一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的KASP标记引物组、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的KASP标记引物组、试剂盒及其应用，涉及生物技术领域。本发明专利技术设计KASP标记引物组包括用于检测BnALS1基因和BnALS3基因突变位点的特异性引物和通用引物，BnALS1和BnALS3基因共用一对特异性引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，BnALS1基因的通用引物如SEQ ID NO.3所示，BnALS3基因的通用引物如SEQ ID NO.4所示。本发明专利技术设计的KASP引物组能特异性区分和检测BnALS1和BnALS3基因的突变位点G或T，检测株系的除草剂抗性。本发明专利技术设计的KASP检测方法准确可靠，操作方便，适用于BnALS1和BnALS3基因抗性位点的鉴定及辅助选择育种。BnALS3基因抗性位点的鉴定及辅助选择育种。BnALS3基因抗性位点的鉴定及辅助选择育种。

【技术实现步骤摘要】
一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的KASP标记引物组、试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体为一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的KASP标记引物组、试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]油菜是世界上最重要的油料作物之一，其产油量在世界油料作物中于棕榈、大豆之后位列第三，食用油年产量为2800万吨。高品质的压榨菜籽油是食用油的主要来源。此外，菜籽油也是生物柴油燃料和工业原材料的重要来源。杂草，特别是阔叶十字花科杂草，在田间与油菜竞争阳光、水分、土壤养分及生存空间，严重影响了油菜产量。发展抗除草剂油菜品种是油菜育种的重要内容，也是管理田间杂草优先考虑的经济环保的方法。
[0003]乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase，ALS)是包括缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸等支链氨基酸合成的关键酶。已有研究表明：乙酰乳酸合成酶是磺酰脲类(sulfonylurea，SU)、咪唑啉酮类(imidazolinone，IMI)、三唑嘧啶类(triazolopyrimidine，TP)、嘧啶水杨酸类(pyrimidinyl本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的KASP标记引物组，其特征在于，包括用于检测BnALS1基因和BnALS3基因的特异性引物和通用引物；所述用于检测BnALS1基因的特异性引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，通用引物序列如SEQ ID NO.3所示；所述用于检测BnALS3基因的特异性引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，通用引物序列如SEQ ID NO.4所示。2.根据权利要求1所述的KASP标记引物组，其特征在于，所述BnALS1基因和BnALS3基因的特异性引物序列的5
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端分别连接不同的荧光接头序列。3.根据权利要求2所述的KASP标记引物组，其特征在于，所述荧光接头序列为FAM荧光接头序列或HEX荧光接头序列。4.一种检测油菜除草剂抗性ALS基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～3任意一项所述的KASP标记引物组。5.一种检测油菜除草剂抗性ALS基因发生SNP突变的检测方法，其特征在于，所述ALS基因包括BnALS1基因和/或BnALS3基因；所述检测方法包括如下步骤：提取油菜样品基因组DNA；以油菜基因组DNA为模板，利用权利要求1～3任意一项所述的KASP标记引物进行KASP基因分型检测。6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述基因分型检测结果包括如下：对于BnALS1基因，如果只检测到第+1676位碱基对应的碱基G，则判定检测的油菜样品中不含抗磺酰脲类除草剂基因BnALS1突变位点；如果只检测到第+1676位碱基对应的碱...

【专利技术属性】
技术研发人员：石江华，余华胜，傅鹰，王枟刘，张尧锋，黄吉祥，李素娟，郑滔，倪西源，赵坚义，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：