熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用制造技术

本申请公开熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用；或者是熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经炎症的制剂产品中的应用；又或者是熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经元变性的制剂产品中的应用。本申请利用了脑肠轴的关系，从肠道菌群及其代谢物的角度确认熊去氧胆酸的作用，为通过肠道菌及其代谢物介入脑卒中的预防和治疗提供了基础。供了基础。

【技术实现步骤摘要】
熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用


[0001]本申请涉及医学领域，尤其涉及一种熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用。

技术介绍

[0002]脑血管疾病是全世界致残和死亡的主要原因之一，而急性缺血性卒中在其中占70％，它是指各种原因导致的脑血管突然闭塞引起的异常脑灌注所致，并且产生缺血缺氧性坏死，进而出现神经功能障碍的临床表现。
[0003]近年来，多项高水平研究反复证实大脑与肠道之间存在相互作用的回路，肠道菌群的代谢物可通过神经、免疫等途径影响大脑功能，即“脑肠轴”。多篇论文揭示肠道菌群与脑卒中严重程度及预后相关，多项研究表明肠道菌群紊乱与卒中不良预后存在因果关系，锁定在其中发挥作用的菌群代谢产物是关键。

技术实现思路

[0004]本申请的目的是，至少部分克服现有技术的不足，利用肠道菌群代谢产物之一——熊去氧胆酸，应用于制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品。
[0005]为达到以上技术目的，本申请采用的技术方案如下：
[0006]第一方面，提供熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用。
[0007]第二方面，提供熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经炎症的制剂产品中的应用。
[0008]第三方面，提供熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经元变性的制剂产品中的应用。
[0009]如前所述的应用，所述熊去氧胆酸来源于肠道菌的代谢物。
[0010]可选择地，所述肠道菌包括厚壁菌门、疣微菌科或粪球菌。
[0011]优选地，所述制剂产品为口服制剂。
[0012]进一步优选地，所述制剂产品的活性成分包括熊去氧胆酸。
[0013]可选择地，所述活性成分包括肠道菌菌剂、肠道菌代谢物提取物和熊去氧胆酸纯品中的至少一种。
[0014]与现有技术相比较，本申请具有如下优势：
[0015](1)本申请利用了脑肠轴的关系，从肠道菌群及其代谢物的角度确认熊去氧胆酸的作用，为通过肠道菌及其代谢物介入脑卒中的预防和治疗提供了基础。
[0016](2)本申请经过了体外实验验证和小鼠模型的体内实验验证，进一步证实了熊去氧胆酸对脑神经元的保护作用，具有抗炎效果，为熊去氧胆酸应用于临床提供了基础。
附图说明
[0017]图1示出卒中小鼠和正常小鼠的肠道菌群的差异。A：两组小鼠肠道菌群的α多样性；B：两组小鼠肠道菌群的β多样性；C：两组小鼠在门水平上肠道菌群的堆积图；D：两组小鼠在属水平上肠道菌群的堆积图；E：两组小鼠的Lefse分析结果。
[0018]图2示出卒中小鼠和正常小鼠的胆汁酸变化。A：两组小鼠粪便胆汁酸变化；B：两组小鼠血浆胆汁酸变化；C：两组小鼠肝脏胆汁酸变化；D：两组小鼠脑组织UDCA变化。
[0019]图3示出卒中小鼠和正常小鼠的粪便与血浆胆汁酸与肠道菌群的关系。A:两组小鼠粪便胆汁酸与肠道菌群的相关性分析；B：两组小鼠血浆胆汁酸与肠道菌群的相关性分析。
[0020]图4示出利用本申请的UDCA缓解卒中小鼠脑损伤和保护神经和认知功能。A：卒中后三组小鼠的神经功能评分；B
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C：卒中后三组小鼠的脑梗死体积的比较；D
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F：Morris水迷宫评价三组小鼠卒中后认知功能。
[0021]图5示出利用本申请的UDCA减少卒中后海马区激活的小胶质细胞数量。A
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B：MCAO和DMSO组的激活的小胶质细胞呈棒状、球形和阿米巴样外观,UDCA组激活的小胶质细胞数量减少，且胞体小，突触长。
[0022]图6示出利用本申请的UDCA减轻小鼠海马区的神经元损伤。A.各组小鼠海马区的Nissl染色结果，UDCA组的尼氏小体较MCAO及DMSO组明显增多(分别为10x及20x)。B
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C.各组小鼠海马区的TUNEL染色结果,UDCA干预后凋亡细胞数量减少(scale bar＝50μm)。***P<0.001。
[0023]图7示出利用本申请的UDCA可通过TGR5影响NLRP3炎症小体的表达。A.UDCA干预后TGR5表达增多B
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D.UDCA干预后NLRP3炎症小体表达减少，而抑制TGR5表达后，UDCA的抗炎作用消失。P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。
[0024]图8示出TGR5敲除后消除了UDCA的抗炎作用。A
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B：TTC染色及脑梗死面积统计；C：WB显示其蛋白变化；D
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I：TGR5,cAMP,p
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PKA/PKA,NLRP3,ASC,IL
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1β的定量分析。n＝9,*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。
[0025]图9示出抑制PKA表达后消除了UDCA的抗炎作用。A
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B：TTC染色及脑梗死面积统计；C：WB显示其蛋白变化；D
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I：TGR5,cAMP,p
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PKA/PKA,NLRP3,ASC,IL
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1β的定量分析。n＝9,*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。
具体实施方式
[0026]以下结合附图和具体实施方式对本申请作进一步详细描述。
[0027]目前研究较多的肠道菌群代谢产物有γ
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氨基丁酸、去甲肾上腺素、多巴胺、5
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羟色胺、酪胺、色氨酸以及次级胆汁酸等。根据本申请的研究背景，选定次级胆汁酸作为主要的代谢组学分析目标，胆汁酸是由胆固醇代谢，在胆固醇7α
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羟化酶(cholesterol 7α
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hydroxylase,CYP7A1)的催化下生成胆酸(cholic acid,CA)和鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)，而次级胆汁酸由CA和CDCA在肠道细菌的作用下生成，主要为石胆酸(lithocholic Acid，LCA)、熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic Acid，UDCA)、去氧胆酸(Deoxycholic Acid，DCA)，然后它们与牛磺酸或者甘氨酸结合后参与肠肝循环。越来越多的研究表明，胆汁酸及其受体不仅参与机体的代谢性疾病，还参与阿尔茨海默病、帕金森
Classifier 18与Green Genes 19(version 13.8)数据库对序列进行分类注释。
[0039]采用Shannon以及PD_whole tree指数来反应肠道菌群的α多样性，我们发现MCAO组的Shannon以及PD_whole 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗缺血性脑卒中的制剂产品中的应用。2.熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经炎症的制剂产品中的应用。3.熊去氧胆酸在制备用于预防或治疗神经元变性的制剂产品中的应用。4.如权利要求1～3任意一项所述的应用，其特征在于，所述熊去氧胆酸来源于肠道菌的代谢物。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：何彦，张锋，尹恝，周宏伟，王晖迪，邓依霆，段卓，蔡怡迦，伍广燕，
申请(专利权)人：南方医科大学珠江医院，
类型：发明
国别省市：