【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用
[0001]本专利技术属于生物类提取药领域,具体涉及一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用。
技术介绍
[0002]外泌体(exosomes)是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30
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150nm),现今,其特指直径在40
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100nm的盘状囊泡。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。现有的外泌体提取方法中,差速离心法是最常用的外泌体提取手段,采用不同的离心条件逐次离心,可完成外泌体的提取分离。差速离心虽然操作简单,但过程费时,且需要反复分离和杂质的分离操作,不仅不利于大规模提取,而且回收率不稳定,严重影响了后续外泌体活性的研究,也阻碍了外泌体的临床应用。
技术实现思路
[0003]基于上述问题,本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用,运用Native
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Page凝胶技术结 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)在绝缘的容器内设置液体管,液体管由0.45μm的滤膜构成,且底部封闭;液体管外侧依次包裹0.1μm膜和超滤膜,在0.45μm膜和0.1μm膜、0.1μm膜和超滤膜以及超滤膜和容器之间加入Native
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Page凝胶;(2)脐静脉间充质干细胞培养后,分离出上清液,加入液体管中;液体管的液体上下两端分别连接正、负电极,通入电流,电压120V,电流20mA,时间4
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8h,外泌体即可通过超滤膜,留在超滤膜和容器之间,实现与其他物质的分离。。2.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,电极设置时,正极位于液体管内液体的上方,负极在液体管内液体的下方;所述的电极为bio
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rad电泳电极。3.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,电极两端分别连接铂金丝,铂金丝没入液体管的液体中。4.一种脐带间充质干细胞来源的外泌体,其特征在于,采用权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员:刘启兵,吴昊霖,方星悦,吴昕泽,符兆理,徐怡倩,郭青云,易西南,
申请(专利权)人:海南医学院第一附属医院,
类型:发明
国别省市:
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