一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法技术

本发明专利技术涉及培养基的制备方法技术领域，特别涉及一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括S1：制备基础培养基；S2：制备补充剂1和补充剂2；S3：制备混合培养基，即在基础培养基中加入补充剂2并灭菌处理，然后加入补充剂1，搅拌均用，得到混合培养基。本发明专利技术制备方法简单，制备得到的培养基可有效促进冬虫夏草菌种快速生长，为生产提供大量的发酵菌种。种。

【技术实现步骤摘要】
121℃下灭菌30
‑
35min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入补充剂1，补充剂1和补充剂2的添加量均为基础培养基量的0.5%
‑
1%；搅拌均用，得到混合培养基，将混合培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。制备得到的混合培养基即为本专利技术促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。
[0006]进一步地，步骤S1中所述基础培养基包含以下组分，蛋白胨5g/L、酵母提取粉为12g/L、葡萄糖为15g/L、磷酸二氢钾0.5 g/L、硫酸镁为0.5 g/L、琼脂20 g/L，即每1L蒸馏水中加入蛋白胨5g、酵母提取粉为12g、葡萄糖为15g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g。
[0007]进一步地，步骤S2中所述补充剂1包含以下组分，维生素B1100g/L、维生素B
12
50g/L和维生素B950g/L，即每1L蒸馏水中加入维生素B1100g、维生素B
12
50g和维生素B950g。
[0008]进一步地，骤S2中所述补充剂2包含以下组分，硫酸亚铁10g/L、硝酸钙100g/L和氯化钠50g/L，即每1L蒸馏水中硫酸亚铁、硝酸钙和氯化钠的添加量分别为10g、100g和50g。
[0009]与现有技术相比，本专利技术一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法具有以下有益效果：1.原料容易得到，成本低；2.制备方法简单，制备得到的培养基可有效促进冬虫夏草菌种快速生长，为生产提供大量的发酵菌种。
实施方式
[0010]为使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细描述，以下实施例仅用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。
实施例
[0011]本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：S1：制备基础培养基取蛋白胨5g、酵母提取粉为12g、葡萄糖为15g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g，加入1000ml蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，在121℃下灭菌30min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
[0012]S2：制备补充剂补充剂1：取维生素B11g、维生素B
12
0.5g、维生素B90.5g，加入10ml蒸馏水，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用；补充剂2：将硫酸亚铁0.1g、硝酸钙1g、氯化钠0.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；S3：制备本专利技术培养基在灭菌容器中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入10ml补充剂2， 121℃下灭菌30min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入10ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，将混合培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。制备得到的混合培养基即为本专利技术促进冬虫夏草菌种快速生长的培养
基。
实施例
[0013]本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：S1：制备基础培养基取蛋白胨3g、酵母提取粉为5g、葡萄糖为5g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g，加入1000ml蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，在121℃下灭菌30min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
[0014]S2：制备补充剂补充剂1：将维生素B10.5g、维生素B
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0.1g、维生素B90.1g，蒸馏水10ml加入三角瓶中，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用。
[0015]补充剂2：依次将硫酸亚铁0.05g、硝酸钙0.5g、氯化钠0.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；S3：制备本专利技术培养基在灭菌的三角瓶中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入5ml补充剂2，盖好棉塞，121℃下灭菌30min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入5ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，该培养基即为本专利技术促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。将培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
实施例
[0016]本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：S1：制备基础培养基蛋白胨10g、酵母提取粉为20g、葡萄糖为20g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g、蒸馏水1000ml，将上述配方依次加入三角瓶中，盖好棉塞，在121℃下灭菌35min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
[0017]S2：制备补充剂补充剂1：取维生素B12g、维生素B
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1g、维生素B91g、蒸馏水10ml加入三角瓶中，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用。
[0018]补充剂2：取硫酸亚铁0.3g、硝酸钙2g、氯化钠1.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；S3：制备本专利技术培养基在灭菌容器中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入8ml补充剂2，盖好棉塞，121℃下灭菌35min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入8ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，该培养基即为本专利技术促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。将培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
实施例
[0019]本实施例以实施例1的配方和制备方法为依据，制备得到基础培养基和本专利技术培养基，然后将提前分离的冬虫夏草菌种在无菌环境中分别接入基础培养基和本专利技术培养基中，菌块直径为5mm，其他所有条件均相同，培养90天，每10天进行观察记录，测定菌落直径，计算菌落平均值，观察其生长速度，具体见表1。
[0020]培养天数基础培养基菌落直径平均值mm本专利技术培养基菌落直径平均值mm0天5510天5.56.320天5.77.230天7.49.540天7.712.650天7.913.360天8.320.170天8.524.780天8.825.390天8.825.5综上，通过本专利技术制备得到的培养基其培养的冬虫夏草菌种生长状况明显优于基础培养基中菌种繁殖速度。
[0021]以上详细描述了本专利技术的优选实施方式，但是，本专利技术并不限于上述实施方式中的具体细节，在本专利技术的技术构思范围内，可以对本专利技术的技术方案进行多种变换，这些简单变型均属于本专利技术的保护范围。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：制备基础培养基该基础培养基包含以下组分：蛋白胨3
‑
10g/L、酵母提取粉为5
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20g/L、葡萄糖为5
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20g/L、磷酸二氢钾 0.5g/L、硫酸镁为0.5g/L、琼脂20g/L；按配方依次加入上述组分和蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，121℃下灭菌30
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35min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用；S2：制备补充剂补充剂1：包含以下组分，维生素B150
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200g/L、维生素B
12
10
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100g/L、维生素B910
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100g/L，按配方加入上述组分和蒸馏水，充分搅拌溶解配制成溶液，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤上述溶液，将滤液密封保存备用；补充剂2：包含以下组分，硫酸亚铁5
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30g/L、硝酸钙50
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200g/L、氯化钠50
‑
150g/L，按配方加入上述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李桂全，李香芬，
申请(专利权)人：青海久实虫草生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：