从猕猴桃根提取抗肿瘤药剂及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种从猕猴桃根提取抗肿瘤药剂及其制备方法，猕猴桃根的乙酸乙酯提取物（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ?ｄｅｌｉｃｉｏｓａ?ｅｔｈｙｌ?ａｃｅｔａｔｅ?ｅｘｔｒａｃｔｓ，ＡＤＥＥ）和正丁醇提取物（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ?ｄｅｌｉｃｉｏｓａ?ｎ２ｂｕｔａｎｏｌ?ｅｘｔｒａｃｔｓ，ＡＤＢＥ）具有明显的体内抗肿瘤作用。本发明专利技术设计了提取方法，并建立Ｓ１８０小鼠肉瘤和Ｈ２２肝癌腹水瘤模型。乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对Ｓ１８０实体瘤的生长有显著的抑制作用，能够明显延长Ｈ２２肝癌腹水瘤小鼠生命存活时间，并具有一定的免疫促进作用。猕猴桃根的乙酸乙醇提取物和正丁醇提取物在小鼠体内具有明显的抗肿瘤作用。

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
近年来，多名学者对猕猴桃科猕猴桃属植物的抗肿瘤作用进行了研究，已证实中 华猕猴桃根中的肽多糖、中越猕猴桃根的提取物及山梨猕猴桃根的提取物均具有抗肿瘤作 用〔1 4〕。称猴桃(A Ctin2 id ia deliciosa C1F1 liang etlAlRlFerguson)为称猴桃 科猕猴桃属植物，其根的60%乙醇提取物在体外具有抑制肿瘤细胞生长的作用〔5〕，然而 猕猴桃根的提取物对动物体内接种的肿瘤是否具有抑制作用未见有公开研究报道。另外， 笔者在前期的体外实验研究中发现，猕猴桃根的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对肿瘤细 胞的生长有较明显的抑制作用，故本实验以体内接种S180实体瘤和H22肝癌腹水瘤的小鼠 为对象，对猕猴桃根的乙酸乙酯和正丁醇提取物的体内抗肿瘤作用及其对免疫功能的调节 作用进行了初步研究。经过对猕猴桃根乙酸乙酯提取物对S180实体瘤的抑制作用无菌 条件下取接种第7d生长良好的S180瘤源动物的腹水，立即置无菌管中，以注射用生理盐水 按1 3比例稀释成瘤细胞悬液，并计数调整细胞浓度为2X107个活瘤细胞/ml。取50只 小鼠，雌雄各半，每只小鼠右前肢腋下皮下注射接种012ml。接种后次日称重，随机分成五 组，空白对照组(ig等体积蒸馏水)、阳性对照组(ip CTX 0102g/kg，隔日给药)、猕猴桃根 乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组(ig ADEE剂量分别为3130、1165、01825g/kg)，连续给药 10d。末次给药24h后称重，脱白处死动物，剪开肿瘤部位，剥离瘤块，用滤纸吸净其上液体， 称瘤块重量，计算抑瘤率。并且分离胸腺和脾脏，精密称重，计算胸腺和脾脏指数。抑瘤率 =(1-T/C) X 100% T为实验组平均瘤重，C为空白对照组平均瘤重。11412猕猴桃根正丁 醇提取物对S180实体瘤的抑制作用猕猴桃根正丁醇提取物高、中、低剂量组(ig ADBE剂 量分别为6152、3126、1163g/kg)。其余方法同11411。11413猕猴桃根乙酸乙酯和正丁醇提 取物对H22肝癌腹水瘤小鼠生命延长率试验取接种后7d的H22肝癌腹水(乳白色)，以 生理盐水1 2稀释后，取稀释后的细胞瘤液(1X107个活瘤细胞/ml)，每只小鼠腹腔注射 012ml，次日称重、分组，开始给药，给药剂量和方式同11411，连续给药10d，隔日称体重，记 录动物死亡时间，计算生命延长率。小鼠生命延长率计算ILS = (T/C-l) X100% T为给药 组小鼠平均存活天数，C为空白对照组小鼠平均存活天数。
技术实现思路
