anti-miR-29a对改善母亲肥胖引起的胎儿疾病的应用制造技术

本发明专利技术提供了利用anti

【技术实现步骤摘要】
anti
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29a对改善母亲肥胖引起的胎儿疾病的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及anti
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29a对改善母亲肥胖引起的胎儿疾病的应用。

技术介绍

[0002]《国家中长期科技发展规划纲要》提出“疾病防治重心前移”的战略方针，这意味着国民健康管理开始从注重“治已病”向注重“治未病”转变。唐代医学家孙思邈就提出“上工治未病，中工治欲病，下工治已病”的理论。“治未病”与如今医学界大力倡导的“预防为主”战略思想有着异曲同工之妙，可谓最早、最超前的预防医学。
[0003]正如“健康和疾病的发育起源学说”所提出的观点，在发育的关键窗口期间，母亲的营养状态、心理状况以及生活习惯都会影响后代健康。因此“母源学说”也是“治未病”的重大突破口。近几十年来，摄入高热量食物和久坐不动的生活方式导致了育龄妇女超重和肥胖率急剧升高。孕期母亲肥胖一方面对新生儿个体有直接影响，例如死产、巨大儿；此外，也可能会产生长期影响，增加后代肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病和心脏代谢等疾病的风险。
[0004]虽然大多数胎儿疾病可以在出生后治疗，但是导致胎儿成年后代谢异常的机制多为胎儿期间的异常的表观遗传学修饰导致，并且终生伴随，增加胎儿成年后代谢疾病的易感性，难以彻底干预。正如“治未病”理念，一些可预见地导致胎儿或新生儿死亡或在出生前有显著进展的疾病最好在产前治疗。但胎儿给药手段不足，目前对于胎儿出生前疾病治疗方式主要有三种：母血给药、微创手术给药和开放胎儿手术。其中，微创手术发生母体并发症的风险约为5％，其中1％为严重并发症(肺水肿或胎盘早剥)，而开放胎儿手术对母亲有严重风险，易造成肺水肿、胎盘早剥、绒毛膜羊膜炎、瘢痕裂开、子宫破裂等。而母血给药经胎盘递送给胎儿是目前应用最广的、安全性较高的胎儿疾病治疗方式。母血给药受限于胎盘屏障作用，最常用的药物有激素药物和免疫球蛋白，但是存在一定的副作用。例如利用地塞米松治疗胎儿先天性肾上腺皮质增生症，已有报道母体类固醇会诱发精神疾病，且在母体系统性红斑狼疮患者中更为常见。产妇静脉给予免疫球蛋白在治疗胎儿和新生儿同种免疫血小板减少症和预防新生儿血色素沉着病复发方面发挥着重要的作用。用于胎儿治疗的免疫球蛋白剂量远远高于用于其他非产科疾病的剂量。可在高达30％的病例中立即引起全身反应，包括肌痛、发热、恶心、背痛、低血压和心动过速。据报道，头痛和疲劳的发生率为30
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70％。更严重的反应有过敏反应、肾脏和神经并发症、血栓形成和脱发。
[0005]RNA干扰提供了靶向RNA并在转录后水平调控蛋白质表达的手段，可以针对占基因组70％的非编码RNA序列，可以寻找药物设计位点并针对性进行调控。由于细胞外囊泡天然具有通过生物屏障(包括胎盘屏障)和转运小RNA的能力，且与宿主免疫系统具有良好的生物相容性，是体内小RNA传输的理想载体。因此利用细胞外囊泡传输小RNA具有宫内疾病治疗的潜力。但是培养细胞，通过转染将小RNA装载至细胞外囊泡的过程中有一系列问题，例如培养的细胞多是永生化细胞，其细胞外囊泡中的其他内容物无法控制，异质性较高，且该方法收集细胞外囊泡操作复杂，经济成本较高。此外在转染等过程中使用化学试剂产生的
内毒素无法完全排除。
[0006]因此我们以孕妇肥胖为病理模型，以小鼠为模型动物，我们前期实验结果发母亲肥胖导致胎儿发育异常的关键因子是miR
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29a，因此以此为靶点设计了反向互补序列anti
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29a进行精准干预，基于合成生物学的设计原理，将外源性的anti
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29a与内源性的外泌体有机整合，以机体自身的肝脏作为天然生物基盘，在体内建立了一个传输细胞外囊泡anti
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29a的系统，将anti
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29a递送至胎儿体内达到治疗宫内疾病的目的。

