两株三氯乙烯同化降解菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于环境微生物技术领域，具体公开了两株三氯乙烯同化降解菌Cytobacillus oceanisediminis SH48和Lysinibacillus fusiformis SH13及其应用。Cytobacillus oceanisediminis SH48和Lysinibacillus fusiformis SH13菌株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号分别为CCTCC M 2023370和CCTCC M2023371，保藏日期为2023年3月21日，两株菌株生长对环境条件要求低，能够在不添加额外生长基质的条件下以三氯乙烯为自身生长所需的唯一碳源与能源，有效降解氯代烃污染物，释放无机游离氯离子且无毒性中间产物积累，该菌株或由其制备的微生物菌剂可用于氯代烃污染的工业污染场地的土壤或地下水的生物修复，具有重要应用前景。具有重要应用前景。具有重要应用前景。

【技术实现步骤摘要】
SH13菌株的筛选方法，包括以下步骤：
[0010]S1.厌氧富集：在三氯乙烯污染的场地采集土壤样品，将土壤样品加到无菌水中混合，并外源添加三氯乙烯和甲醇作为刺激剂对菌群进行厌氧条件下的富集培养，期间补加三氯乙烯；
[0011]S2.分离纯化：用梯度稀释法获得富集土壤的梯度稀释悬液，并涂布在添加乙酸盐、三氯乙烯和甲醇的无机盐固体培养基上，在有氧条件下进行分离培养，生长出的单菌落进行划线纯化，得到多个纯化的菌株；
[0012]S3.分子鉴定：将步骤S2中分离得到的菌株提取DNA，并进行ERIC
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PCR分型，挑选代表性菌株进行16S rRNA基因全长片段的PCR扩增与测序，利用NCBI数据库经Blast比对鉴定其分类地位；
[0013]S4.降解试验：将鉴定过的菌株分别接入以三氯乙烯为唯一碳源的无机盐基本液体培养基中培养，培养结束后通过生长状态、检测培养液顶空中的三氯乙烯含量以及培养液中氯离子释放量来筛选出可有效降解三氯乙烯的菌株。
[0014]本专利技术的目的之二是提供上述Cytobacillus oceanisediminis本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株三氯乙烯同化降解菌，其特征在于：该菌为海洋沉积物纤维芽孢杆菌Cytobacillus oceanisediminis SH48，保藏编号为：CCTCC M 2023370，16SrRNA序列如SEQ ID NO:1所示。2.一株三氯乙烯同化降解菌，其特征在于：该菌为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus fusiformis SH13，保藏编号为：CCTCC M 2023371，16S rRNA序列如SEQ ID NO:2所示。3.权利要求1或2所述的三氯乙烯同化降解菌的筛选方法，包括以下步骤：S1.厌氧富集：在三氯乙烯污染的场地采集土壤样品，将土壤样品加到无菌水中混合，并外源添加三氯乙烯和甲醇作为刺激剂对菌群进行厌氧条件下的富集培养，期间补加三氯乙烯；S2.分...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓君，张蕾，杨楷文，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：