一种鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量的方法技术

一种鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量的方法，涉及水产养殖技术，需要提供一种鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量的方法，本发明专利技术在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟卵制备组织匀浆，其特征是用试剂盒测定卵子中总ＡＴＰ酶、肌酸激酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的活性，判断卵子质量好坏。本发明专利技术用于鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水产养殖技术，涉及到。
技术介绍
在养殖生产中，水生生物卵子质量的好坏直接影响到受精力的高低，进而影响到 出苗率和成活率，卵子质量的好坏和生产效益密切相关。因此，对水生生物卵子质量进行正 确评价具有重要的理论意义与应用价值。现阶段，对水生生物卵子质量评价报道较为少见， 一般采用组织切片染色后进行显微观察，这种方法流程较为烦琐，且只能观察到不同发育 时期的卵的内部结构和特征，不能从根本上判别某一发育时期的质量好坏，也不能直接指 导生产；另一种方法是将水生生物的卵子在开水中煮熟后，用刀片把卵子从中间切开，观察 卵子内核向动物极偏移的情况，计算极化指数，据此推断卵子的发育成熟度，但这种方法只 能人为判断卵子的成熟情况，不能鉴别卵子发育质量的好坏。还有一种方法是直接将卵子 与正常的精子进行受精，计算受精率、出膜率，但这种方法试验周期长，且容易受到外界环 境因子的干扰，可能影响最后的统计结果。因此，到目前为止，尚缺少一种有效的方法来鉴 别水生生物卵子的质量。
技术实现思路
本专利技术需要解决的问题是提供。本专利技术的技术方案是在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟的亲本若干尾，采集 一定数量的不同批次的成熟卵，制备组织勻浆后，其特征是用试剂盒分别测定不同批次卵 子中总ATP酶、肌酸激酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的活性，如果卵子中总ATP酶的活性高 于36. 31 士2. 50U/mgprot，肌酸激酶的活性高于0. 12士0. 008U/mgprot，琥珀酸脱氢酶的活 性高于17. 875士0. 559U/mgprot,乳酸脱氢酶的活性高于191. 876士 10. 672U/gprot，判断 为卵子质量较好；如果卵子中ATP酶的活性介于7. 006士0. 414U/mgprot和36. 31 士2. 50U/ mgprot 之间，肌酸激酶的活性介于 0. 022士0. 014U/mgprot 和 0. 12士0. 008U/mgprot 之 间，琥珀酸脱氢酶的活性介于3. 935士0. 64U/mgprot和17. 875士0. 559U/mgprot之间，乳 酸脱氢酶的活性介于32. 09士4. 09U/gprot和191. 876士 10. 672U/gprot之间，则判断为卵 子质量一般；如果卵子中ATP酶的活性低于7. 006士0. 414U/mgprot，肌酸激酶的活性低于 0. 022 士0. 014U/mgprot，琥珀酸脱氢酶的活性低于3. 935 士0. 64U/mgprot，乳酸脱氢酶的活 性低于32. 09士4. 09U/gprot，则判断为卵子质量差。本专利技术针对不同质量卵子中几种重要的参与能量代谢的酶的活性存在较大差异， 减少人为和外界环境因子的影响，更为客观准确地反应了卵子的质量，所用设备简单，价格 低廉，可节省时间和成本。具体实施例方式本专利技术在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟的亲本若干尾，每批次取5尾鱼的成熟卵，超声波离心后制备成10%的组织勻浆，用试剂盒(南京建成生物工程研究所)在分 光光度计下分别测定不同批次成熟卵中总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)^L 酸脱氢酶(LDH)的活性，每个样重复三次，结果取平均值，运用统计软件对结果进行分析处 理。如果卵子中总ATP酶的活性高于36. 31 士2. 50U/mgprot，CK的活性高于0. 12士0. 008U/ mgprot, SDH 的活性高于 17. 875士0. 559U/mgprot, LDH 的活性高于 191. 876士 10. 672U/ gprot,判断为卵子质量较好；如果卵子中ATP酶的活性介于7. 006士0. 414U/mgprot和 36. 31 士2. 50U/mgprot 之间，CK 的活性介于 0. 022士0. 014U/mgprot 和 0. 12士0. 008U/ mgprot 之间，SDH 的活性介于 3. 935士0 . 64U/mgprot 和 17. 875士0. 559U/mgprot 之间，LDH 的活性介于32. 09士4. 09U/gprot和191. 876士 10. 672U/gprot之间，则判断为卵子质量一 般；如果卵子中ATP酶的活性低于7. 006士0. 414U/mgprot，CK的活性低于0. 022士0. 014U/ mgprot，SDH 的活性低于 3. 935士0. 64U/mgprot，LDH 的活性低于 32. 09士4. 09U/gprot，则判 断为卵子质量差。运用这种方法鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子的质量较为准确和客观，鉴别准确 率可达到98%以上。