本发明专利技术公开了一种同时检测多种维生素的方法及其应用，能够同时检测9种维生素，包括维生素B1、B2、B3(烟酸和烟酰胺)、B5(泛酸)、B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)和B12检测方法，用以快速高效的解决药品和保健食品里面维生素B含量。高效的解决药品和保健食品里面维生素B含量。高效的解决药品和保健食品里面维生素B含量。
【技术实现步骤摘要】
一种同时检测多种维生素的方法及其应用
[0001]本专利技术属于检测领域，尤其是涉及一种多维生素检测方法。
技术介绍
[0002]B族维生素是人体内糖类、脂肪、蛋白质等代谢时不可缺少的物质。B族维生素多数都溶于水，包括维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生B6、维生素B12等，作为辅酶对人体内糖、脂肪和蛋白质的代谢起着至关重要的作用；B族维生素由生物活性相似但化学成分不同的化合物组成，可以以自由形式存在。目前市面上销售的药品和保健食品类别添加的维生素主要包括维生素B1、B2、B3(烟酸和烟酰胺)、B5(泛酸)、B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)和B12，目前尚无同时检测上述9种维生素的的检测分析方法。
技术实现思路
[0003]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足之处，旨在建立一种通用的检测维生素B1、B2、B3(烟酸和烟酰胺)、B5(泛酸)、B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)和B12检测方法，用以快速高效的解决药品和保健食品里面维生素B含量。
[0004]本专利技术提供一种同时检测多种维生素的方法，所述方法采用液相色谱法，步骤包括：(1)采用盐酸水溶液处理样品，并采用盐酸水溶液作为进样溶剂；(2)进行洗脱，洗脱水相采用乙酸水溶液，有机相采用甲醇。
[0005]进一步的，采用处理样品的盐酸水溶液，0.05
‑
0.5mol/L盐酸水溶液；优选的，进样溶剂：0.2mol/L盐酸水溶液。
[0006]进一步的，处理样品中采用超声和/或离心和/或过滤的操作。例如加入盐酸水溶液，超声超声再振摇，保证样品分散均匀，离心取上清液；并进行重复提取；然后定容后进行过滤。进一步的，定容溶液与处理样品的盐酸水溶液浓度相同或相近。
[0007]进一步的，进样溶剂：0.05
‑
0.5mol/L盐酸水溶液；优选的，进样溶剂：0.2mol/L盐酸水溶液。
[0008]进一步的，水相：0.0.1％
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0.5％乙酸水溶液；优选的，水相：0.1％乙酸水溶液；进一步的，乙酸水溶液中含有庚烷磺酸钠和三乙胺；进一步的，1
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100mmol庚烷磺酸钠和0.01
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1％三乙胺；优选的10mmol庚烷磺酸钠和0.1％三乙胺。
[0009]进一步的，检测波长，维生素B5:180
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230nm；其他维生素：240
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290nm。进一步的，维生素B5:202nm；其他维生素：266nm。
[0010]所述方法，步骤还包括：(3)标准溶液的配制检测，标准曲线的制作；(4)目标检测物的含量计算。
[0011]步骤(3)与步骤(1)、(2)并没有顺序上的严格要求；即步骤(3)在步骤(1)、(2)的任何位置进行都在本专利的保护范围之内。
[0012]本专利的有益效果：(1)通过高浓度的盐酸水溶液进行处理和进样，将目标化合物溶解在稀释液中，配合液相色谱法，能够快速地、准确地检测目标化合物的含量，专属性强、
重现性好，能够弥补现有标准和其他定量的方法的不足，提高色谱柱的保留情况，并且检测目标化合物在酸性条件下更加稳定，此外，能够除去样品中可能包含的蛋白质等。(2)现有技术中没有同时能够检测9种B族维生素的方法，尤其是没有能够同时检测包含维生素B5的检测方法，原因在于，维生素B5检测波长与其他B族维生素检测波长不同，因为针对不同波长均具有良好的效果的流动相是十分重要的。而本专利洗脱水相采用乙酸水溶液，有机相采用甲醇，能够很好的匹配两种不同的波长。(3)本专利流动相中的庚烷磺酸钠和三乙胺，能够更好的稳定峰型，加强保留，提高检测的准确性和重现性。
附图说明
[0013]图1为266nm基质空白谱图；
[0014]图2为202nm基质空白谱图；
[0015]图3为标准工作溶液谱图(混标)；
[0016]图4为维生素B1的标准工作溶液谱图；
[0017]图5为维生素B2标准工作溶液谱图；
[0018]图6为维生素B12标准工作溶液谱图；
[0019]图7为吡哆胺标准工作溶液谱图；
[0020]图8为吡哆醇标准工作溶液谱图；
