蛋白基固定化酶及其制备方法及高效制备甘油二酯的方法技术

本发明专利技术公开了一种蛋白基固定化酶的制备方法，包括以下步骤：步骤一、提取得到花生球蛋白；步骤二、加去离子水制备得到花生球蛋白分散液，调节pH至碱性，进行乙酰化改性得到乙酰化花生球蛋白溶液；步骤三、乙酰化花生球蛋白溶液依次经热处理、盐处理得到乙酰化花生球蛋白颗粒；步骤四、使用戊二醛将乙酰化球蛋白颗粒和脂肪酶进行交联固定，交联反应结束后，离心取沉淀，加入去离子水剪切破碎，得到蛋白基固定化酶。本发明专利技术具有可用于食品体系，甘油二酯催化效率高的有益效果。本发明专利技术提供一种蛋白基固定化酶，脂肪酶固载效率高，比活性强。提供一种甘油二酯的制备方法，制备效率高。制备效率高。制备效率高。

【技术实现步骤摘要】
蛋白基固定化酶及其制备方法及高效制备甘油二酯的方法


[0001]本专利技术涉及脂肪酶固定化与应用
更具体地说，本专利技术涉及一种蛋白基固定化酶及其制备方法及高效制备甘油二酯的方法。

技术介绍

[0002]生物酶是一种常见的生物催化剂，因其具有较高的化学、区域和立体选择性且能在温和的反应条件下表现出较高的催化活性可用于多种有机反应。然而亲水性的生物酶在催化疏水性底物时，两相界面小，底物在两相之间传质效率低，酶与底物接触不充分，导致催化效率低。为了适应有机反应介质，提高回收利用性，目前常用乳化的手段增大反应接触面积，提高催化效率。为了维持乳液稳定和催化界面，通常需要加入小分子表面活性剂或者剧烈的搅拌。然而小分子表面活性剂难以与产物分离，会带来安全性问题。此外，小分子表面活性剂和剧烈搅拌都会不同程度的破坏酶结构，进而影响酶活。
[0003]中国申请，申请号为201810430317.7的实施例1中公开了一种选取硅胶为载体固定GDH制备NADPH。使用硅胶作为生物酶的载体，硅胶降解性低、具有一定的生物毒性，限制了其在食品领域的应用。而本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白基固定化酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、提取得到花生球蛋白；步骤二、将花生球蛋白加去离子水制备得到花生球蛋白分散液，调节pH至碱性，进行乙酰化改性得到乙酰化花生球蛋白溶液；步骤三、乙酰化花生球蛋白溶液依次经热处理、盐处理得到乙酰化花生球蛋白颗粒；步骤四、使用戊二醛将乙酰化球蛋白颗粒和脂肪酶进行交联固定，交联反应结束后，离心取沉淀，加入去离子水剪切破碎，得到蛋白基固定化酶。2.如权利要求1所述的蛋白基固定化酶的制备方法，其特征在于，花生球蛋白的提取方法具体为：将花生脱脂粉用pH为6.9～7.5、浓度为0.35～0.45mol/L的磷酸缓冲溶液以料液比1g:1.5～3.5mL混合，于6000～10000rpm离心20～40min，去除沉淀，取上清液于2～5℃条件下冷沉一定时间，于2～5℃、6000～10000rpm离心20～40min，取沉淀，冷冻干燥或喷雾干燥得到花生球蛋白。3.如权利要求1所述的蛋白基固定化酶的制备方法，其特征在于，乙酰化改性的方法具体为：调节花生球蛋白分散液的pH值为9.5～11，花生球蛋白分散液中花生球蛋白的含量为6.5wt％，加入花生球蛋白0～50wt％的丁二酸酐，搅拌20～50min，并保持pH值为9.5～11，于2～4℃条件下采用10kDa的透析袋透析24～48h，得到乙酰化花生球蛋白溶液。4.如权利要求1所述的蛋白基固定化酶的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：王强，焦博，李薇，石爱民，吴必聪，张誉，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：