一种生产乙二醇的运动发酵单胞菌重组菌株、构建方法及其应用技术

本申请属于生物基因工程技术领域，尤其涉及一种生产乙二醇的运动发酵单胞菌重组菌株、构建方法及其应用。本申请以运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis ZM4为模式菌株，首先通过基因工程手段对菌株进行改造，在质粒上过表达木糖酸脱氢酶xdh基因实现木糖到木糖酸的合成，再构建完全的Dahms pathway实现木糖酸到乙二醇的转化，最后筛选最适的木糖酸脱氢酶与乙醇醛还原酶，获得乙二醇高产的重组菌株。获得乙二醇高产的重组菌株。获得乙二醇高产的重组菌株。

【技术实现步骤摘要】
一种生产乙二醇的运动发酵单胞菌重组菌株、构建方法及其应用


[0001]本申请属于生物基因工程
，尤其涉及一种生产乙二醇的运动发酵单胞菌重组菌株、构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]乙二醇(EG)是最简单的双碳二醇，是一种经济上重要的平台化学品，全球需求量在稳步增长，被广泛用作不饱和聚酯树脂、聚醚和聚氨酯的酯化和醚化合成的单体。传统的乙二醇通过两步工艺生产，首先将葡萄糖发酵得到乙醇，然后将乙醇通过化学方法转化为乙二醇。这个过程效率低、能耗高、对环境不友好。因此，具有高选择性的生物乙二醇的生产是具有低能源需求的环境友好型策略。例如通过代谢工程改造大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)等微生物都能够利用木糖生产乙二醇，但其生产过程是严格的好氧发酵，生产成本较高且产生大量的副产物。
[0003]运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)作为一种天然产乙醇的兼性厌氧革兰氏阴性菌，具备独特E本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.生产乙二醇的运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株是携带并能够表达木糖酸合成途径相关基因和/或乙二醇合成途径相关基因的运动发酵单胞菌Z.mobilis ZM4。2.根据权利要求1所述的运动发酵单胞菌Z.mobilis的重组菌株，其特征在于，所述木糖酸合成途径相关基因包括木糖脱氢酶xdh基因，所述乙二醇合成途径相关基因包括木糖酸脱氢酶yagF基因、醛缩酶yagE基因、乙醇醛还原酶yqhD基因、木糖酸脱氢酶xylD和yjhG、醇脱氢酶fucO和ZMO1771基因。3.生产乙二醇的运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株转入了同时携带xdh基因、yagF基因、yagE基因和yqhD基因的表达质粒；或者所述重组菌株转入了同时携带xdh基因、xylD基因、yagE基因和yqhD基因的表达质粒；或者所述重组菌株转入了同时携带xdh基因、yjhG基因、yagE基因和yqhD基因的表达质粒；或者所述重组菌株转入了同时携带xdh基因、yagF基因、yagE基因和fucO基因的表达质粒；或者所述重组菌株转入了同时携带xdh基因、yagF基因、yagE基因和ZMO1771基因的表达质粒。4.表达乙二醇的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带了依次连接的xdh基因、yagF基因、yagE基因和yqhD基因的序列，所述xdh基因用Ppdc启动子启动表达，yagF基因、yagE基因和yqhD基因用RBS连接并由Peno启动子启动表达；或者所述重组质粒携带了依次连接的xdh基因、xylD基因、yagE基因和yqhD基因的序列，所述xdh基因用Ppdc启动子启动表达，xylD基因、yagE基因和yqhD基因用RBS连接并由Peno启动子启动表达；或者所述重组质粒携带了依次连接的xdh基因、yjhG基因、yagE基因和yqhD基因的序列，所述xdh基因用Ppdc启动子启动表达，yjhG基因、yagE基因和yqhD基因用RBS连接并由Peno启动子启动表达；或者所述重组质粒携带了依次连接的xdh基因、yagF基因、yagE基因和fucO基因的序列，所述xdh基因用Ppdc启动子启动表达，yagF基因、yagE基因和fucO基因用RBS连接并由Peno启动子启动表达；或者所述重组质粒携带了依次连接的xdh基因、yagF基因、yagE基因和ZMO1771基因，所述xdh基因用Ppdc启动子启动表达，yagF基因、yagE基因和ZMO1771基因RBS连接并由Peno启动子启动表达。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨世辉，晏雄鹰，李勉，王霞，何桥宁，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：