一种肽核酸探针、microRNA-10b检测试纸条以及试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种肽核酸探针、microRNA

【技术实现步骤摘要】
一种肽核酸探针、microRNA
‑
10b检测试纸条以及试剂盒


[0001]本专利技术涉及核酸检测
，尤其涉及一种肽核酸探针、microRNA
‑
10b检测试纸条以及试剂盒。

技术介绍

[0002]微小RNA(microRNA，miRNA)的长度为19～25个核苷酸，可在转录后调控基因的表达。近年来，因miRNA在细胞内具有多种重要的调节作用而成为医学研究的热点。目前已发现的miRNA分子超过38000个。其中。mi RNA
‑
10b的长度为23nt，序列为5'
‑
UACCCUGUAGAACCGAAUUUGUG
‑
3'，如SEQ ID NO.5所示。单链miRNA
‑
10b可通过与其互补的信使RNA完全或不完全结合而诱导基因沉默，调控基因表达。近年来，越来越多的研究报道指出，miRNA
‑
10b通过靶向与细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭等有关的基因而在肝癌、结直肠癌和胶质瘤等多种肿瘤的发生发展中扮演着重要的角色。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肽核酸探针，其特征在于，由封端基团和核酸连接得到，所述核酸的序列如SEQ ID NO.1所示；所述封端基团为半胱氨酸。2.根据权利要求1所述的肽核酸探针，其特征在于，所述封端基团位于核酸的5'端。3.一种microRNA
‑
10b检测试纸条，其特征在于，包括底板、样品垫、金标结合垫、杂交膜和吸水垫；所述样品垫、金标结合垫、杂交膜和吸水垫依次搭接设置于底板上；所述杂交膜上依次设置检测线和质控线；所述金标结合垫上包被有AuNPs
‑
肽核酸探针复合物；所述检测线上包被探针2，所述探针2的序列如SEQ ID NO.3所示；所述质控线上包被探针3，所述探针3的序列如SEQ ID NO.4所示。4.权利要求3所述的microRNA
‑
10b检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将AuNPs和权利要求1所述的肽核酸探针耦连，得到AuNPs
‑
肽核酸探针复合物，将AuNPs
‑
肽核酸探针复合物包被至金标结合垫，得到包被后的金标结合垫；采用探针2溶液在杂交膜上划线，得到检测线；采用探针3溶液在杂交膜上划线，得到质控线；将样本垫、金标结合垫、杂交膜和吸水垫进行组装，得到microRNA
‑
10b检测试纸条。5.根据权利要求4所述的microRNA
‑
10b检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述探针2溶液和探针3溶液的浓度独立的为8～12μmol/L；所述检测线和质控线之间的距离为3～5mm。6.根据权利要求4或5所述的microRNA
‑
10b检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述将AuNPs和权利要求1所述的肽核酸探针耦连具体包括如下步骤：将10～20μmol/L的AuNPs溶液在3～5℃、8000～12000r/min的条件下进行离心5～15min，得到AuNPs沉淀，采用ddH2O将AuNPs沉淀进行重悬，得到重悬AuNPs溶液；将肽核酸探针溶液与重悬AuNPs溶液混合，所述肽核酸探针溶液中包含权利要求1所述的肽核酸探针，所述肽核酸探针溶液的浓度为5～15μmol/L，得到混合溶液
①
；将混合溶液
①
在3～5℃条件下放置20～30h，得到AuNPs
‑
肽核酸探针溶液；将AuNPs
‑
肽核酸探针溶液与磷酸缓冲液、NaCl水溶液混合，得到混合溶液
②
；将混合溶液
②
在3～5℃条件下放置40～55h，然后在3～5℃、10000～14000r/min的条件下进行离心10～20min，完成AuNPs和权利要求1所述肽核酸探针的耦连。7.根据权利要求6所述的microRNA
‑
10b检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述AuNPs
‑
肽核酸探针溶液、磷酸缓冲液和NaCl水...

【专利技术属性】
技术研发人员：李可洲，刘奥迪，
申请(专利权)人：西南交通大学，
类型：发明
国别省市：