一种（S）-1,2丙二醇中（R）-1,2丙二醇含量的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种采用液相色谱法检测（S）

【技术实现步骤摘要】
一种（S）
‑
1,2丙二醇中（R）
‑
1,2丙二醇含量的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析领域，具体涉及一种（S）
‑
1,2丙二醇中对映异构体含量的检测方法。

技术介绍

[0002]阿斯利康及施贵宝公司共同研究开发了一种钠
‑
葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂，用于治疗2型糖尿病。通用名为达格列净(Dapagliflozin)，其丙二醇单水合物的分子式为C21H25O6Cl
•
C3H8O2
•
H2O，其化学名为(2S ,3R ,4R ,5S ,6R)
‑2‑
(4
‑
氯
‑3‑
(4
‑
乙氧苄基)苯基)
‑6‑
(羟甲基)四氢
‑
2H
‑
吡喃
‑
3,4,5
‑
三醇
‑
(S)
‑
1,2
‑
丙二醇单水合物。在达格列净（S）
‑
1,2
‑
丙二醇一水合物合成过程中，达格列净和（S）
‑
1,2
‑
丙二醇反应后经纯化结晶得到达格列净（S）
‑
1,2丙二醇一水合物，其中使用的（S）
‑
1,2丙二醇可能含有对映异构体杂质。因此，为了保证产品的光学纯度合格，在制备过程中需要控制关键物料（S）
‑
1,2丙二醇中异构体（R）
‑
1,2丙二醇的含量，这是药品生产中质量控制的关键环节。
[0003]1,2
‑
丙二醇分子量较低，且化学结构中无不饱和键以及共轭基团，没有明显的紫外吸收，无法直接采用常见的紫外检测器进行测定。目前对于1,2
‑
丙二醇的异构体分析，最普遍采用的方法是气相色谱法，如现有专利CN114236029A以及CN113848257A公开了将1,2
‑
丙二醇衍生后以化学键合的环糊精为固定相的手性气相色谱进行分离测定的方法。相较于气相法，液相色谱的适用条件更广泛且相对常见，分析条件较温和。而目前使用液相色谱法对1,2
‑
丙二醇异构体进行分析的相关报道较少，使得仪器设备以及方法的选择上具有一定限制性。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种（S）
‑
1,2
ꢀ‑
丙二醇中对映异构体（R）
‑
1,2
ꢀ‑
丙二醇的检测方法，可以选择使用正相或反相柱前衍生化液相色谱法进行分析。该方法包括将含有1,2
ꢀ‑
丙二醇对映异构体的样品中加入衍生试剂和催化剂，经过衍生化后，加入稀释剂稀释后得到供试品溶液，按液相色谱法进行定量分析等流程。具体为：（1）将（S）
‑
1,2
‑
丙二醇待测样品溶于二氯甲烷，加入苯磺酰氯类衍生试剂和催化剂，混匀，震荡反应0.5
‑
6小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液震荡，静置分层，取下层有机相500uL，用异丙醇稀释并定容至100mL，得到供试品溶液；（2）将供试品溶液进样至高效液相色谱仪中，采用正相色谱法或反相色谱法进行分析；正相色谱条件为：采用CHIRALCEL OX
‑
H色谱柱，柱温25℃，流速：1mL/min，进样量：5μL，采用紫外检测器，检测波长：226nm；采用等度洗脱方法，流动相为正己烷：异丙醇=60:40的混合溶液。
[0005]反相色谱条件为：采用CHIRALPAK IG色谱柱，柱温25℃，流速：1mL/min，进样量：5μL，采用紫外检测器，检测波长：226nm；采用等度洗脱方法，流动相为异丙醇：水=90:10的混
合溶液。
[0006]得到的图谱仅积分（S）
‑
1,2
‑
丙二醇和（R）
‑
1,2
‑
丙二醇的衍生产物峰，采用面积归一化法计算，得到（R）
‑
1,2
‑
丙二醇的含量。
[0007]进一步地，所述苯磺酰氯类衍生试剂选自苯磺酰氯和对甲基苯磺酰氯中的一种。
[0008]进一步地，所述（S）
‑
1 ,2
‑
丙二醇待测样品与所述苯磺酰氯类衍生试剂的摩尔比为1:1～1:5，优选1:1
‑
1:2；所述三乙胺与所述（S）
‑
1 ,2
‑
丙二醇待测样品的摩尔比为1:1～10:1,优选2:1。
[0009]在本方案中，磺酰氯类衍生化试剂会在1,2
‑
丙二醇结构的羟基上连接带有芳香环的磺酰基，这就使得分子带有了紫外吸收的特性，并且能一定程度上改变分子的极性，使得一对异构体分子有相对合理的保留时间。
[0010]当进行衍生化反应时，适宜的反应区间温度为25℃
‑
60℃，优选25℃；反应时间10分钟
‑
10小时，优选1
‑
4小时。衍生化反应使用震荡反应条件，反应过程中每30分钟使用振荡器振摇2分钟；所使用的催化剂选自常见的简单有机碱如TEA、DIEA等，不宜使用有较明显紫外吸收基团的试剂如DMAP等，以免造成后续干扰；待反应完全后经淬灭经过简单的后处理，得到的溶液可以直接用于分析用样品的制备，无需纯化，其余组分对分析不造成干扰。
[0011]有益效果：本专利技术使用苯磺酰氯类试剂对丙二醇进行衍生，解决了丙二醇在液相色谱紫外检测器中无响应的问题。提供了使用正相或反相液相色谱手性柱对1,2 丙二醇对映异构体的检测方式，提供了在缺乏气相色谱仪、手性气相色谱柱等设备时的备选项，克服现有技术的限制性。在实际生产和检测过程中，应用该方法可有效地控制1,2 丙二醇以及含1,2 丙二醇原料药及其制剂的质量。
附图说明
[0012]图1为实施例1实验结果；图2为实施例2实验结果。
实施方式实施例
[0013]液相色谱仪：Agilent 1260Ⅱ；色谱柱：CHIRALCEL OX
‑
H（4.6mm
×
250mm，5μm）；柱温：25℃，流速：1mL/min，进样量：5μL，检测波长：226nm。
[0014]流动相：正己烷
‑
异丙醇（60:40）。
[0015]衍生方法：取（S）
‑
1,2
‑
丙二醇供试品0.1mL，加1.0mL二氯甲烷，加1.6mL三乙胺，加0.7g对甲苯磺酰氯，摇匀，密封25℃反应3h。反应过程中每30分钟振摇2min。
[0016]淬灭处理：在反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液2.0mL振摇后离心使分层，弃去上层水溶液。
[0017]供试品溶液：移取（S）
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种（S）
‑
1,2
‑
丙二醇中（R）
‑
1,2
‑
丙二醇含量的检测方法，包括如下步骤：（1）将（S）
‑
1,2
‑
丙二醇待测样品溶于二氯甲烷，加入苯磺酰氯类衍生试剂和三乙胺，混匀，于25℃下震荡反应，反应完成后加入饱和碳酸氢钠水溶液震荡，静置分层，取下层有机相500uL，用异丙醇稀释并定容至100mL，得到供试品溶液；（2）将供试品溶液进样至高效液相色谱仪中，色谱条件为：色谱柱选自CHIRALCEL OX
‑
H色谱柱或CHIRALPAK IG色谱柱，柱温25℃，流速：1mL/min...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡强，胡文超，喻龙，谢林霞，谢立，
申请(专利权)人：润都制药荆门有限公司润都制药武汉研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：