一种桑叶1-DNJ的高效提取方法技术

本发明专利技术涉及桑叶资源化利用技术领域，具体公开了一种桑叶1

【技术实现步骤摘要】
一种桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法


[0001]本专利技术涉及桑叶资源化利用
，尤其是涉及一种桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法。

技术介绍

[0002]1‑
脱氧野尻霉素(1
‑
DNJ)系强效α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂。1
‑
DNJ可以有效抑制人体糖分的转化，降低血液中的糖含量，降低空腹血糖和餐后血糖的升高效果优于磺脲类药物，发生低血糖及其它副作用的可能性远低于其它降血糖药物，安全性非常高；而且使用1
‑
DNJ可以不改变正常的饮食结构，是一种非常便捷、安全的降血糖成分；同时1
‑
DNJ还具有优良的抗病毒、抗肿瘤转移等多种生物活性。
[0003]目前，1
‑
DNJ的获取通常来自桑科植物桑的枝、叶、根中，尤其是桑叶独具的生长性和易加工性，常被作为1
‑
DNJ提取的首选原料。现有技术中对1
‑
DNJ的提取所采用的桑叶，在初处理时常将其粉碎为粉末状，然后采用水提、有机溶剂浓缩、树脂柱层析提高纯度等工艺步骤从桑叶中获得1
‑
DNJ。上述技术方案中存在的缺陷是，(1)桑叶的机械粉碎难以将桑叶细胞壁破损，或者桑叶细胞壁实际破损率不高，而1
‑
DNJ等有效成分普遍存在于桑叶细胞壁内的胞液中，在桑叶细胞壁破损率较低的情况下内部有效成分难以溶出，因此1
‑
DNJ的提取率/实际得率并不高；(2)提取分离1
‑
DNJ的柱层析提纯过程需要使用大量有机溶剂比如乙醇、氨水或甲醇进行洗脱，后续工艺涉及含大量有机溶剂洗脱液的处理、提取液的浓缩等，更重要的是，提取过程也会不可避免地使用较多的有机溶剂，影响高生物活性的药用终产物1
‑
DNJ的安全性；(3)浓缩后得到的是成分复杂、1
‑
DNJ含量较低的水溶性桑叶水溶性复合提取物，而且由于有机溶剂的使用，难以直接作为以1
‑
DNJ为主体的有效活性原料。

