一种植物干细胞系及其建立方法和应用技术

本发明专利技术涉及植物干细胞系及其建立方法和应用，其中，建立植物干细胞系的方法包括（a）、干细胞培育；（b）、干细胞筛选；（c）、干细胞继代培育：每代培育结束后、下次继代培育之前，都进行上述干细胞筛选步骤（b），以获得来自于一个克隆的植物干细胞团块；（d）、干细胞筛选；（e）、干细胞建系：每代培育结束后、下次继代培育之前，都进行上述干细胞筛选步骤（d），直至获得一个或多个植物干细胞系；（f）、干细胞系驯化获得性状稳定、分裂稳定、分裂快速的一个或多个植物干细胞系。物干细胞系。

【技术实现步骤摘要】
一种植物干细胞系及其建立方法和应用


[0001]本专利技术属于干细胞领域，具体涉及一种植物干细胞系及其建立方法和应用。

技术介绍

[0002]由于如铁皮石斛等药用植物自然繁殖率低，而市场需求量大，因此，研究人员对药用植物的人工培养技术进行了大量研究。
[0003]如授权公告号为CN1275513C公开了铁皮石斛芽簇及其制备方法和用途，其通过对铁皮石斛或种子苗的茎尖或根尖进行无性系变异、诱变、再生和无激素增殖，获得生长速度比野生铁皮石斛快且有效成分与野生铁皮石斛相近且保持稳定的芽簇。
[0004]如授权公告号为CN104928229B和CN105238736B均涉及铁皮石斛干细胞的制备，其通过对去除根冠的铁皮石斛根尖进行清洗、消毒后利用固体培养基或筛选培养基分离其干细胞，再利用液体培养基对其进行传代培养，过滤后冻干制成铁皮石斛干细胞冻干粉。
[0005]上述专利在生产芽簇或者干细胞产品时，均需要重复整个制备过程，即需要自铁皮石斛的根尖或茎尖为起始物来进行生产。因此，该些方法存在生产周期长、生产流程复杂、耗时耗力等问题。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种建立植物干细胞系的方法，其特征在于：包括如下步骤：（a）、干细胞培育：将植物干细胞的多个碎屑间隔分布到固态植物干细胞培养基上，在黑暗条件下对植物干细胞进行培育，所述的多个碎屑之间的间隔分布距离足够大，使得培育长大后的植物干细胞团块不会互相接触；（b）、干细胞筛选：选取培育中明显生长快、颜色一致、形态一致的植物干细胞团块，分切成多个碎屑；（c）、干细胞继代培育：将分切后的植物干细胞碎屑再间隔分布到固态植物干细胞培养基上，在黑暗条件下对植物干细胞进行继代培育；每代培育结束后、下次继代培育之前，都进行上述干细胞筛选步骤（b），以获得来自于一个克隆的植物干细胞团块；（d）、干细胞筛选：选取培育中明显生长快的植物干细胞团块；（e）、干细胞建系：将选取的植物干细胞团块在固态植物干细胞培养基上，在黑暗条件下进行继代培育；每代培育结束后、下次继代培育之前，都进行上述干细胞筛选步骤（d），直至获得一个或多个植物干细胞系；（f）、干细胞系驯化：将已建立的一个或多个植物干细胞系的碎屑再间隔分布到固态条件植物干细胞培养基上，在黑暗条件下对植物干细胞进行继代培育；每代培育结束后、下代培育之前，淘汰与前代相比褐化或颜色改变或分裂速度缓慢的团块，多代培育结束后，获得性状稳定、分裂稳定、分裂快速的一个或多个植物干细胞系。2.根据权利要求1所述的建立植物干细胞系的方法，其特征在于：所述的步骤（a）中的植物干细胞来自于植物的静止中心诱导的愈伤组织；获得所述的步骤（a）中的植物干细胞的具体步骤为：将植物的静止中心切碎形成碎屑，在黑暗条件下扩增培育愈伤组织，然后将愈伤组织切成碎屑，间隔分布于固态的愈伤组织诱导培养基中进行扩增，再对扩增后的愈伤组织继代培育；每代培育结束后、下代培育之前，都选取培育中颜色和形态基本保持一致的扩增后的愈伤组织，去除褐化部分后分成小块，再间隔分布于固态的愈伤组织诱导培养基中，所述的间隔分布距离足够大，使得培...

【专利技术属性】
技术研发人员：张杰，吴红升，
申请(专利权)人：苏州普朗特尔皮肤细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：