【技术实现步骤摘要】
一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法及应用
[0001]本专利技术属于抗生素检测
，尤其涉及一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法及应用。
技术介绍
[0002]四环素(TTC)滥用导致耐药菌株逐渐增多，对全球经济发展和人类健康构成威胁。因此，开发一种可靠、灵敏、快速的复杂基质中TTC检测方法势在必行。近年来，表面增强拉曼光谱技术(SERS)由于其非破坏性、非侵入性和快速检测的特点而受到了广泛的关注。近年来，为了提高检测灵敏度，一些研究引入了一种新的DNA水凝胶作为响应式反应器，用于制造SERS生物传感器的“信号开启”策略。然而，成本和较低的释放速度限制了3D DNA水凝胶的可行性应用。因此，人们迫切希望引入一种新型多功能纳米材料，作为一种响应式反应器，以提高生物传感器的灵敏度，同时具有简单、低成本和便携性。
[0003]作为一种天然矿物，基于碳酸钙(CaCO3)的微胶囊可考虑用于这种生物传感器设计，因其具有高热稳定性、低氧化性、环保性质和成本效益。特别是CaC...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)适配体共轭识别诱导的三明治桥联夹心界面自组装：将磁性捕捉探针和信号探针以及抗生素标准溶液进行孵育，通过适配体特异性共轭识别作用，诱导形成三明治桥联夹心界面，磁分离之后洗涤，然后分散于PBS缓冲液中，得到溶液A；(2)EDTA驱动式纳米微胶囊刺激响应可控释放：将EDTA标准溶液加入步骤(1)制备的溶液A，震荡摇匀后反应，随后采集SERS光谱，根据不同浓度的抗生素标准液所对应的SERS强度信号特征值，绘制出TTC浓度相关标准曲线；(3)实际样品中抗生素的特异性高灵敏检测：将食品样品加入至Na2EDTA
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Mcilvaine缓冲液中，然后经TTC提取、离心、旋转蒸发、过膜、复溶，得到样品液；测定样品液的SERS强度信号特征值，根据步骤(2)所得的TTC检测标准曲线，计算食品样品中TTC的含量，以及加标回收率；所述食品样品与Na2EDTA
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Mcilvaine缓冲液添加量比为：5mg:20mL。2.一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述磁性捕捉探针和信号探针的制备方法包括以下步骤：S1.EDTA驱动式纳米微胶囊的制备：采用一锅共沉淀法制备四氨基苯硫酚，然后采用层层自组装技术，在碳酸钙核心层外构建PEI交联层以及适配体网络层；S2.壳聚糖功能化磁纳米微珠的制备：在磁纳米微珠表面自组装壳聚糖层，形成壳聚糖功能化磁纳米微珠；S3.磁性捕捉探针和信号探针构建：用戊二醛交联法通过氨基缩合作用分别在EDTA驱动式纳米微胶囊和壳聚糖功能化磁纳米微珠的表面组装适配体网络层，磁分离之后洗涤，并使用PBS定容，形成功能化磁性捕捉探针和信号探针。3.根据权利要求2所述的一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法，其特征在于，步骤S1具体包括以下步骤：将CaCl2溶液、Na2CO3溶液和4
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ATP溶液混合后搅拌，然后经离心、洗涤，并储存过夜，得到CaCO3‑4‑
ATP，然后将所述CaCO3‑4‑
ATP与PEI溶液超声混合后离心、洗涤，分散至PBS缓冲液中，得到所述EDTA驱动式纳米微胶囊；所述CaCl2溶液的浓度为1mol/L；Na2CO3溶液的浓度为1mol/L；所述4
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ATP溶液的浓度为0.5
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0.8mg/mL；所述CaCl2溶液、Na2CO3溶液与4
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ATP溶液加入体积比为0.615mL：0.615mL：0.1mL；所述CaCO3‑4‑
ATP与PEI溶液的添加量之比为：2mg:2mL；PEI溶液浓度为0.5
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1％。4.根据权利要求2或3所述的一种基于EDTA驱动式纳米微胶囊SERS传感体系的快速检测方法，其特征在于，步骤S3中所述信号探针的制备方法包括以下步骤：在溶液中加入精确体积的戊二醛，并将混合物置于恒温搅拌器中，在25℃下搅拌2.0小时，以激活氨基；离心除去多余的戊二醛，加入6...
【专利技术属性】
技术研发人员：耿文慧，李欢欢，郑子涵，陈全胜，骆小凤，欧阳琴，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：
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