提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物工程技术，公开了一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株及其构建方法和应用。该重组菌株由出发菌株经基因工程改造获得，相比于所述出发菌株，所述重组菌株中过表达锚定蛋白GPI的编码基因。该重组菌株的构建方法包括：对出发菌株进行基因工程改造，以使得所述出发菌株过表达锚定蛋白GPI的编码基因。本发明专利技术还提供了所述重组菌株和/或所述构建方法得到的重组菌株在生产有机酸中的应用。该重组菌株的有机酸生产水平和发酵强度显著提高，有效减少有机酸的生产成本，具有工业化应用前景。工业化应用前景。工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】
提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物工程技术，具体地，涉及一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株，一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株的构建方法以及一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株的应用。

技术介绍

[0002]四碳有机酸是一类含有4个碳原子且具有一个或两个酸性官能团的低分子量有机化合物。以富马酸、苹果酸和丁二酸等为代表的四碳有机酸已经被广泛应用于食品、医药、化妆品、农药、洗涤剂和纺织等领域，属于重要的平台化学品，具有很大的市场应用价值。
[0003]传统的四碳有机酸的生产方法主要是采用石油化工原料的化学合成或酶转化法，但是，化学合成与酶转化法存在温度高、底物抑制效应、易形成副产物、底物成本高、石油资源损耗、温室气体排放等问题，阻碍了有机酸的可持续性的大规模生产。因此，在寻求工业化可持续的解决方案的趋势下，微生物发酵生产有机酸受到了广泛关注，与化学合成和酶促转化相比，利用可再生生物质原料，依靠生物发酵法生产四碳有机酸具有发酵效率高、成本低廉等优点，被认为是更有前途的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株，其特征在于，该重组菌株由出发菌株经基因工程改造获得，相比于所述出发菌株，所述重组菌株中过表达锚定蛋白GPI的编码基因。2.根据权利要求1所述的重组菌株，其特征在于，所述有机酸为四碳有机酸；所述出发菌株为真菌，优选为丝状真菌。3.根据权利要求2所述的重组菌株，其特征在于，所述有机酸为富马酸，所述出发菌株为米根霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；优选地，所述有机酸为苹果酸，所述出发菌株为米曲霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示；优选地，所述有机酸为丁二酸，所述出发菌株为黑曲霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。4.一种提高有机酸生产水平和发酵强度的重组菌株的构建方法，其特征在于，该方法包括：对出发菌株进行基因工程改造，以使得所述出发菌株过表达锚定蛋白GPI的编码基因。5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述有机酸为四碳有机酸；所述出发菌株为真菌，优选为丝状真菌；优选地，所述有机酸为富马酸，所述出发菌株为米根霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；优选地，所述有机酸为苹果酸，所述出发菌株为米曲霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示；优选地，所述有机酸为丁二酸，所述出发菌株为黑曲霉，所述锚定蛋白GPI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示、编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。6.根据权利要求4或5所述的构建方法，其特征在于，所述对出发菌株进行基因工程改造的过程包括：构建锚定蛋白GPI重组载体，将所述锚定蛋白GPI表达载体转化至所述出发菌株中；优选地，所述锚定蛋白GPI重组载体的表达载体为pEASY
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Blunt Zero质粒。7.权利要求1至3中任意一项所述的重组菌株和/或根据权利要求4至6中任意一项所述的构建方法得到的重组菌株在生产有机酸中的应用。8.一种生产有机酸的方法，其特征在于，包括以...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄和，陈亚如，徐斯淼，吴娜，武星宇，徐晴，张驰，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：