抗淀粉样β抗体制造技术

提供了结合人类β

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗淀粉样
β
抗体
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2020年7月23日提交的美国临时专利申请号63/055,813、2020年10月1日提交的美国临时专利申请号63/086,589、2021年5月11日提交的美国临时专利申请号63/187,379及2021年7月8日提交的美国临时专利申请号63/219,611的权益，所有该等申请以全文引用之方式并入本文中。
[0003]序列表声明
[0004]序列表的计算机可读形式通过电子提交方式与本申请一起提交，并通过引用其整体并入本申请。序列表包含在2021年7月22日创建的文件中，具有文件名“20
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1030
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WO_Sequence
‑
List_ST25.txt”，并且大小为155kb。


[0005]本公开涉及抗淀粉样β(Aβ)抗体以及组合物及其使用方法。

技术介绍

[0006]阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease，AD)是导致老年性痴呆的进行性疾病。该疾病一般被归类为发生在老年(65岁+)的晚期发作以及在老年期之前(即35至60岁)完全发展的早期发作。此两种类型疾病的疾病病理似乎相同，但在较早年龄开始的病例中，异常往往更严重且更广泛。该疾病的特征在于脑中的至少两种类型的病变：神经原纤维缠结及老年斑块。神经原纤维缠结是微管相关tau蛋白的细胞内沉积，微管相关tau蛋白由彼此成对缠绕的两条细丝组成。老年斑块(即淀粉样斑块)是通过对脑组织切片的显微镜分析可见的在中心处具有细胞外淀粉样沉积的直径高达150μm的无组织型神经纤维网面积。脑内淀粉样斑块的积累亦与唐氏综合征(Down
’
s syndrome)及其他认知病症相关。
[0007]斑块的主要成分是称为Aβ(淀粉样β(Abeta))或β
‑
淀粉样肽的肽。Aβ肽是称为淀粉样前体蛋白(APP)的较大跨膜糖蛋白的39至43个氨基酸的4
‑
kDa内部片段。由于不同分泌酶对APP进行蛋白水解加工，因此Aβ主要以短形式(长度为40个氨基酸)及长形式(长度为42至43个氨基酸)两种形式存在。APP的部分疏水跨膜域位于Aβ的羧基端，且可以解释Aβ聚集成斑块的能力，特别是在长形式的情况下。脑中淀粉样斑块的积累最终导致神经元细胞死亡。与此种类型的神经退化相关的身体症状表征阿尔茨海默病。

