一种提取蚯蚓体腔细胞的溶液及超声方法技术

发明专利技术公开了一种提取蚯蚓体腔细胞的溶液及超声方法，属于生物工程技术领域。提取蚯蚓体腔细胞的溶液，以每３ｍＬ计其中含有６０－７０ｍＭ　ＮａＣｌ、重量含量５％－６％ｅｔｈａｎｏｌ、５０－６０ｍＭ　ｇｕａｉｃｏｌ　ｇｌｙｃｅｒｙｌ　ｅｔｈｅｒ和５－６ｍＭ　ＥＧＴＡ的ＰＢＳ缓冲液。操作步骤：第一步，蚯蚓清肠，用ＰＢＳ缓冲液反复清洗；第二步，将蚯蚓放入冰冷提取体腔细胞的溶液中，迅速以超声进行提取；第三步，移去蚯蚓，加入ＬＢＢＳ缓冲液清洗，离心，去上清，所得沉淀为体腔细胞；第四步，加入细胞液孵育；第五步，台盼蓝染色、镜检，计算细胞存活率。本发明专利技术所提取的体腔细胞数量多，成活率高，能满足细胞凋亡以及单细胞凝胶电泳实验的需要，能用于对土壤污染进行早期诊断，实现早期预警的作用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种提取蚯蚓体腔细胞的超声方法，主要包括如下几个步骤：　第一步，将蚯蚓清肠，用ＰＢＳ缓冲液反复清洗；　第二步，将蚯蚓放入用于提取蚯蚓体腔细胞的溶液，迅速用超声进行提取；　第三步，移去蚯蚓，加入ＬＢＳＳ缓冲液清洗，离心，去上清，所得沉淀 为体腔细胞；　第四步，加入细胞液孵育；　第五步，台盼蓝染色、镜检，计算细胞存活率。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓蓉，薛银刚，姜锦林，顾雪元，吴可，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]