一种皮肤癣菌病快速检测抗体、试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种皮肤癣菌病快速检测抗体、试剂盒及其制备方法，该抗体为抗皮肤癣菌α

【技术实现步骤摘要】
一种皮肤癣菌病快速检测抗体、试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及微生物的领域，更具体地说，它涉及一种皮肤癣菌病快速检测抗体、试剂盒及其制备方法。

技术介绍

[0002]皮肤癣菌(Dermatophytes)是皮肤癣菌病的主要病原体，是一组丝状寄生性真菌，主要侵犯人或动物的皮肤、毛发和指(趾)甲，寄生或腐生于表皮角质、毛发和甲板的角蛋白组织，引起头癣、体股癣、手足癣和甲癣。
[0003]皮肤癣菌属于半知菌亚门丝孢纲丝孢目的丛梗孢科。根据大分生孢子的特征可将皮肤癣菌分为3个属，毛癣菌属(Trichophyton)、小孢子菌属(Microsporum)以及表皮癣菌属(Epidermophyton)。目前已报告的皮肤癣菌约有45种，其中一部分仅感染动物，对人类有致病作用的约有20余种。流行病学调查结果显示目前最多见的皮肤癣菌都是红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)。红色毛癣菌为亲人性皮肤癣菌，可引起体癣、股癣、手足癣、甲癣及脓癣，也可导致深部感染，引起皮肤癣菌肉芽肿。犬小孢子菌，是较常见的致病性真菌，其常常是头癣、体癣和少数甲癣以及其他少见真菌病的病原菌。犬小孢子菌作为亲动物性真菌，在动物身上可以长期存在而不致病(尤其在猫、狗身上)，而犬小孢子菌一旦感染人便造成皮肤或毛发的损害，危及人类健康。
[0004]目前，主要是通过形态学方法鉴定皮肤癣菌，但检测耗时长、结果判断易受外界多种因素影响，易导致对于非典型菌的鉴定不准确。
[0005]名称为一种检测红色毛癣菌的试纸条、试剂盒及试纸条的制备方法（公布号为CN 112014565A）的中国专利技术专利，是针对红色毛癣菌进行检测，但是其他种属的皮肤癣菌引起的皮肤癣菌病则无法检出。