权利要求，在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟的亲本若干尾，采集一定数量的不同批次的成熟卵，制备组织匀浆，其特征是用试剂盒分别测定不同批次卵子中总ATP酶、肌酸激酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的活性，如果卵子中总ATP酶的活性高于36.31±2.50U/mgprot，肌酸激酶的活性高于0.12±0.008U/mgprot，琥珀酸脱氢酶的活性高于17.875±0.559U/mgprot，乳酸脱氢酶的活性高于191.876±10.672U/gprot，判断为卵子质量较好；如果卵子中ATP酶的活性介于7.006±0.414U/mgprot和36.31±2.50U/mgprot之间，肌酸激酶的活性介于0.022±0.014U/mgprot和0.12±0.008U/mgprot之间，琥珀酸脱氢酶的活性介于3.935±0.64U/mgprot和17.875±0.559U/mgprot之间，乳酸脱氢酶的活性介于32.09±4.09U/gprot和191.876±10.672U/gprot之间，则判断为卵子质量一般；如果卵子中ATP酶的活性低于7.006±0.414U/mgprot，肌酸激酶的活性低于0.022±0.014U/mgprot，琥珀酸脱氢酶的活性低于3.935±0.64U/mgprot，乳酸脱氢酶的活性低于32.09±4.09U/gprot，则判断为卵子质量差。2.根据权利要求1所述的，其特征是每批次取 5尾鱼的成熟卵，超声波离心后制备成10%的组织勻浆。全文摘要，涉及水产养殖技术，需要提供，本专利技术在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟卵制备组织匀浆，其特征是用试剂盒测定卵子中总ATP酶、肌酸激酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的活性，判断卵子质量好坏。本专利技术用于鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量。文档编号G01N21/31GK101845479SQ20091004812公开日2010年9月29日 申请日期2009年3月24日 优先权日2009年3月24日专利技术者冯广朋, 刘鉴毅, 姚志峰, 庄平, 张涛, 江琪, 章龙珍, 赵峰, 闫文罡, 黄晓荣 申请人:中国水产科学研究院东海水产研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴别斑尾刺虾虎鱼卵子质量的方法，在斑尾刺虾虎鱼的繁殖季节，收集成熟的亲本若干尾，采集一定数量的不同批次的成熟卵，制备组织匀浆，其特征是用试剂盒分别测定不同批次卵子中总ＡＴＰ酶、肌酸激酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的活性，如果卵子中总ＡＴＰ酶的活性高于３６．３１±２．５０Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，肌酸激酶的活性高于０．１２±０．００８Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，琥珀酸脱氢酶的活性高于１７．８７５±０．５５９Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，乳酸脱氢酶的活性高于１９１．８７６±１０．６７２Ｕ／ｇｐｒｏｔ，判断为卵子质量较好；如果卵子中ＡＴＰ酶的活性介于７．００６±０．４１４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ和３６．３１±２．５０Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ之间，肌酸激酶的活性介于０．０２２±０．０１４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ和０．１２±０．００８Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ之间，琥珀酸脱氢酶的活性介于３．９３５±０．６４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ和１７．８７５±０．５５９Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ之间，乳酸脱氢酶的活性介于３２．０９±４．０９Ｕ／ｇｐｒｏｔ和１９１．８７６±１０．６７２Ｕ／ｇｐｒｏｔ之间，则判断为卵子质量一般；如果卵子中ＡＴＰ酶的活性低于７．００６±０．４１４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，肌酸激酶的活性低于０．０２２±０．０１４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，琥珀酸脱氢酶的活性低于３．９３５±０．６４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ，乳酸脱氢酶的活性低于３２．０９±４．０９Ｕ／ｇｐｒｏｔ，则判断为卵子质量差。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓荣，章龙珍，庄平，江琪，姚志峰，刘鉴毅，张涛，冯广朋，赵峰，闫文罡，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院东海水产研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]