魁蒿内酯A,B,D制造技术

本发明专利技术提供结构式(I)所示15个新化合物，魁蒿内酯A,B,D

【技术实现步骤摘要】
魁蒿内酯A,B,D
‑
P及其药物组合物和其制备方法与应用

：
[0001]本专利技术属于药物
具体地，涉及魁蒿内酯A,B,D
‑
P(artemiprinolides A,B,D
‑
P,1
‑
15)，以其为活性成分的药物组合物及其制备方法和其在制药中的应用。

技术介绍
：
[0002]肝癌(liver cancer)是我国恶性肿瘤死亡的主要原因之一，其发病隐匿、病因复杂，早期诊断困难，发现时往往已进入中晚期，导致其预后较差，这给新的治疗方法带来了巨大的挑战。2022年2月，在《癌症科学进展(JNCC)》发布的最新癌症报告显示，我国肝癌年新发病例38.9万，位列恶性肿瘤第4位，年死亡病例33.6万，居恶性肿瘤死亡第二位。HCC疾病负担重，前期的流行病学和机制研究表明慢性HBV感染是我国HCC的主要危险因素，而且HBV感染在HCC发生中具有异质性。HCC给全球造成了极为沉重的疾病负担，但不同地区发病模式有较大差异。当前，用于治疗肝癌患者的临床药物有7个：索拉非尼(sorafenib)、瑞格菲尼(regorafenib)、乐伐替尼(lenvatinib)、卡博替尼(cabozantinib)、纳武单抗(nivolumab)、帕姆单抗(pembrolizumab)和雷莫卢单抗(ramucirumab)，但会产生耐药性和一些毒副作用。尽管我国自主研发药物也快速发展，如甲磺酸阿帕替尼、卡瑞利珠单抗、替雷利珠单抗等，丰富了肝癌治疗方案，但仍存在一些问题。因此，急需开发新型有效抗肝癌药物。天然产物具有独特的结构和低毒性，是发现新型抗肝癌活性成分的重要类群。
[0003]蒿属(Artemisia L.)系菊科(Asteraceae)为多年生草本植物，全球约有380余种，我国有186种，44变种，82特有种，遍布全国各地。国内外大量研究表明该属植物具有广泛的现代药理活性，如抗疟、抗炎、抗癌、抗真菌感染和抗病毒等作用，且该属植物很多品种在民间具有重要药用价值。来自该属植物黄花蒿中的代表性倍半萜分子青蒿素开创了新一代的抗疟药物，是从中国传统药物这一宝库研发成功的杰出范例，其不仅具有较好的抗疟活性，还具有一定的抗肿瘤、抗真菌和免疫调节作用。该属植物因其广泛的药用价值，新颖、多样的次生代谢产物及多种多样的生物活性，越来越受到国内外学者的广泛关注。
[0004]魁蒿(Artemisia princeps)系菊科蒿属为多年生草本植物，又名五月艾、野艾、艾叶、黄花艾、端午艾、王侯蒿、野艾蒿，分布于中国北部、东部和西部各省区，多生于低海拔或中海拔地区的路旁、山坡、灌丛、林缘及沟边。日本、朝鲜也有。民间入药，作“艾”(家艾)的代用品，有逐寒湿、理气血、调经、安胎、止血、消炎的功效。
[0005]迄今，现有技术中无魁蒿内酯A,B,D
‑
P(artemiprinolides A,B,D
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P,1
‑
15)的报道，没有其药理活性的报道，也没有其作为有效成分的药物组合物的报道，更没有其在制备治疗肝癌药物中的应用的报道。