技术实现思路

[0004]针对现有技术不足，本专利技术提供了一种桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法。
[0005]本专利技术解决上述技术问题采用的技术方案为：
[0006]一种桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法，其包括以下步骤：
[0007](1)取桑叶进行紫外辐射预处理；
[0008](2)将处理后的桑叶进行粉碎，得到桑叶粉；
[0009](3)将步骤(2)得到的桑叶粉进行超临界萃取处理；
[0010](4)步骤(3)得到的萃余物经分离纯化，得到1
‑
DNJ水溶液。
[0011]进一步地，步骤(1)中所述的紫外辐射预处理为，采用280
‑‑
320nm的中波UV
‑
B对桑叶进行辐射，处理时间30
‑
60min，辐射结束后，置于暗处静置10
‑
20h。
[0012]进一步地，步骤(2)中所述的桑叶粉为50
‑
150目的桑叶粉。
[0013]进一步地，步骤(3)中所述的超临界萃取处理为，将步骤(2)得到的桑叶粉置于超临界萃取釜中，以95％乙醇为夹带剂，夹带剂流速1
‑
3ml/min，萃取温度35
‑
50℃，萃取压强30
‑
45MPa，萃取时间1
‑
3h；分离釜1的压强设置为7
‑
9MPa，分离釜2的压强设置为3
‑
5MPa。
[0014]进一步地，步骤(4)中所述的萃余物的分离纯化工艺，包括以下步骤：
[0015]a)从萃取釜取出桑叶粉，加入20
‑
30倍的蒸馏水，于60
‑
80℃提取1
‑
2h，提取2
‑
3次；
[0016]b)提取结束后，将提取液离心，抽滤，取上清液；
[0017]c)加入选择性去杂沉降剂，搅拌后于30
‑
35℃静置2
‑
4h，然后离心、抽滤，取沉淀；
[0018]d)用HCl溶解并调节沉淀pH至弱酸性，小于1
‑
DNJ的pKa；
[0019]e)加入三氯化铁络合沉淀；
[0020]f)离心除去沉淀，即可得到1
‑
DNJ水溶液。
[0021]进一步地，所述的选择性去杂沉降剂为0.8
‑
1.2mg/ml的管仲溶液。
[0022]进一步地，所述的桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法所得桑叶1
‑
DNJ提取率为0.50
‑
0.60％，固体1
‑
DNJ产品得率为1
‑
3％，纯度为25
‑
40％。
[0023]本申请采用紫外线辐射的方法对桑叶进行预处理，然后通过超临界萃取与分离纯化等方法提取桑叶中的以1
‑
DNJ为主体的有效活性成分。其中：
[0024]紫外辐射预处理可以促进桑叶1
‑
DNJ的合成；使桑叶细胞壁破损，有利于有效成分溶出。本申请采用的紫外辐射预处理为中波紫外辐射(UV
‑
B，280
‑
320nm)，其属于生物有效辐射，UV
‑
B辐射穿透能力强，能量高，对新鲜桑叶的氮代谢造成一定影响。新鲜桑叶受到UV
‑
B辐射时，体内能吸收紫外线的次生代谢产物如黄酮、生物碱等的含量会增加，对紫外辐射预处理后的新鲜桑叶进行适当的遮阴处理可以有效促进桑叶1
‑
DNJ的合成；同时，在UV
‑
B诱导下，桑叶的细胞壁和亚细胞结构会遭受严重的破坏，使内部胞液成分充分溶出；UV
‑
B辐射处理可能会降低桑叶中叶绿素的含量，但对本申请的目标产物无显著不利影响。
[0025]超临界萃取可实现对桑叶粉的脱脂处理，促进后续1
‑
DNJ的提取；超临界萃取处理可以促进脂质、色素等杂质的溶出，并进一步促进桑细胞的破壁，有利于后续的1
‑
DNJ提取。
[0026]分离纯化处理工艺可以有效沉降去除桑叶提取液中的杂质，通过吸附沉降
‑
解吸附的机理，有效去除有效成分提取液中的鞣质、脂质、蛋白等杂质，提高1
‑
DNJ得率。桑叶水提液中除含有1
‑
DNJ外，还含有蛋白质、多糖、鞣质、脂质等，其中1
‑
DNJ结构带有叔氨基(如下图左所示)，在水溶液中电离带正电荷，而其他成分不带电荷。选择性去杂沉降剂管仲溶液中的管仲主要成分分子式含有多个苯酚结构(如下图右所示)，在水溶液中电离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取桑叶进行紫外辐射预处理；(2)将处理后的桑叶进行粉碎，得到桑叶粉；(3)将步骤(2)得到的桑叶粉进行超临界萃取处理；(4)步骤(3)得到的萃余物经分离纯化，得到1
‑
DNJ水溶液。2.根据权利要求1所述的桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述的紫外辐射预处理为，采用280
‑‑
320nm的中波UV
‑
B对桑叶进行辐射，处理时间30
‑
60min，辐射结束后，置于暗处静置10
‑
20h。3.根据权利要求1所述的桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法，其特征在于：步骤(2)中所述的桑叶粉为50
‑
150目的桑叶粉。4.根据权利要求1所述的桑叶1
‑
DNJ的高效提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述的超临界萃取处理为，将步骤(2)得到的桑叶粉置于超临界萃取釜中，以95％乙醇为夹带剂，夹带剂流速1
‑
3ml/min，萃取温度35
‑
50℃，萃取压强30
‑
45M Pa，萃取时间1
‑
3h；分离釜1的压强设置为7
‑
9MPa，分离釜2的压强设置为3
‑
5MP...

【专利技术属性】
技术研发人员：于秋生，何剑飞，郝祥蕊，韩粉丽，於慧利，张红艳，冯镇泰，
申请(专利权)人：上海农乐生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：