一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物及其应用。本发明专利技术通过实验证实了RB7LP能抑制卵巢癌细胞的增殖，进一步，能促进部分RB1阳性卵巢癌细胞衰老及凋亡，同时还证实了ret抑制剂可协同Palbociclib联合致死RB1阳性的卵巢癌，比单独使用Palbociclib或ret抑制剂的治疗效果优。本发明专利技术的组合药物可协同作用诱导RB1阳性卵巢癌细胞凋亡、增加癌细胞抑制率，疗效佳，具有很强的临床应用价值。具有很强的临床应用价值。具有很强的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物及其应用


[0001]本专利技术涉及医学科研
，具体地说，是一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物及其应用。

技术介绍

[0002]卵巢癌(OC)是一种妇科恶性肿瘤，据报道，它是美国女性癌症死亡的第五大原因，在中国是第九大原因，全球排名第八。根据全球癌症统计数据，2020年有313,959个新病例(占所有癌症病例的3.4％)和207,252个死亡病例(占所有癌症死亡病例的4.7％)。尽管在过去的几十年里卵巢癌的治疗取得了进步，但5年总生存率只有47％。卵巢癌的风险因素包括：子宫内膜异位、高龄、卵巢癌或乳腺癌家族史以及胚系突变。恶性上皮性卵巢癌占卵巢癌患者的90％，有五种组织学亚型:高级别浆液性癌(70％)、子宫内膜样癌(10％)、透明细胞癌(10％)、黏液性癌(3％)和低级别浆液性癌(<5％)。越来越多的证据表明，卵巢癌是一种具有自发抗肿瘤免疫反应的免疫源性肿瘤。
[0003]RB转录共抑制因子1(RB1)是第一个在视网膜母细胞瘤中发现的抑癌基因。它是一种多功能蛋白，促进肿瘤免疫和调控关键的细胞活动，新的数据表明，RB1在免疫功能的不同方面发挥着重要的作用，RB1突变的样本中免疫效应富集，表现为T细胞炎症标记分数更高。
[0004]卓灏医药公众号，2022
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25，公开了RB1是卵巢癌的免疫相关预后生物标志物，研究表明，RB1是一个稳健且与免疫相关的卵巢癌预后生物标志物。RB1相关基因的富集分析及其在免疫微环境中与免疫浸润的相关性表明，RB1可能是卵巢癌免疫治疗的一个新靶点。
[0005]帕博西尼(PALBOCICLIB)是全球首个批准上市的CDK4/6激酶抑制剂，是一种实验性、口服、靶向性CDK4/6抑制剂，能够选择性抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK4/6)，恢复细胞周期控制，阻断肿瘤细胞增殖。
[0006]RET是一种能在多种肿瘤中激活配体激酶、从而驱动肿瘤发展的酪氨酸激酶受体。RET的异常激活是导致非小细胞肺癌、甲状腺髓样癌、甲状腺乳头状等多种实体肿瘤生长和增殖的关键驱动因子。它是一种酪氨酸激酶抑制剂，作为新型抗癌剂，能够抑制细胞生长，显著增加癌细胞凋亡，主要用来治疗和预防突变的癌、癌转移疾病，以RET为靶点的抗肿瘤药物研发已成为国内外的研究热点。本专利技术揭示了ret抑制剂结合PD一起使用可以对RB1阳性卵巢癌细胞的增殖和凋亡产生影响，通过ret抑制剂结合PD显著抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。因此，ret抑制剂结合PD应用可以作为治疗RB1阳性的卵巢癌的新型手段，具有潜在的临床应用价值。
[0007]目前关于本专利技术一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物及其应用还未见报道。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，本专利技术的第一方面，提供一种RB7LP/
Palbociclib在制备治疗卵巢癌药物中的应用，所述卵巢癌为RB1阳性的卵巢癌。
[0009]优选地，所述的RB7LP/Palbociclib抑制RB1阳性卵巢癌细胞增殖。
[0010]优选地，所述的RB7LP/Palbociclib可促进部分RB1阳性卵巢癌细胞衰老及凋亡。
[0011]本专利技术的第二方面，提供一种治疗RB1阳性的卵巢癌的组合药物，所述组合药物包括ret抑制剂和RB7LP/Palbociclib。
[0012]本专利技术的第三方面，提供如上所述的组合药物在制备治疗RB1阳性的的卵巢癌药物中的应用。
[0013]本专利技术的第四方面，提供一种具有协同增效作用的抗卵巢癌药物制剂，包括如上所述的组合药物和药学上可接受的载体。
[0014]本专利技术优点在于：
[0015]1.本实验使用的方法为细胞水平的筛选，具有可视化、动态、多参数综合评价等突出优势。利用完整的细胞，通过细胞活力检测、基因编辑、报告基因、高内涵成像等技术寻找潜在的药物作用靶点，发掘有潜力的活性分子。