技术实现思路
：
[0006]本专利技术的目的在于提供一类新的具有药用价值的式(I)所示的魁蒿内酯A,B,D
‑
P(artemiprinolides A,B,D
‑
P,1
‑
15)，及其药物组合物和其制备方法与应用，本专利技术的化合物对肝癌细胞株具有明显的细胞毒活性，能够用于制备抗肝癌药物。
[0007]为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0008]本专利技术提供了一系列倍半萜二聚体类化合物，魁蒿内酯A,B,D
‑
P(artemiprinolides A,B,D
‑
P,1
‑
15)，具有如下式(I)所示结构：
[0009][0010]本专利技术提供了上述化合物1
‑
15的制备方法，取魁蒿干燥地上部分粉碎，用10倍量的90％乙醇冷浸提取两次，合并乙醇提取液并减压浓缩至无醇味，得到乙醇提取物，将提取物分散于水中，用乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取部分，乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱层析，用丙酮
‑
石油醚(10:90,20:80,30:70,40:60,v/v)以及丙酮进行梯度洗脱得到5个流分Fr.1～Fr.5；Fr.2经中压MCI CHP 20P柱层析，用水
‑
甲醇(50:50,30:70,10:90,0:100)梯度洗脱，得到4个组分Fr.2
‑1‑
Fr.2
‑
4；Fr.2
‑
3经硅胶柱层析(乙酸乙酯
‑
石油醚,20:80,30:70,40:60,100:0,v/v)得到4个组分Fr.2
‑3‑1‑
Fr.2
‑3‑
4；Fr.2
‑3‑
2经中压RP
‑
C8柱层析，用水
‑
甲醇(40:60,20:80,10:90)梯度洗脱，得到3个组分Fr.2
‑3‑2‑1‑
Fr.2
‑3‑2‑
3；Fr.2
‑3‑2‑
1经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析(甲醇
‑
氯仿,50:50)，得到3个组分Fr.2
‑3‑2‑
1a
‑
Fr.2
‑3‑2‑
1c；Fr.2
‑3‑2‑
1a通过半制备HPLC(水
‑
甲醇,32:68)纯化得到化合物5；Fr.2
‑3‑2‑
1b通过半制备HPLC(水
‑
甲醇,33:67)纯化得到化合物6,7,8和11；Fr.2
‑3‑
3经中压RP
‑
C18柱层析，用水
‑
甲醇(40:60,20:80,0:100)梯度洗脱，得到3个组分Fr.2
‑3‑3‑1‑
Fr.2
‑3‑3‑
3；Fr.2
‑3‑3‑
1经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析(甲醇
‑
氯仿,50:50)，得到3个组分Fr.2
‑3‑3‑
1a
‑
Fr.2
‑3‑3‑
1c；Fr.2
‑3‑3‑
1b通过半制备HPLC(水
‑
乙腈,45:55)纯化得到化合物1,2和3；Fr.3经中压MCI CHP 20P柱层析，用水
‑
甲醇(50:50,30:70,10:90,0:100)梯度洗脱，得到4个组分Fr.3
‑1‑
Fr.3
‑
4；Fr.3
‑
2经中压RP
‑
C18柱层析，用水
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如下结构式(I)所示的化合物1
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15，魁蒿内酯A,B,D
‑
P，2.权利要求1所述的式(I)化合物1
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15的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：取魁蒿干燥地上部分粉碎，用10倍量的90％乙醇冷浸提取两次，合并乙醇提取液并减压浓缩至无醇味，得到乙醇提取物，将提取物分散于水中，用乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取部分，乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱层析，用丙酮
‑
石油醚10:90,20:80,30:70,40:60,v/v，以及丙酮进行梯度洗脱得到5个流分Fr.1～Fr.5；Fr.2经中压MCI CHP 20P柱层析，用水
‑
甲醇50:50,30:70,10:90,0:100梯度洗脱，得到4个组分Fr.2
‑1‑
Fr.2
‑
4；Fr.2
‑
3经硅胶柱层析，乙酸乙酯
‑
石油醚,20:80,30:70,40:60,100:0,v/v得到4个组分Fr.2
‑3‑1‑
Fr.2
‑3‑
4；Fr.2
‑3‑
2经中压RP
‑
C8柱层析，用水
‑
甲醇40:60,20:80,10:90梯度洗脱，得到3个组分Fr.2
‑3‑2‑1‑
Fr.2
‑3‑2‑
3；Fr.2
‑3‑2‑
1经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析，甲醇
‑
氯仿50:50，得到3个组分Fr.2
‑3‑2‑
1a
‑
Fr.2
‑3‑2‑
1c；Fr.2
‑3‑2‑
1a通过半制备HPLC，水
‑
甲醇32:68纯化得到化合物5；Fr.2
‑3‑2‑
1b通过半制备HPLC，水
‑
甲醇33:67纯化得到化合物6,7,8和11；Fr.2
‑3‑
3经中压RP
‑
C18柱层析，用水
‑
甲醇40:60,20:80,0:100梯度洗脱，得到3个组分Fr.2
‑3‑3‑1‑
Fr.2
‑3‑3‑
3；Fr.2
‑3‑3‑
1经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析，甲醇
‑
氯仿50:50，得到3个组分Fr.2
‑3‑3‑
1a
‑
Fr.2
‑3‑3‑
1c；Fr.2
‑3‑3‑
1b通过半制备HPLC，水
‑
乙腈45:55纯化得到化合物1,2和3；Fr.3经中压MCI CHP 20P柱层析，用水
‑
甲醇50:50,30:70,10:90,0:100梯度洗脱，得到4个组分Fr.3
‑1‑
Fr.3
‑
4；Fr.3
‑
2经中压RP
‑
C18柱层析，用水
‑
甲醇50:50,40:60,30:70梯度洗脱，得到3个组分Fr.3
‑2‑1‑
Fr.3
‑2‑
3；Fr.3
‑2‑
1经中压RP
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C18柱层析，用水
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乙腈75:25,70:30,65:35,60:40梯度洗脱，得到4个组分Fr.3
‑2‑1‑1‑
Fr.3
‑2‑1‑
4；Fr.3
‑2‑1‑
3经硅
胶柱层析，乙酸乙酯
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石油醚40:60至100:0得到3个流分Fr.3
‑2‑1‑
3a
‑
Fr.3
‑2‑1‑
3c；Fr.3
‑2‑1‑
3c通过半制备HPLC，水
‑
甲醇32:68纯化得到化合物15；Fr.3
‑2‑1‑
3a通过半制备HPLC，水
‑
乙腈60:40纯化得到化合物9和12；Fr.3
‑2‑
2经中压RP
‑
C18柱层析，用水
‑
乙腈70:30至50:50梯度洗脱，得到5个组分Fr.3
‑2‑2‑1–
Fr.3
‑2‑2‑
5；Fr.3
‑2‑2‑
2通过制备HPLC水
‑
乙腈,0:40纯化，得到5个亚组分Fr.3
‑2‑2‑
2a
‑3‑2‑2‑
2e；Fr.3
‑2‑2‑
2b通过半制备HPLC水
‑
甲醇42:58纯化得到化合物4；Fr.3
‑2‑2‑
2d通过半制备HPLC，水
‑
乙腈62:38纯化，得到5个亚组分Fr.3
‑2‑2‑
2d
‑1‑
Fr.3
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2d
‑
5；Fr.3
‑2‑2‑
2d
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1通过半制备HPLC，水
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甲醇50:50纯化得到化合物10；Fr.3
‑2‑2‑
2d
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3通过半制备HPLC，水
‑
甲醇50:50纯化得到化合物13和14。3.权利要求1所述的式(I)化合物1
‑
15在制备抗肝癌药物中的应用。4.权利要求1所述的式(I)化合物1
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15在制备抗肝癌抑制剂中的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈纪军，苏丽花，李天泽，马云保，耿长安，董伟，何小凤，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：