技术实现思路

[0007]本专利技术基于以上的问题述求，本专利技术提供了一个利用anti
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29a治疗孕妇肥胖导致的胎儿血糖升高以及成年后代谢异常的方法。
[0008]本专利技术采用了以下技术方案：
[0009]本专利技术的第一个专利技术点是一种RNA序列，所述RNA序列为序列表中SEQ ID No.1所示的RNA序列1或与其具有90％以上同源性且具有相同功能的序列。
[0010]SEQ ID No.1具体为：TAACCGATTTCAGATGGTGCTA
[0011]本专利技术的第二个专利技术点是基于合成生物学的设计原理，将外源性的anti
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29a与内源性的外泌体有机整合，以机体自身的肝脏作为天然生物基盘，在体内建立了一个自动生产、组装、分泌、传输细胞外囊泡anti
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29a的系统，解决了anti
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29a跨胎盘传输的障碍，其中使用的质粒载体是pcDNA6.2，使用的启动子为CMV启动子，其中anti
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29a插入序列为
[0012]TAACCGATTTCAGATGGTGCTAGTTTTGGCCTCTGACTTTCTAGCACCAGAAATCGGTTA。
[0013]本专利技术的第三个专利技术点是提供了上述anti
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29a基因环路在无创伤母胎递送药物的应用。
[0014]本专利技术的第四个专利技术点是提供了上述anti
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29a基因环路在治疗母亲肥胖导致胎儿血糖异常方面的应用。
[0015]本专利技术的第五个专利技术点是提供了上述anti
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29a基因环路在治疗母亲肥胖导致后代代谢异常方面的应用，包括改善后代成年后葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性。
[0016]在以上应用中，此种基因环路的有效用量为5mg(质粒)/Kg(体重)
[0017]本专利技术的有益效果是：1.利用该专利技术可以得出，anti
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29a基因环路注射至肥胖孕鼠体内可以有效递送至胎儿体内，该方法可以实验药物无创递送。2.利用该专利技术可以得出注射anti
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29a基因环路不影响孕鼠代谢水平。3.利用该专利技术可以得出，anti
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29a基因环路注射至肥胖孕鼠体内可以有效干预靶点，改善胎儿血糖异常和后代成年后代谢异常，包括改善葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性。4.利用该专利技术可以得出注射anti
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29a基因环路可以有效避免利用外源细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用anti
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29a改善母亲肥胖引起的胎儿疾病的应用，其特征在于给肥胖孕鼠注射anti
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29a可以有效改善胎儿血糖稳态和成年后葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性。2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述anti
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29a序列为序列表中SEQ ID No.1所示的RNA序列1或与其具有90％以上同源性且具有相同功能的序列。3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的母亲肥胖包括但不限于高脂饮食引起的肥胖，遗传因素、内分泌因素、精神因素以及缺乏运动引起的肥胖，精神因素引起的肥胖等。4.根据权利要求1的应用，其特征在于，本专利选取anti
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29a仅测试了其在改善胎儿血糖稳态以及改善成年后葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性上的作用，anti
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29a对所有其所能治疗的代谢性疾病都可能存在治疗效果，所述的治疗范围包括但不限于改善胎儿血糖稳态、葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性，也包括其他代谢性疾病及所有其他anti
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29a可以治疗的疾病，例如2型糖尿病，痛风，高血压，高血脂，高尿酸，动脉硬化等疾病。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张辰宇，宋蕙晨，张玉婧，许铖红，丁佳琪，石欢欢，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：