技术实现思路

[0006]为了提高皮肤癣菌检测的准确性及适应性，本申请提供一种皮肤癣菌病快速检测抗体、试剂盒及其制备方法。
[0007]第一方面，本申请提供的一种皮肤癣菌病快速检测抗体，采用如下的技术方案：一种皮肤癣菌病快速检测抗体，为抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体，其轻链序列为SEQ ID NO.1，重链序列为SEQ ID NO.2。
[0008]其中，SEQ ID NO.1：DNA sequence (393bp)GGCAAGGCTCCCCGTAAGCAGCTCGCCTCCAAGGCTGCCCGCAAGTCCGCGCCCTCCACCGGAGGTGTCAAGAAGCCTCACCGCTACAAGCCTGGTACCGTCGCTCTGCGTGAGATCCGTCGCTACCAGAAGAGCACTGAGCTGCTGCCTTCCAGCGTCTGGTATGTCGCCGCCCCCGTCTTCTGAATGCCCGTGAGATCGCCCAGGACTTCAAGTCCGACCTCCGCTTCCAGTCCTCCGCCATCGGTGCCCGTCTCCCTCTTCGAGGACACCAACCTGTGCGCCATCCACGCCAAGCGTGTCACCATCCAGTCGGTACGTAACATATCTGCTTGACCCCACCCGCGACGCGTCTTGTGGCATACGCTAACAACCTC
ACAGAAGGACATCGTCSEQ ID NO.2：DNA sequence (412bp)AGGTGCTGCTTTCTGGTGCGTCCACCACCGCGACGCTCGACGCGCGACAACATGACCTCGAGCCATCGTTACTGACCTCGACTCTCAGGCAAACCATCTCTGGCGAGCACGGCCTCGACAGCAATGGCGTGTATGCACCTCCTATTTCCTGCCTCCTGCCGGCTTGGCACTGACAATCACACAGTTACAACGCCAGCTCGAGCGCATGAACGTCTACAGGTAAGTCAACAGCCACGTCATTGACCATCTGCAGCACGGTTTGCTGCCGTCGCTGGGGCCTTGCTAACGCGTTAAGTATGTCCCTCGCGCCGTCCTCGTCGATCTCGAGCCCGGTACCTTTGGCCAGCTCTTCCGCCCCGACAACTTCGTCTTCGGCCAGTCCGGTGCTGGAAACAACTGGGCCAAGGGTCAT第二方面，本申请提供的一种皮肤癣菌病快速检试剂盒，采用如下的技术方案：一种皮肤癣菌病快速检测试剂盒，包括所述的抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体。
[0009]真菌细胞壁的主要成分有几丁质、葡聚糖、纤维素、甘露聚糖等。真菌的细胞壁较厚，结构坚韧，其破壁难度较大，为此寻找一种简便快速，灵敏度及特异性高的诊断方法成为提高致病性真菌诊断率的关键。甘露聚糖是高度分支的多聚体，多以α
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1,6
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甘露糖为骨架链存在于细胞壁中。甘露聚糖能分泌在宿主皮肤上，是一种减轻免疫应答的物质，并有吸附病原菌和调节免疫的功能。半乳甘露聚糖是一种包含了甘露糖骨干与半乳糖旁基的多糖。致病性真菌主要有念珠菌，曲霉菌和毛癣菌三类。半乳甘露聚糖（GM）为曲霉属真菌细胞壁上特异性的抗原，甘露聚糖（MA）是念珠菌属特异性的抗原，而皮肤癣菌如红色毛癣菌也可产生甘露聚糖且在细胞壁中含量较高。半乳甘露聚糖与甘露聚糖特异性较高，并与其他抗原之间交叉免疫性低。念珠菌与皮肤癣菌两者的甘露聚糖结构是有较大差异的，故可用α
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1，6甘露聚糖作为皮肤癣的检测靶标。
[0010]优选的，所述皮肤癣菌包括毛癣菌属、小孢子菌属或表皮癣菌属。
[0011]优选的，所述毛癣菌属包括须癣毛癣菌、红色毛癣菌、马类毛癣菌或紫色毛癣菌；小孢子菌属包括铁锈色小孢子菌、石膏样小孢子菌或犬小孢子菌；表皮癣菌属包括絮状表皮癣菌。
[0012]优选的，所述抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体在原核系统或哺乳动物系统中表达。
[0013]优选的，所述抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体连入噬菌粒载体，构建抗体库。
[0014]所述的皮肤癣菌病快速检测试剂盒的制备方法，其特征在于，从皮肤癣菌中提取α
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1，6甘露聚糖作为抗原对小鼠进行注射免疫，取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，从杂交瘤细胞中分离出mRNA，逆转录成cDNA，再分别扩增抗体的重链及轻链基因，获得抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体；以抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体为基础，制备皮肤癣菌病的快速检测试剂盒。
[0015]第三方面，本申请提供的一种皮肤癣菌病快速检测试剂盒的制备方法，采用如下的技术方案：一种皮肤癣菌病快速检测试剂盒的制备方法，从皮肤癣菌中提取α
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1，6甘露聚糖作为抗原对小鼠进行注射免疫，取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，从杂交瘤细胞中分离出mRNA，逆转录成cDNA，再分别扩增抗体的重链及轻链基因，获得抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种皮肤癣菌病快速检测抗体，为抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体，其轻链序列为SEQ ID NO.1，重链序列为SEQ ID NO.2。2.一种皮肤癣菌病快速检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体。3.根据权利要求2所述的皮肤癣菌病快速检测试剂盒，其特征在于，所述皮肤癣菌包括毛癣菌属、小孢子菌属或表皮癣菌属。4.根据权利要求3所述的皮肤癣菌病快速检测试剂盒，其特征在于，所述毛癣菌属包括须癣毛癣菌、红色毛癣菌、马类毛癣菌或紫色毛癣菌；小孢子菌属包括铁锈色小孢子菌、石膏样小孢子菌或犬小孢子菌；表皮癣菌属包括絮状表皮癣菌。5.根据权利要求2所述的皮肤癣菌病快速检测试剂盒，其特征在于，所述抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体在原核系统或哺乳动物系统中表达。6.根据权利要求2所述的皮肤癣菌病快速检测试剂盒，其特征在于，所述抗皮肤癣菌α
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1，6甘露聚糖抗体连入噬菌粒载体，构建抗体库。7.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张树文，刘光明，朱嘉盛，余萍，
申请(专利权)人：南京黎明生物制品有限公司，
类型：发明
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