[0021]图9为吡哆醛标准工作溶液谱图；
[0022]图10为烟酸标准工作溶液谱图；
[0023]图11为烟酰胺标准工作溶液谱图；
[0024]图12为泛酸标准工作溶液谱图；
[0025]图13为烟酰胺浓度
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峰面积的线性回归图；
[0026]图14为烟酸浓度
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峰面积的线性回归图；
[0027]图15为吡哆醛浓度
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峰面积的线性回归图；
[0028]图16为维生素B12浓度
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峰面积的线性回归图；
[0029]图17为吡哆胺浓度
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峰面积的线性回归图；
[0030]图18为吡哆醇浓度
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峰面积的线性回归图；
[0031]图19为维生素B2浓度
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峰面积的线性回归图；
[0032]图20为维生素B1浓度
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峰面积的线性回归图；
[0033]图21为泛酸浓度
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峰面积的线性回归图；
具体实施方式
[0034]为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本专利技术的限定。
[0035]本专利技术实施例提供了一种一种通用的保健食品里面维生素B1、B2、B3(烟酸和烟酰胺)、B5(泛酸)、B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)和B12检测方法，具体如下：
[0036]液相色谱仪为沃特氏公司生产的Waters 2695，检测器为DAD检测器，具体仪器检测条件如下：
[0037](1)色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18 4.6mm
×
250mm，5μm；
[0038](2)流速：1mL/min；
[0039](3)柱温：30℃；
[0040](4)进样量：20μL；
[0041](5)检测波长：
[0042]维生素B5:202nm；
[0043]其他维生素：266nm
[0044](6)有机相：甲醇；
[0045](7)水相：0.1％乙酸水溶液(10mmol庚烷磺酸钠和0.1％三乙胺)；
[0046](8)进样溶剂：0.2mol/L盐酸水溶液
[0047](9)梯度洗脱：条件如下：
[0048]表1梯度洗脱的条件
[0049]时间(min)有机相(％)水相(％)029832983580204080204129845298
[0050]标准工作溶液的制备方法：
[0051]取标准品适量，精密称定，置于10mL容量瓶中，加0.2mol/L盐酸溶液定容，得本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种同时检测多种维生素的方法，所述方法采用液相色谱法，其特征在于，步骤包括：(1)采用盐酸水溶液处理样品，并采用盐酸水溶液作为进样溶剂；(2)进行洗脱，洗脱水相采用乙酸水溶液，有机相采用甲醇。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，采用处理样品的盐酸水溶液，0.05
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0.5mol/L盐酸水溶液；优选的，进样溶剂：0.2mol/L盐酸水溶液。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，进样溶剂：0.05
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0.5mol/L盐酸水溶液；优选的，进样溶剂：0.2mol/L盐酸水溶液。4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，水相：0.0.1％
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0.5％乙酸水溶液；优选的，水相：0.1％乙酸水溶液；进一步的，乙酸水溶液中含有庚烷磺...
【专利技术属性】
技术研发人员：范中伟，司淑芬，李靖，
申请(专利权)人：南京北极光质检技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：
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