一种枯草芽孢杆菌细菌素及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及功能微生物应用技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌细菌素及其制备方法和应用。所述细菌素由保藏编号为CGMCC No.25040的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)产生，具有良好耐酸碱、温度和蛋白酶特性，对金黄色葡萄球菌有显著的抑制效果，有望开发成为新的生物抑菌剂，广泛应用于医疗、饲料、食品等领域。食品等领域。食品等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种枯草芽孢杆菌细菌素及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及功能微生物应用
，具体涉及一种枯草芽孢杆菌细菌素及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]近年来，由微生物造成的食品腐败不仅降低食品的安全，引发食源性疾病，对人体健康造成严重危害，还造成了巨大的经济损失。肉制品产品通常暴露于常温环境下，直接现场售卖，极易受到微生物的污染。金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病菌，是危害熟肉制品安全的常见病原菌之一，其中香肠熟制肉制品中，金黄色葡萄球菌的检出率达到了15以上％。根据美国疾病预防控制中心(CDC)报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠埃希氏菌，占细菌性食物中毒的33％左右。金黄色葡萄球菌所产生的肠毒素是引起肉制品食物中毒的主要原因，人体感染金黄色葡萄球菌会出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻及发烧等症状，严重时会引发感染性心内膜炎、败血症最终导致死亡。此外，随着抗生素的滥用，在临床中发现，分离的80％的金黄色葡萄球菌为具有多重耐药性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，传统抑菌剂对其已无抑制效果。因此，寻找一种安全有效的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种由枯草芽孢杆菌产生的细菌素，其特征在于，所述的细菌素为蛋白类抑菌物质，其制备方法包括如下步骤：(1)发酵上清液的制备：将枯草芽孢杆菌接种于10mL液体LB培养基中，调整pH值为7.3，在37℃条件下摇瓶培养24h，待菌株生长至对数生长期末期时，取20mL菌液接种于1000mL LB液体培养基中，37℃条件下摇瓶培养24h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；将发酵液在4℃、10000r/min条件下离心15min，除去菌体，得到发酵上清液；(2)细菌素粗提液的制备将枯草芽孢杆菌发酵上清液装于分液漏斗中，与乙酸乙酯按1:1的体积比进行萃取；待静置分层后取乳化层，倒入干净的三角瓶中；再用旋转蒸发仪于45℃进行旋转蒸发，直至溶液中没有乙酸乙酯的残留，同时除去样品中多余水分，得到细菌素粗提液；(3)细菌素的纯化将细菌素粗提液先用Sephadex
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G50凝胶层析进行初步纯化；选择流速为0.5mL/min，对粗提液进行洗脱收集，再使用酶标仪于280nm波长处检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：武俊瑞，乌日娜，纪帅奇，贺凯茹，杨贞耐，张日俊，马曦，马颖，郭佳，张淘崴，娄梦雪，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：