[0016]2.本专利技术通过实验证实了ret抑制剂可协同Palbociclib联合致死RB1突变的卵巢癌，比单独使用Palbociclib或ret抑制剂的治疗效果优，本专利技术的组合药物可协同作用诱导RB1阳性卵巢癌细胞凋亡、增加癌细胞抑制率，疗效佳，具有很强的临床应用价值。
附图说明
[0017]附图1为RB7LP抑制卵巢癌细胞的增殖。
[0018]附图2为RB7LP促进RB1阳性的卵巢癌细胞发生部分衰老及凋亡。
[0019]附图3为Palbociclib模拟RB7LP在RB1阳性的卵巢癌细胞中的作用。
[0020]附图4为Palbociclib协同RET抑制剂致死RB1阳性的卵巢癌细胞。
具体实施方式
[0021]下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术记载的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
[0022]实施例1细胞实验
[0023]1.实验材料
[0024]卵巢癌细胞株购自美国ATCC细胞库；高糖DMEM培养基、RPMI
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1640培养基、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、青链霉素、二甲基亚砜、MTT粉购自Gibco公司；胰酶
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EDTA消化液购自Sigma公司；RNA提取试剂TRIzol、逆转录试剂盒、SYBR荧光定量试剂购自Invit
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rogen公司；RB7LP、pENTR
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GFP、pTRE3G
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puro
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DEST载体购自Addgene公司；其他转染试剂购自Life Technologies公司；其他常用试剂购自生工生物工程(上海)股份有限公司；酶标仪购自Bio
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rad公司；实时定量PCR仪购自ABI公司；流式细胞仪购自BD公司；超净工作台购自苏州苏泰净化设备工程有限公司。化合物库够自MCE公司。AnnexinV
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AlexaFluor凋亡试剂盒购自赛默飞公司。
[0025]2.实验方法
[0026]2.1细胞培养
[0027]SKOV3置于培养皿中培养,培养液包括10％胎牛血清,90％RPMI
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1640培养基(含100U/mL青霉素,100μg/mL链霉素)，37℃、5％CO2培养箱培养。隔天换液，每2
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3天传代。
[0028]2.2慢病毒制备
[0029]293T细胞3gpTRE3G
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puro
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RB7LP
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GFP和包装质粒(3μgpCMV
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VSVG和3μgpCMV
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dR8.91)进行转导。在1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.RB7LP/Palbociclib在制备治疗卵巢癌药物中的应用，其特征在于，所述卵巢癌为RB1阳性的卵巢癌。2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的RB7LP/Palbociclib抑制RB1阳性卵巢癌细胞增殖。3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的RB7LP/Palbociclib可促进部分RB1阳性卵巢癌细...

【专利技术属性】
技术研发人员：王育，盛金丹，吴美璇，顾思佳，
申请(专利权)人：上海市第一妇婴保健院，
类型：发明
国别省市：