技术实现思路

[0008]本公开涉及特异性结合至Aβ的抗体(及抗体片段)、产生此类抗体及抗体片段及相关核酸的方法、治疗患有Aβ相关神经疾病的患者的方法、显示对Aβ的高亲和力结合的抗体的药学配制剂及组合物，其用于以下的防治性和/或治疗性用途：例如治疗、降低淀粉样生成性疾病(amyloidogenic disease)风险或延迟淀粉样生成性疾病发作，预防、减少或抑制淀粉样生成性疾病的标志物，例如Aβ斑块，以及改善认知。本公开进一步涉及检测淀粉样斑块及测量进行淀粉样生成性疾病治疗的患者的治疗功效的方法。本公开至少部分地基于特
异性结合至Aβ肽且有效减少斑块负荷及中和与淀粉样生成性病症(amyloidogenic disorder)相关的可溶性Aβ种类的单克隆抗体的鉴定及表征。
[0009]在各种方面中，本公开涉及特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段。该抗体及片段包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区和包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中该重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2及CDR3如表1中的抗体中之一者所显示。此外，本公开的抗体或片段可具有如表1中之抗体中之一者所显示的重链可变区且可具有如表1中之抗体中之一者所显示的轻链可变区。
[0010]在本公开的各种实施方案中，抗体及其片段包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区以及包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中
[0011]重链CDR1包含SEQ ID NO:16、19或20中之一者，
[0012]重链CDR2包含SEQ ID NO:20、21、22或23中之一者，
[0013]重链CDR3包含SEQ ID NO:18、24或25中之一者，
[0014]轻链CDR1包含SEQ ID NO:26、29、31或32中之一者，
[0015]轻链CDR2包含SEQ ID NO:33、34、35或36中之一者，及
[0016]轻链CDR3包含SEQ ID NO:28、38或39中之一者。
[0017]本公开的抗体或其片段可包含与选自SEQ ID NO:3、4、5、6及7的氨基酸序列至少95％或98％相同的重链可变区(不包括CDR)及与选自SEQ ID NO:8、9、10、11、12、13、14及15的氨基酸序列至少95％或98％相同的轻链可变区(不包括CDR)。此外，该重链可变区可选自SEQ ID NO:3、4、5、6及7，及该轻链可变区可选自SEQ ID NO:8、9、10、11、12、13、14及15。
[0018]在进一步的实施方案中，本公开涉及特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区以及包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，具有以下氨基酸序列：
[0019]重链CDR1包含氨基酸序列GFTFSNX1GMS，其中X1为Y或F(SEQ ID NO:88)；
[0020]重链CDR2包含氨基酸序列SX1RSGSGRTYYSDNVKG，其中X1为I或V(SEQ ID NO:89)；
[0021]重链CDR3包含氨基酸序列YDHYX1GX2SDY，其中X1为S或T且X2为S或T(SEQ ID NO:90)；
[0022]轻链CDR1包含氨基酸序列KSSQSLLDYDGKTYLN(SEQ ID NO:91)；
[0023]轻链CDR2包含氨基酸序列X1VX2NRDX3，其中X1为K或R，X2为S或T，且X3为S或T(SEQ ID NO:92)。
[0024]轻链CDR3包含氨基酸序列WQGTHFPRX1，其中X1为S或T(SEQ ID NO:93)。
[0025]此外，该轻链CDR3可为WQGTHFPRX1FX2，其中X1为S或T且X2为F或Y(SEQ ID NO:94)。
[0026]再进一步地，本公开的实施方案涉及特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区及包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，具有以下氨基酸序列：
[0027]重链CDR1包含氨基酸序列GFTFX1NX2GMS，其中X1为S或A，且X2为Y或F(SEQ ID NO:95)；
[0028]重链CDR2包含氨基酸序列SX1RSGX2X3RTYYSDNVKG，其中X1为I或V，X2为S或G且X3为S或G(SEQ ID 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区和包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3以及所述轻链CDR1、CDR2和CDR3如针对表1A和表1B中的抗体中之一者所显示。2.如权利要求1的抗体或其片段，其中所述重链可变区如针对表1A和表1B中的抗体中之一者所显示。3.如权利要求1的抗体或其片段，其中所述轻链可变区如针对表1A和表1B中的抗体中之一者所显示。4.一种特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区和包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中重链CDR1包含SEQ ID NO:16、19或20中之一者，重链CDR2包含SEQ ID NO:20、21、22或23中之一者，重链CDR3包含SEQ ID NO:18、24或25中之一者，轻链CDR1包含SEQ ID NO:26、29、31或32中之一者，轻链CDR2包含SEQ ID NO:33、34、35或36中之一者，并且轻链CDR3包含SEQ ID NO:28、38或39中之一者。5.