoside、Myricetin、Desmanthin 1、Penta
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galloyl
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glucose和Quercetin3
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galloylxylopyranoside)7种单体化合物；所述Myricetin 3
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galloyl)
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glucopyranoside的结构式为
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：步骤S1、细叶萼距花原料干燥后粉碎，采用60
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100％v/v乙醇在20～30℃浸泡提取1
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4次合计9
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21天，干燥的细叶萼距花原料和每次提取时所加60
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100％v/v乙醇的料液比为1g：5mL～1g：50mL，将提取完后固液分离所得的滤液减压浓缩干燥，得细叶萼距花乙醇提取物；步骤S2、将细叶萼距花乙醇提取物加水溶解，在20～30℃下依次用石油...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘吉开，石宝宝，黄蓉，王献，陈乾，董智慧，沈慧慧，伍兴，
申请(专利权)人：深圳摩尔雾化健康医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：