一种核桃粕环氧化酶-2（COX-2）抑制肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种核桃粕环氧化酶

【技术实现步骤摘要】
一种核桃粕环氧化酶
‑
2(COX
‑
2)抑制肽及其应用


[0001]本专利技术涉及一种核桃粕环氧化酶
‑
2(COX
‑
2)抑制肽及其应用，属于食品深加工


技术介绍

[0002]环氧化酶
‑
2(COX
‑
2)是一种具有多种生物功能的重要酶。近年来，它因其在食品和医疗行业的多种功能和广泛的应用而备受关注。COX
‑
2是炎症的关键介质，已被确定为炎症、糖尿病和镇痛的重要治疗目标。虽然COX
‑
2抑制药物已被广泛研究，但有相当多的研究证据表明，COX
‑
2抑制药物有明显的副作用。因此，从天然产品中生产COX
‑
2抑制剂是非常重要的。
[0003]核桃粕是核桃油的生产过程中产生的副产物，蛋白质含量高达40
‑
50％，含有丰富的必需氨基酸，具有较高的营养价值和相关产品开发的潜力。然而，目前对核桃加工之后产生的副产物资源利用尚不够充分。多项研究表明，不仅核桃蛋白含有较高的营养价值，而且核桃来源的多肽还呈现较高的活性，包括抗炎、抗氧化、抗骨质疏松、抑制二肽基肽酶IV(DPP
‑
IV)活性等。然而，尚无研究报道从植物蛋白中释放具有COX
‑
2抑制活性的生物活性肽。
[0004]虚拟筛选技术是一种从数据库中定向寻找活性小分子的方法。与从蛋白质中分离生物活性肽的传统方法(如超滤、凝胶排阻色谱、反向HPLC等)相比，具有灵活、可靠、快速和高效的特点。此外，虚拟筛选和体外实验相结合的方法已被证明可有效地筛选和鉴定蛋白质中潜在的生物活性肽。

技术实现思路

[0005]为解决以上问题，本申请以核桃粕为原料，通过酶解法制备活性多肽，并采用超滤法进行纯化，nano
‑
LC
‑
MS/MS鉴定多肽序列，并利用虚拟筛选和分子对接技术筛选COX
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2抑制活性片段，利用分子对接技术对COX
‑
2抑制活性多肽与受体蛋白COX
‑
2进行分子对接，针对打分较高的多肽进行人工合成并验证其COX
‑
2抑制活性，分析其相互作用的关键氨基酸及作用力。本专利技术提供一种提取自核桃粕的其COX
‑
2抑制肽，及上述COX
‑
2抑制肽在制备COX
‑
2抑制药物或产品中的应用：
[0006]本专利技术提供了一种COX
‑
2抑制肽，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP、FPGA、LFPD或VGFP；其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～4所示。
[0007]所述COX
‑
2抑制肽是氨基酸序列自C端至N端为Ala
‑
Gly
‑
Phe
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Pro的四肽，命名为AGFP(SEQ ID NO.1)。
[0008]所述COX
‑
2抑制肽是氨基酸序列自C端至N端为Phe
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ala的四肽，命名为FPGA(SEQ ID NO.2)。
[0009]所述COX
‑
2抑制肽是氨基酸序列自C端至N端为Leu
‑
Phe
‑
Pro
‑
Asp的四肽，命名为LFPD(SEQ ID NO.3)。
[0010]所述COX
‑
2抑制肽是氨基酸序列自C端至N端为Val
‑
Gly
‑
Phe
‑
Pro的四肽，命名为VGFP(SEQ ID NO.4)。
[0011]本专利技术还提供了一种药品，所述药品中上述COX
‑
2抑制肽。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述药品中还含有任何符合药品(药物学)生产允许或可接受的药物载体和/或药用辅料。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP时，所述药品中AGFP的添加量至少为：3.69g；所述COX
‑
2抑制肽为FPGA时，所述药品中FPGA的添加量至少为：0.76g；所述COX
‑
2抑制肽为LFPD时，所述药品中LFPD的添加量至少为：0.88g；所述COX
‑
2抑制肽为VGFP时，所述药品中VGFP的添加量至少为：4.58g。。
[0014]本专利技术还提供了上述COX
‑
2抑制肽在制备抗炎和/或镇痛的药品中的应用。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述药品中还含有任何符合药品(药物学)生产允许或可接受的药物载体和/或药用辅料。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP时，所述药品中AGFP的添加量至少为：3.69g；所述COX
‑
2抑制肽为FPGA时，所述药品中FPGA的添加量至少为：0.76g；所述COX
‑
2抑制肽为LFPD时，所述药品中LFPD的添加量至少为：0.88g；所述COX
‑
2抑制肽为VGFP时，所述药品中VGFP的添加量至少为：4.58g。。
[0017]本专利技术提供了一种饲料添加剂，所述饲料添加剂中含有所述COX
‑
2抑制肽。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP时，所述药品中AGFP的添加量至少为：3.69g；所述COX
‑
2抑制肽为FPGA时，所述药品中FPGA的添加量至少为：0.76g；所述COX
‑
2抑制肽为LFPD时，所述药品中LFPD的添加量至少为：0.88g；所述COX
‑
2抑制肽为VGFP时，所述药品中VGFP的添加量至少为：4.58g。。
[0019]本专利技术还提供了上述COX
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2抑制肽在制备抗炎和/或镇痛的饲料添加剂中的应用。
[0020]有益效果
[0021](1)本专利技术从核桃粕中提取核桃蛋白，使用六种蛋白酶酶解制备了高COX
‑
2抑制活性多肽，采用超滤法进行纯化，经nano
‑
LC
‑
MS/MS鉴定多肽序列，并利用虚拟筛选和分子对接技术筛选COX
‑
2抑制活性片段，利用分子对接技术对COX
‑
2抑制活性多肽与受体蛋白COX
‑
2进行分子对接，针对打分较高的多肽进行人工合成并验证其COX
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2抑制活性，并分析其相互作用的关键氨基酸及作用力，为核桃粕的深度开发利用奠定了理论基础。
[0022本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种COX
‑
2抑制肽，其特征在于，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP、FPGA、LFPD或VGFP；其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～4所示。2.一种药品，其特征在于，所述药品中含有权利要求1所述的COX
‑
2抑制肽。3.根据权利要求2所述的药品，其特征在于，所述药品中还含有药物载体和/或药用辅料。4.根据权利要求2或3所述的药品，其特征在于，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP时，所述药品中AGFP的添加量至少为：3.69g；所述COX
‑
2抑制肽为FPGA时，所述药品中FPGA的添加量至少为：0.76g；所述COX
‑
2抑制肽为LFPD时，所述药品中LFPD的添加量至少为：0.88g；所述COX
‑
2抑制肽为VGFP时，所述药品中VGFP的添加量至少为：4.58g。5.权利要求1所述的COX
‑
2抑制肽在制备抗炎和/或镇痛的药品中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药品中还含有药物载体和/或药用辅料。7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述COX
‑
2抑制肽为AGFP时，所述药品中AGFP的添加量至少为：3.69g；所述COX
‑
2抑制肽为FPGA时，所述药品中FPGA的添加量至少为：0.76g；所述COX
‑
2抑制肽为LFPD时，所述药品中LFPD的添加量至少为：0.88g；所述COX
‑
2抑制肽为VGFP时，所述药品中VGFP的添加量至少为：4.58g。8.一种饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂中含有权利要求1所述的COX

【专利技术属性】
技术研发人员：田洋，解静，弘子姗，盛军，代晶晶，李婷婷，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：