如权利要求1或权利要求4的抗体或其片段，其中不包括所述CDR的所述重链可变区与选自SEQ ID NO:3、4、5、6和7的氨基酸序列至少95％相同，并且不包括所述CDR的所述轻链可变区与选自SEQ ID NO:8、9、10、11、12、13、14和15的氨基酸序列至少95％相同。6.如权利要求5的抗体或其片段，其中不包括所述CDR的所述重链可变区与选自SEQ ID NO:3、4、5、6和7的氨基酸序列至少98％相同，并且不包括所述CDR的所述轻链可变区与选自SEQ ID NO:8、9、10、11、12、13、14和15的氨基酸序列至少98％相同。7.如权利要求6的抗体或其片段，其中重链可变区选自SEQ ID NO:3、4、5、6和7，并且所述轻链可变区选自SEQ ID NO:8、9、10、11、12、13、14和15。8.一种特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区和包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中：重链CDR1包含氨基酸序列GFTFSNX1GMS，其中X1为Y或F(SEQ IDNO:88)；重链CDR2包含氨基酸序列SX1RSGSGRTYYSDNVKG，其中X1为I或V(SEQ ID NO:89)；重链CDR3包含氨基酸序列YDHYX1GX2SDY，其中X1为S或T且X2为S或T(SEQ ID NO:90)；轻链CDR1包含氨基酸序列KSSQSLLDYDGKTYLN(SEQ ID NO:91)；轻链CDR2包含氨基酸序列X1VX2NRDX3，其中X1＝K或R，X2为S或T，并且X3为S或T(SEQ ID NO:92)；轻链CDR3包含氨基酸序列WQGTHFPRX1，其中X1为S或T(SEQ IDNO:93)。9.如权利要求8的抗体或其片段，其中轻链CDR3包含WQGTHFPRX1FX2，其中X1为S或T并且X2为F或Y(SEQ ID NO:94)。10.一种特异性结合至Aβ肽的抗体或其片段，其包括包含重链CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区和包括包含轻链CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区，其中：重链CDR1包含氨基酸序列GFTFX1NX2GMS，其中X1为S或A，并且X2为Y或F(SEQ ID NO:95)；重链CDR2包含氨基酸序列SX1RSGX2X3RTYYSDNVKG，其中X1为I或V，X2为S或G并且X3为S或G(SEQ ID NO:96)；
重链CDR3包含氨基酸序列YDHYX1GX2SDY，其中X1为S或T并且X2为S或T(SEQ ID NO:90)；轻链CDR1包含氨基酸序列X1SSQSLX2DX3DGKTYLN，其中X1为K或R，X2为V、M或L，并且X3为Y、T或S(SEQ ID NO:97)；轻链CDR2包含氨基酸序列X1VX2NRX3X4，其中X1＝K或R，X2为S或T，并且X3为E或D，并且X4为S或T(SEQ ID NO:98)；轻链CDR3包含氨基酸序列WQGX1HFPRX2，其中X1为S或T，并且X2为S或T(SEQ ID NO:99)。11.如权利要求10的抗体或其片段，其中轻链CDR3包含WQGTHFPRX1FX2X3，其中X1为S或T，X2为S或T并且X3为F或Y(SEQ ID NO:100)。12.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其中所述抗体是人源化的。13.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其中所述抗体是人类IgG1。14.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其中所述抗体是全抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体或重组抗体。15.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其中所述片段是Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fabc或Fv。16.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其进一步包括包含与SEQ ID NO:40至少95％相同的氨基酸序列的重链恒定区。17.如权利要求1至11中任一项的抗体或其片段，其进一步包括包含与SEQ ID NO:41至少95％相同的氨基酸序列的轻链恒定区。18.如权利要求1至17中任一项的抗体或其片段，其中所述抗体特异性结合至具有包含来自Aβ的氨基酸1
‑
7的三个或更多个氨基酸位置的氨基酸序列的表位。19.一种核酸，其编码如权利要求1至18中任一项的抗体或片段的重链和/或轻链。20.一种药物组合物，其包含如权利要求1至19中任一项的抗体或其片段，和药学上可接受的载剂或稀释剂。21.一种产生权利要求1至18中任一项的抗体或其片段的方法，所述方法包括：(a)培养用编码所述抗体或其片段的重链和轻链的核酸转化的细胞，使得所述细胞分泌所述抗体或其片段；和(b)自细胞培养物纯化所述抗体或其片段。22.一种产生生产如权利要求1至18中任一项的抗体或其片段的细胞系的方法，所述方法包括：(a)将编码所述抗体或其片段的重链和轻链和可选择的标志物的载体引入细胞中；(b)使所述细胞在选择具有增加载体拷贝数的细胞的条件下繁殖；(c)自所述所选细胞分离单个细胞；和(d)储存自基于抗体或其片段的产率所选择的单个细胞克隆的细胞。23.如权利要求22的方法，其进一步包括在选择性条件下繁殖所述细胞且筛选天然表达和分泌至少100mg/L/10^6个细胞/24小时的细胞系。24.一种预防或治疗患者的淀粉样生成性疾病的方法，其包括向所述患者施用有效剂量的如权利要求1至18中任一项的抗体或片段。25.如权利要求24的方法，其中所述淀粉样生成性疾病是系统性淀粉样变性、阿尔茨海默病、成年期发病型糖尿病、帕金森病...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：欧萨尔普罗席纳有限公司，
类型：发明
国别省市：