一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法技术

本发明专利技术涉及一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，以3

【技术实现步骤摘要】
一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法


[0001]本专利技术涉及一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，属于医学动物模型


技术介绍

[0002]幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)感染在非贲门型胃癌中的人群归因危险度百分比为75％
‑
89％。大量研究证据表明，根除Hp可有效地降低胃癌的发生风险，Hp感染是导致胃癌发病最主要的可控危险因素。因此，建立Hp感染的动物模型，对于研究Hp治疗方法或药物疗效尤为重要。
[0003]目前已报道的Hp感染动物模型中，灵长类动物如恒河猴虽与人类生理发育有高度相似性，但是由于其自然感染率高、饲养条件、成本高以及伦理等方面受到诸多限制；啮齿类动物如小鼠、SD大鼠、豚鼠的胃结构与人类相似，使用较为广泛，但是对于动物观察通常需要将其处死，由于其体型限制无法通过内窥镜检查(针对胃炎的检查)或对其进行长时间观测。
[0004]以上目前已报道的动物模型，一方面无法进行内窥镜检查，或者不允许长时间做内窥镜观察，另一方面，存在动物模型成功率不高，建模时间较长，操作复杂等缺陷。
[0005]因此，本领域迫切需要构建一种便于内窥镜检查，且能够应用多种治疗方法的、成本较低的针对幽门螺杆菌感染的动物模型，为研究幽门螺杆菌感染机制、探究幽门螺杆菌感染治疗方法提供基础。

