一种凝血酶修饰的止血膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种凝血酶修饰的止血膜及其制备方法，属于止血技术领域。本发明专利技术通过制备PAN基的PAN纤维膜，再在所述PAN纤维膜上进行羧基化、胺化和衣康酸交联、活化，得到结构稳定的表面改性PAN纤维膜，所述表面改性PAN纤维膜能暴露更多的活性位点，与更多的凝血酶结合。在所述表面改性纤维膜上负载凝血酶，得到凝血酶修饰的止血膜，所述凝血酶修饰的止血膜，具有良好的生物相容性，既能在短时间内吸收血液或渗液，实现快速长效止血的效果，又能促进脂肪干细胞和人皮肤成纤维细胞的生长繁殖，促进细胞再生，加速创面的愈合，防止二次出血，减少出血量。减少出血量。减少出血量。

【技术实现步骤摘要】
一种凝血酶修饰的止血膜及其制备方法


[0001]本专利技术涉及止血
，尤其涉及一种凝血酶修饰的止血膜及其制备方法。

技术介绍

[0002]不仅战场上会发生出血事件，在日常生活中，出血事件更是不可避免的，不可控的出血是导致死亡的一大因素，因不及时止血导致的死亡占创伤死亡的30％～40％。在现阶段的医疗技术中，通常会用止血纱布来止血，但是，传统的止血纱布仍停留在无纺纱布阶段，表面质地、韧性和强度都较差，微观尺寸较大，不利于血液的迅速吸收，凝血速度较慢，通常需要在2～8分钟内才能止血，止血效果不理想，还容易因纱布质地粗糙对创面造成二次出血，导致失血量变多，另外，对创面的愈合作用极小，无法在止血的同时，加快创面愈合。因此研究开发复合型的止血产品，对挽救生命是具有重要的意义的。

