一种抗艰难梭菌毒素B的单克隆抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及医学生物抗体领域，具体是一种抗艰难梭菌毒素B的单克隆抗体，其重链CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1

【技术实现步骤摘要】
Resonance，SPR)分析抗体亲和力。
[0006]本专利技术的第一方面，提供一种抗艰难梭菌毒素B的单克隆抗体(2F3)，其重链CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列为：
[0007]CDR1：GYTFTSYW，如SEQ ID NO:1所示；
[0008]CDR2：IYPGNNNT，如SEQ ID NO:2所示；
[0009]CDR3：SRGDYGSSYALDY，如SEQ ID NO:3所示；
[0010]轻链CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列为：
[0011]CDR1：QDVNTA，如SEQ ID NO:4所示；
[0012]CDR2：SASYRYTGV，如SEQ ID NO:5所示；
[0013]CDR3：QQRHVPPRT，如SEQ ID NO:6所示。
[0014]进一步的，所述单克隆抗体选自包含有重链CDR区和轻链CDR区的片段、包含有重链可变区和轻链可变区的片段、或具有全长重链和轻链的完整抗体分子。
[0015]进一步的，所述单克隆抗体中，其重链包含4个FR区，其轻链包含4个FR区；所述重链的4个FR区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示；
[0016]EVKLVESGTVLARPGASVKMSCKAS(SEQ ID NO:7)；
[0017]LHWVKQRPGQGLEWIGA(SEQ ID NO:8)；
[0018]SYSQKFKGKAKLTAVTSTSTAYMDLSSLTNDDSAVYYC(SEQ ID NO:9)；
[0019]WGQGTSVTVSSA(SEQ ID NO:10)。
[0020]所述轻链的4个FR区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示。
[0021]DIVMTQAHKFMSTSVGDRVSFTCKAS(SEQ ID NO:11)；
[0022]AWYQQKPGQSPKLLIY(SEQ ID NO:12)；
[0023]PDRFTGSGSGTDFTFTITSVQAEDLAVYYC(SEQ ID NO:13)；
[0024]FGGGTKVEIKRA(SEQ ID NO:14)。
[0025]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述的重链可变区(VH)的氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示。
[0026]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述的轻链可变区(VL)的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。
[0027]VH：
[0028]EVKLVESGTVLARPGASVKMSCKASGYTFTSYWLHWVKQRPGQGLEWIGAIYPGNNNTSYSQKFKGKAKLTAVTSTSTAYMDLSSLTNDDSAVYYCSRGDYGSSYALDYWGQGTSVTVSSA(SEQ ID NO:15)
[0029]VL：
[0030]DIVMTQAHKFMSTSVGDRVSFTCKASQDVNTAIAWYQQKPGQSPKLLIYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTFTITSVQAEDLAVYYCQQRHVPPRTFGGGTKVEIKRA(SEQ ID NO:16)
[0031]其中，下划线处为重链CDR区和轻链CDR区。
[0032]本专利技术的第二方面，提供一种多核苷酸，其包含编码上述单克隆抗体的核苷酸。
[0033]进一步的，编码所述单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:17所示，编码所述单克隆抗体轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示。
[0034]编码重链可变区的核苷酸序列：
[0035]VH:GAGGTGAAGCTGGTGGAGTCTGGGACTGTGCTGGCAAGGCCTGGGGCTTCA GTGAAGATGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTTACCAGCTACTGGTTGCACTGGGTAAAACAGAGGCCTGGACAGGGTCTGGAATGGATTGGCGCTATTTATCCTGGAAATAATAATACTAGTTACAGCCAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCAAACTGACTGCAGTCACATCCACCAGTACTGCCTACATGGACCTCAGCAGCCTGACAAATGATGACTCTGCGGTCTATTACTGTTCAAGAGGGGACTACGGTAGTAGTTATGCTCTGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGT CTCCTCAGCC(SEQ ID NO:17)
[0036]编码轻链可变区的核苷酸序列：
[0037]VL:GATATTGTGATGACGCAGGCTCACAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAG GGTCAGCTTCACCTGCAAGGCCAGTCAGGATGTGAATACTGCTATAGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGACAATCTCCTAAACTACTGATTTACTCGGCATCCTACCGCTACACTGGAGTACCTGATCGCTTCACTGGCAGTGGATCTGGGACGGATTTCACTTTCACCATCACCAGTGTGCAGGCTGAAGACCTGGCAGTGTATTACTGTCAGCAACGTCATGTTCCTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGGTGGAAATCAAACGGGCT(SEQ ID NO:18)
[0038]进一步的，扩增重链可变区的上下游引物序列分别如SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示；扩增轻链可变区的上下游引物序列分别如SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示。
[0039]本专利技术的第三方面，提供一种重组表达载体，其包含上述多核苷酸。
[0040]本专利技术的第四方面，提供一种用上述重组表达载体转化的宿主细胞。
[0041]本专利技术的第五方面，提供上述单克隆抗体在制备治疗艰难梭菌感染的药物中的应用。
[0042]进一步的，所述的药物以所述的单克隆抗体为活性成分。
[0043]本专利技术的第六方面，提供一种治疗艰难梭菌感染的药物，其包括所述的单克隆抗体。
[0044]本专利技术的第七方面，提供上述单克隆抗体在制备艰难梭菌检测试剂或检测试剂盒中的应用。
[0045]进一步的，所述检测试剂中包括经生物标记或化学标记的上述单克隆抗体；
[0046]所述检测试剂盒中包括上述单克隆抗体经生物标记或化学标记得到的标记复合物。
[0047]本专利技术的第八方面，提供一种艰难梭菌检测试剂盒，所述的检测试剂盒包括上述单克隆抗体经生物标记或化学标记得到的标记复合物。
[0048]本专利技术的第九方面，提供上述单克隆抗体的制备方法，包括本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗艰难梭菌毒素B的单克隆抗体，其特征在于，其重链CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列为：CDR1：GYTFTSYW，如SEQ ID NO:1所示；CDR2：IYPGNNNT，如SEQ ID NO:2所示；CDR3：SRGDYGSSYALDY，如SEQ ID NO:3所示；轻链CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列为：CDR1：QDVNTA，如SEQ ID NO:4所示；CDR2：SASYRYTGV，如SEQ ID NO:5所示；CDR3：QQRHVPPRT，如SEQ ID NO:6所示。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体选自包含有重链CDR区和轻链CDR区的片段、包含有重链可变区和轻链可变区的片段、或具有全长重链和轻链的完整抗体分子。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建锋，杨处，陈继军，毛晓燕，张超，熊颖，叶星，
申请(专利权)人：兰州生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：