技术实现思路

[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术一方面提供了一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，其中，所述构建方法以大白猪为试验动物，所述大白猪为3
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14日龄且体重为1.5～4kg的大白猪；所述构建方法包括接种前的处理步骤、接种步骤和接种后的饲养步骤；
[0007]所述接种前的处理步骤采用向口内喷洒10～20mg/kg吲哚美辛的方式；
[0008]所述接种步骤采用向口内喷洒幽门螺杆菌菌液的方式；
[0009]所述幽门螺杆菌菌液为幽门螺杆菌ATCC43504在无菌PBS中的菌悬液，其菌浓度为1
×
108cfu/mL～1
×
10
10
cfu/mL，且所述幽门螺杆菌菌液的喷洒量为0.5～0.8ml/kg。
[0010]优选的，所述接种前的处理步骤包括：将所述试验动物，先禁食2～6小时，向口内喷洒吲哚美辛后，再禁食1～3小时；每日处理一次，连续处理2～4天。
[0011]优选的，所述吲哚美辛的喷洒量为16mg/kg。
[0012]优选的，所述接种步骤包括：将经过所述接种前的处理步骤获得的试验动物，先禁食2～6小时，向口内喷洒幽门螺杆菌菌液后，再禁食1～3小时；每日接种一次，连续接种2～4天；重复上述的接种步骤0
‑
3次。
[0013]优选的，所述幽门螺杆菌菌液的菌浓度为1
×
109cfu/mL。
[0014]优选的，所述接种后的饲养步骤中，饲养时间为7
‑
60天。
[0015]本专利技术另一方面提供了上述的动物模型构建方法所构建的动物模型在筛选抗幽门螺杆菌感染的药物中的应用或者在幽门螺杆菌感染的实验研究中的应用。
[0016]本专利技术的幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，以3
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14日龄且体重为1.5～4kg的大白猪为试验动物，并摸索了适合该特定试验动物的建模方法和条件；采用本专利技术方法构建的动物模型，定植时间长，建模时间短，操作简便、成本较低，能够应用多种治疗方法。
附图说明
[0017]图1
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3分别为实施例1的猪胃近幽门组织、胃小弯组织和胃体组织的尿素酶反应结果。
具体实施方式
[0018]在本专利技术的一个具体实施方案中提供了一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，其中，所述构建方法以大白猪为试验动物，所述大白猪为3
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14日龄且体重为1.5～4kg的大白猪；所述构建方法包括接种前的处理步骤、接种步骤和接种后的饲养步骤；
[0019]所述接种前的处理步骤采用向口内喷洒10～20mg/kg吲哚美辛的方式；
[0020]所述接种步骤采用向口内喷洒幽门螺杆菌菌液的方式；
[0021]所述幽门螺杆菌菌液为幽门螺杆菌ATCC43504在无菌PBS中的菌悬液，其菌浓度为1
×
108cfu/mL～1
×
10
10
cfu/mL，且所述幽门螺杆菌菌液的喷洒量为0.5～0.8ml/kg。
[0022]关于针对幽门螺杆菌感染的“试验动物模型”的选择，基于现有技术的理论，一般选择易于饲养，并且稳定的、重现性好的模式动物，例如“无菌鼠”、“无菌猪”等。基于目前本领域技术人员的认知，在无菌环境下培养的模式动物，能够排除其他菌感染的干扰，能够保证幽门螺杆菌的“定植效果”以及实验结果的有效性。因此，对于本领域技术人员来说，通常会直接选择“无菌鼠”或“无菌猪”这样的动物模型。
[0023]然而，本申请的专利技术人突破了本领域技术人员的常规思维定势，尝试选择了普通的“大白猪”品种作为模式动物，意外发现，选择“3
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14日龄且体重为1.5～4kg的大白猪”，以及先后向口内喷洒“10～20mg/kg吲哚美辛”和“幽门螺杆菌菌液”的方式，也能够构建幽门螺杆菌感染的动物模型，并且实现了与常规“无菌猪”相似的定植效果，但相比之下，成本大幅降低。
[0024]下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0025]本申请实施例所采用的幽门螺杆菌(悉尼菌株SS1(H.pyloriSydneystrainSS1，HpSS1))，来源于仁济医院惠赠；其原始来源购自ATCC(ATCC43504)。
[0026]实施例1
[0027]实施例1的动物模型构建方法，选取了10日龄的大白猪12只(体重2.5～4kg)作为试验动物。
[0028]实施例1的动物模型构建方法包括接种前的处理步骤、接种步骤和接种后的饲养步骤。
[0029]接种前的处理步骤具体为：将试验动物先禁食4小时，向口内喷洒16mg/kg吲哚美
辛后，再禁食2小时(之后正常进食)；每日处理一次，连续处理3天。
[0030]接种步骤具体为：将经过上述接种前的处理步骤获得的试验动物，先禁食4小时，向口内喷洒幽门螺杆菌菌液(菌浓度为1
×
109cfu/mL，喷洒量为2ml)后经自然吞咽反应进入胃部，再禁食2小时(之后正常进食)；每日接种一次，连续接种3天。在本实施例中，上述的接种步骤仅做一个流程，不作重复。
[0031]实施例1的建模时间为6天(3+3)，建模时间短。
[0032]接种后的饲养步骤中，饲养时间为60天。该步骤采用常规的饲养条件，具体可以为至25日龄由母猪喂乳，之后15日混合喂养，之后本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种幽门螺杆菌感染的动物模型构建方法，其特征在于：所述构建方法以大白猪为试验动物，所述大白猪为3
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14日龄且体重为1.5～4kg的大白猪；所述构建方法包括接种前的处理步骤、接种步骤和接种后的饲养步骤；所述接种前的处理步骤采用向口内喷洒10～20mg/kg吲哚美辛的方式；所述接种步骤采用向口内喷洒幽门螺杆菌菌液的方式；所述幽门螺杆菌菌液为幽门螺杆菌ATCC43504在无菌PBS中的菌悬液，其菌浓度为1
×
108cfu/mL～1
×
10
10
cfu/mL，且所述幽门螺杆菌菌液的喷洒量为0.5～0.8ml/kg。2.如权利要求1所述的动物模型构建方法，其特征在于：所述接种前的处理步骤包括：将所述试验动物，先禁食2～6小时，向口内喷洒吲哚美辛后，再禁食1～3小时；每日处理一次，连续处...

【专利技术属性】
技术研发人员：张琪，梁俊，巴依娜，
申请(专利权)人：上海溯源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：