技术实现思路

[0003]本专利技术的主要目的在于提供一种凝血酶修饰的止血膜及其制备方法，旨在解决传统止血纱布表面质地、韧性和强度较差，微观尺寸较大，不利于血液吸收，凝血速度较慢，容易对创面造成二次出血导致失血量变多，且无法在止血的同时，加快创面愈合的技术问题。
[0004]为实现上述目的，本专利技术提供一种凝血酶修饰的止血膜。
[0005]此外，为实现上述目的，本专利技术还提供一种凝血酶修饰的止血膜的制备方法，所述制备方法包含以下步骤：
[0006]S10，制备PAN纳米纤维膜：将PAN溶解到有机溶剂中，得到纺丝液，然后通过静电纺丝法，制备得到PAN纤维膜，干燥备用；
[0007]S20，表面改性处理：
[0008]S21，羧基化：将干燥后的PAN纤维膜浸泡在碱性溶液中，在50～60℃恒温条件下进行反应，然后于酸性溶液中浸泡酸洗，再用去离子水冲洗至中性，得到表面羧基化的PAN纤维膜；
[0009]S22，胺化：将表面羟基化的PAN纤维膜浸泡在乙二胺和乙醇的混合溶液中，于30～45℃恒温条件下反应，然后用去离子水冲洗至中性，得到表面胺化的PAN纤维膜；
[0010]S23，衣康酸交联及活化：将表面胺化的PAN纤维膜浸泡在衣康酸水溶液中，于50～65℃恒温条件下反应，得到交联PAN纤维膜，将所述交联PAN纤维膜移入EDC/NHS的80％乙醇混合液中浸泡活化，得到表面改性PAN纤维膜；
[0011]S30，负载凝血酶：将表面改性PAN纤维膜转移到凝血酶溶液中，在30～50℃恒温条件下培养，然后用去离子水冲洗，即得凝血酶修饰的止血膜。
[0012]可选地，在S10制备PAN纳米纤维膜的步骤中，所述有机溶剂为N,N
‑
二甲基甲酰胺和二甲基亚砜中的至少一种。
[0013]可选地，在在S10制备PAN纳米纤维膜的步骤中，所述纺丝液的质量浓度为8％～10％。
[0014]可选地，在S21羧基化步骤中，所述碱性溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氢氧化钾的氨水混合液以及氢氧化钠的氨水混合液中的至少一种。
[0015]可选地，在S21羧基化步骤中，所述酸性溶液为盐酸溶液、硝酸溶液或硫酸溶液中的至少一种。
[0016]可选地，在S21羧基化步骤中，所述浸泡酸洗的时间为3～5h。
[0017]进一步可选地，所述氢氧化钠的体积摩尔浓度为1～3mol/L；所述盐酸溶液的体积摩尔浓度为0.5～2mol/L。
[0018]可选地，在S22胺化步骤中，所述乙二胺和乙醇的体积比为4:5～8。
[0019]可选地，在S23衣康酸交联及活化步骤中，所述衣康酸溶液的质量分数为8％～10％。
[0020]可选地，在S23衣康酸交联及活化步骤中，浸泡活化2～4次，每次浸泡活化6～8h。
[0021]可选地，在S23衣康酸交联及活化步骤中，所述EDC与NHS的质量比为5:1～3。
[0022]可选地，在S30负载凝血酶的步骤中，所述凝血酶溶液的浓度为10～30NIH units/ml，所述培养时间为4～8h。
[0023]本专利技术所能实现的有益效果：
[0024]本专利技术的凝血酶修饰的止血膜是以PAN纤维膜为基础，所述PAN纤维膜是一种高强高模型纤维，表面质地较佳，具有优异的拉伸强度、耐磨性。
[0025]对所述PAN纤维膜依次进行羧基化、胺化、衣康酸交联及活化一系列表面改性得到的表面改性PAN纤维膜，结构稳定，暴露出更多能与凝血酶结合的活性位点，可以负载更多的凝血酶，显著提高止血膜的止血效果。
[0026]在表面改性PAN纤维膜上负载凝血酶，制备得到的凝血酶修饰的止血膜，具有良好的生物相容性，既能在短时间内吸收血液或渗液，快速粘附创面，促进血小板粘附形成血栓，从而实现快速止血的效果，又能促进脂肪干细胞和人皮肤成纤维细胞的生长繁殖，加速创面的愈合。与现有的止血纱布相比，本专利技术的止血膜具有更佳的肤感和显著的止血效果，且能促进伤口愈合，防止二次出血，有效减少失血量。
附图说明
[0027]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。
[0028]图1为性能测试1形貌测试的结果图，为PAN
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DIA
‑
ITA
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Th、PAN、PAN
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COOH、PAN
‑
DIA、PAN
‑
DIA
‑
ITA、PAN
‑
COOH
‑
Th的SEM图。
[0029]图2为性能测试2结构分析的结果图，其中：
[0030]图2A区为红外光谱图，图中a为PAN，b为PAN
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COOH、c为PAN
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DIA，d为PAN
‑
DIA
‑
ITA，e为PAN
‑
COOH
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Th，f为PAN
‑
DIA
‑
ITA
‑
Th；
[0031]图2B区为PAN、PAN
‑
DIA、PAN
‑
COOH以及PAN
‑
DIA
‑
ITA的X射线衍射图；
[0032]图2C区为PAN
‑
DIA
‑
ITA的核磁共振氢谱，图2D区为PAN
‑
DIA
‑
ITA的结构式，在图2C区和D区中，a为长碳链，b为
‑
NH，c为
‑
CH2‑
，d为
‑
NH2，e为不饱和双键，f为
‑
COOH。
[0033]图3为性能测试3表面改性PAN纤维膜的热重分析结果图，其中，左图的横坐标为温度，纵坐标代表重量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种凝血酶修饰的止血膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：制备PAN纳米纤维膜：将PAN溶解到有机溶剂中，得到纺丝液，然后通过静电纺丝法，制备得到PAN纤维膜，干燥备用；羧基化：将干燥后的PAN纤维膜浸泡在碱性溶液中，在50～60℃恒温条件下进行反应，然后于酸性溶液中浸泡酸洗，再用去离子水冲洗至中性，得到表面羧基化的PAN纤维膜；胺化：将表面羟基化的PAN纤维膜浸泡在乙二胺和乙醇的混合溶液中，于30～45℃恒温条件下反应，然后用去离子水冲洗至中性，得到表面胺化的PAN纤维膜；衣康酸交联及活化：将表面胺化的PAN纤维膜浸泡在衣康酸水溶液中，于50～65℃恒温条件下反应，得到交联PAN纤维膜，将所述交联PAN纤维膜移入EDC/NHS的80％乙醇混合液中浸泡活化，得到表面改性PAN纤维膜；负载凝血酶：将表面改性PAN纤维膜转移到凝血酶溶液中，在30～50℃恒温条件下培养，然后用去离子水冲洗，即得凝血酶修饰的止血膜。2.如权利要求1所述凝血酶修饰的止血膜的制备方法，其特征在于，在制备PAN纳米纤维膜的步骤中，所述有机溶剂为N,N
‑
二甲基甲酰胺、二甲基亚砜中的至少一种；和/或，所述纺丝液的质量浓度为8％～10％。3.如权利要求1所述凝血酶修饰的止血膜的制备方法，其特征在于，在羧基化步骤中，所述碱...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱艳霞，杜冰，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：