近年来对狗枣猕猴桃根的化学成分分析、药理实验等已有文献报道，例如，李淑华 等报道了从狗枣猕猴桃的根中提取的寡糖(简称AK0S)对小鼠免疫功能的调节作用，结果 表明AK0S是一种有效的免疫调节剂，对于增强机体的免疫功能具有一定的意义；李平亚等从长白山产狗枣猕猴桃根中，分离得到两个 白色单体，经光谱分析和化学方法鉴定为狗枣三糖。对中华猕猴桃的药理阶段性研究，本发 明人已作了部分报道，但到目前为止，尚未见关于将中华猕猴桃根有效部位制成制剂，并通 过体内外实验对其药理与临床进行系统研究的文献报道。尽管对猕猴桃的研究已经报道很 多，但是，由于猕猴桃种类繁多，而且其根部所含有效成分复杂，所具有的药理作用也各不 相同，因此，对狒猴桃的有效部位提取和制剂研究，以及进一步的药理和临床研究是当前的重要研究课题。特别是对于中药的提取和分离，一方面要考虑其有效成分的纯度和结构。另 一方面还要考虑提取物的有效性，通常这两者很难达到统一，在这种情况下，从猕猴桃根中 提取有效部位而制备一种疗效广泛而又效果良好的药物制剂，是当前这一领域需要解决的 一个技术难题。本专利技术目的是从中华猕猴桃的根部提取一种有效部位，制成药物制剂。所述的药 物制剂具有扶持正气、增强免疫功能；祛疫疠、增强机体抗感染的能力和消肿散结、抑制肿 瘤的作用。本专利技术的另一个目的是提供一种从中华猕猴桃的根中提取具有所述特定药用作 用的有效部位的方法。本专利技术的另一个目的是提供一种以中华猕猴桃根部有效部位制备药物的方法。本专利技术所述的药物制剂含有治疗有效量的中华猕猴桃根部多糖总提取物，优选含 有10-80%重量比的中华猕猴桃根部多糖总提取物。本专利技术所述的药物制剂含有治疗有效量的以下述方法从中华猕猴桃根部提取的 有效部位取猕猴桃根片，加2-8倍量20-50%的乙醇浸渍1_3次，每次18_30小时，取上清 液，合并，加乙醇调至含乙醇量为60-95%，静置，离心，沉淀物并用2-7倍量50-80%的乙 醇、无水乙醇各洗一次，弃去洗液，沉物再加2-4倍量乙醚洗涤一次，弃去乙醚液，沉淀物室 温减压干燥，研碎得粉。本专利技术所述的药物制剂优选含有20-70%重量比的以下述方法从中华猕猴桃根部 提取的有效部位取猕猴桃根片，加3-6倍量25-40%的乙醇浸渍1_3次，每次20_28小时，取上清 液。合并，加乙醇调至含乙醇量为65-80%静量，离心，沉淀物并用3-6倍量60-78%的乙 醇、无水乙醇各洗一次，弃去洗液，沉淀物再加2-4倍量乙醚洗涤一次，弃去乙醚液，沉淀物 室温减压干燥，研碎得粉。本专利技术所述的药物制剂优选含有30-65%重量比的以下述方法从中华猕猴桃根部 提取的有效部位取猕猴桃根片，洗净，加5倍量30%的乙醇浸渍2次，每次24小时，静置，取上清 液，合并，加乙醇调至含乙醇量为72%，静置24小时，离心，沉淀物并用5倍量72%的乙醇、 无水乙醇各洗一次，弃去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗涤一次，弃去乙醚液，沉淀物室温 减压干燥，研碎得粉。本专利技术药物制剂最佳含有40-60 %重量比的上述中华猕猴桃根部有效部位。本专利技术药物除了含有所述的中华猕猴桃根部有效部位之外，还含有常规的药物赋 性剂，例如，溶剂，填充剂，粘合剂，崩解剂，增溶剂，增稠剂，矫味剂，防腐剂，湿润剂，润滑剂寸。本专利技术所说的药物制剂，根据常规的制剂工艺，可以制成任何能够在临床上使用 的药物剂型，如，片剂，膏剂，口服液，注射剂，混悬剂，丸剂，散剂，滴眼液，眼药膏，擦剂，透 皮吸收剂，贴剂，胶囊剂，颗粒剂，栓剂等。本专利技术药物滴眼液的制备方法如下取猕猴桃根片，洗净，加5倍量30%的乙醇浸渍2次，每次24小时，静置，取上清液，合并，加乙醇调至含乙醇量为72%，静置24小时，离心，沉淀物并用5倍量72%的乙 醇、无水乙醇各洗一次，弃去洗液，沉淀物再加3倍量乙醚洗涤一次，弃去乙醚液，沉淀物室 温减压干燥，研碎得粉。粗粉加注射用水溶解，离心，取上清液，经微孔滤膜分级过滤，取 0. 45 u滤膜下的滤液，加入0. 03%的尼泊金乙酯与适量氯化钠，加注射用水调至每毫升含 多糖为1毫克的溶液，滤过，无菌罐封，即得。上述制法中，粗粉加注射用水溶解后，优选先用乳化机10000转搅拌3分钟，以 25000转/分钟离心1小时，倾取上清液，沉淀再加注射用水适量，再离心1小时，取上清液 与前次上清液合并，然后，再经微孔滤膜分级过滤，取0.45 y滤膜下的滤液。加入0.03% 的尼泊金乙酯与适量氯化钠，加注射用水调至每毫升含多糖为1毫克的溶液，滤过，无菌罐 封，即得。上述制法中，氯化钠的加入量以成品达到等渗压所需的量为准。上述药物的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以中华猕猴桃根制备的药物，其特征在于该药物含有治疗有效量的中华猕猴桃根多糖总提取物，对肿瘤尤其是肝脏肿瘤有疗效。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭蕾，
申请(专利权)人：郭蕾，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]