乙酰胆碱酯酶活性检测方法技术

本发明专利技术提出了一种乙酰胆碱酯酶活性检测方法，包括如下步骤：依次将140μL磷酸盐缓冲液、10μL5,5

【技术实现步骤摘要】
乙酰胆碱酯酶活性检测方法


[0001]本专利技术涉及检测方法开发
，尤其涉及一种乙酰胆碱酯酶活性检测方法。

技术介绍

[0002]阿尔海默博士在1901年确诊了世界第一例的AD患者，可距今约120年过去了，人们依然没能揭示出AD确切的发病机制，目前存在的AD发病机制假说有Tau蛋白过度磷酸化假说、氧化应激假说、胆碱能假说、神经免疫炎症假说[9,10]、β淀粉样蛋白(Aβ)病变假说，其中有研究表明AD患者的基底前脑的胆碱能神经细胞缺失，乙酰胆碱酯酶的活性升高，而作为神经递质的乙酰胆碱含量下降，因此针对该假说以乙酰胆碱酯酶为靶点通过抑制乙酰胆碱酯酶的活性是治疗AD的经典策略。
[0003]乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase，乙酰胆碱酯酶)是一种丝氨酸蛋白酶，具有氨肽酶和羧肽酶的活性，主要存在运动神经终板突触后膜和脑部的神经突触中，主要功能是将作为神经递质的乙酰胆碱水解，起着终止神经传导的作用，另外乙酰胆碱酯酶也参与了神经细胞的成熟和发育，能促进神经元的再生和发育。乙酰胆碱酯酶的活性部位有三个主要区域，主要起催化作用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乙酰胆碱酯酶活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、依次将140μL磷酸盐缓冲液、10μL5,5
′‑
二硫双(2
‑
硝基苯甲酸)溶液、10μL乙酰胆碱酯酶溶液和10μL样品液混合，震荡孵育混合溶液；步骤二、向混合溶液中加入10μL碘化硫代乙酰胆碱溶液进行反应，同时开启酶标仪，监测反应体系在405nm下的吸光度值；步骤三、连续监测60min，每分钟测定一次吸光度值，得到吸光度值与监测时间的曲线。2.如权利要求1所述的乙酰胆碱酯酶活性检测方法，其特征在于，磷酸盐缓冲液的pH为7.5
‑
8.5。3.如权利要求1所述的乙酰胆碱酯酶活性检测方法，其特征在于，碘化硫代乙酰胆碱溶液的浓度为0.02
‑
0.08mg/ml。4.如权利要求1所述的乙酰胆碱酯酶活性检测方法，其特征在于，乙酰胆碱酯酶溶液的浓度为1.0
‑
2.0U/ml。5.如权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔灵敏，赖富丽，李韦琴，郝桂芳，徐剑，王喆，
申请(专利权)人：劲牌有限公司，
类型：发明
国别省市：