利用混合菌种提高天然牧草生产燃料乙醇利用率的方法技术

本发明专利技术属于利用天然多年生牧草生产绿色可再生生物质燃料乙醇技术领域，具体涉及利用自主筛选混合优化菌种提高天然多年生牧草及其杂类草生产绿色可再生生物质燃料乙醇利用率的方法。本发明专利技术初步选择能够混合生长的木质素降解菌与纤维素降解菌；再经过固态发酵复选、优化菌种组合、优化混合菌种工程制备的方式，将杂色云芝、硫磺菌、绿色木霉、黑曲霉、长毛菌五种菌种两两混合，固态发酵优选出混合菌种组合－杂色云芝与绿色木霉、杂色云芝与长毛，固态发酵天然多年生杂类草，使木质素的降解率较单一菌种发酵提高４６．２５％，纤维素降解率较单一菌种发酵提高１０．０９％，半纤维素降解率提高１１％。该方法操作简单易行，可有效提高木质素降解率和木质纤维类物质的利用率，大大降低生产成本，提高了利用多年生天然牧草生产生物燃料乙醇的利用率和转化效率，为发展能源草业提供了科学支撑。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种提高天然多年生牧草及其杂类草生产绿色可再生生物质燃料乙醇利用效率的方法，其特征是由多年生木质素降解菌与纤维素降解菌混合优化培养而成，由以下步骤构成：　（１）混合菌种初选：在ＰＤＡ固态培养基上，经过大量菌种试验，初步选择能够进行混合 的多年生木质素降解菌与纤维素降解菌，以ＰＤＡ培养基为基础培养基，将斜面菌种培养７ｄ，观察菌种在ＰＤＡ培养基上的生长速度、生长外观、菌种间相互作用的现象；　（２）固态发酵复选：利用固态发酵培养基，将能够混合的菌种，在固态发酵培养基上以一 定的接种比例接种，固态发酵测定木质素降解酶活性、纤维素降解酶活性、天然牧草中三素含量的变化，筛选能够协同配合固态发酵的混合菌种；　（３）固态发酵培养优化：将混合菌种与单一菌种所产生的降解酶的种类与降解酶活性的高低进行对比，优选所产生的 降解酶活性强，多年生木质纤维类物质降解率高的混合优化组合，进一步观察其混合生长的现象；　（４）优化菌种组合工程制备：将所筛选出的优化混合菌种在一定的条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的生产菌种，以作为进一步扩大菌体量及合成产物 之用。其工程制备包括孢子制备和菌丝体制备等。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李建龙，赵芸晨，范娟，余醉，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]