恶臭假单胞菌KT2440高效电转化方法技术

本发明专利技术涉及恶臭假单胞菌ＫＴ２４４０（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｐｕｔｉｄａ　ＫＴ２４４０）高效电转化方法。该方法是：以ＥＭ培养基，３０℃培养菌体至ＯＤ↓［６００］为０．６－０．７５，３ｍＭ　４－羟乙基哌嗪乙磺酸（ＨＥＰＥＳ，ｐＨ＝７．０）缓冲液洗涤并悬浮菌体，电转化条件：１．２ＫＶ，２００Ω，２５μＦ；电转化后加１ｍｌ　ＳＯＣ培养基，在１５ｍｌ聚丙烯离心管中，３０℃培养２ｈ。利用本发明专利技术的方法转化效率可达３．０×１０↑［８］／μｇ，比现有技术效率高出３０倍左右。高效的电转化效率可以保证外源基因高效的转化至菌株；保证大分子量质粒ＤＮＡ也可以高效电转化；在需要高效率转化时，如随机文库的转化时尤为关键。本发明专利技术也可为高效转化其它假单胞杆菌提供借鉴。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种恶臭假单胞菌ＫＴ２４４０高效电转化方法，其特征在于，以ＥＭ培养基，３０℃培养菌体至ＯＤ↓［６００］为０．６－０．７５，用３ｍＭ、ｐＨ＝７．０的４－羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液洗涤并悬浮菌体；在１．２ＫＶ，２００Ω，２５μＦ条件下进行电转化；电转化后加１ｍｌＳＯＣ培养基，在１５ｍｌ聚丙烯离心管中，温育３０℃培养２ｈ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：尚广东，陈莎莎，杨圣勇，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]