一种人血管内皮细胞生长抑制因子rhVEGI-192A的重组蛋白的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种人血管内皮细胞生长抑制因子ｒｈＶＥＧＩ－１９２Ａ的重组蛋白的制备方法，包括用ＶＥＧＩ－１９２Ａ基因编码的核苷酸序列构建表达载体，并将所述表达载体在宿主细胞中诱导表达的步骤。具体的，从人脐静脉血管内皮细胞系ＨＵＶＥＣ的总ＲＮＡ扩增得到ＶＥＧＩ－１９２Ａ基因片段，使用限制性内切酶双酶切取目的基因，连接至表达载体ｐＥＴ－３０ａ中构建重组蛋白表达载体，再转化至大肠杆菌宿主菌中诱导表达，最后纯化蛋白。该方法在保持ｒｈＶＥＧＩ－１９２重组蛋白天然空间构象的基础上，建立了高效、高产量、高活性、高纯度表达目的蛋白的原核表达体系，优化了表达条件，建立了目的产物分离、纯化及复性的方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人血管内皮细胞生长抑制因子ｒｈＶＥＧＩ－１９２Ａ的重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括用ＶＥＧＩ－１９２Ａ基因编码的核苷酸序列构建表达载体，并将所述表达载体在宿主细胞中诱导表达的步骤。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黎孟枫，朱勋，李鲁远，袁洁，吴珏珩，何振健，古明晖，夏蕾，贺海朋，马剑达，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]