一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法技术

本发明专利技术公开了一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法，以切取组培苗鳞片分化培养基上暗培养２天作为受体材料；将供体菌株接种到加有卡那霉素、链霉素和利福平的ＬＢ液体培养基上培养，收集菌液，离心，倒去上清，沉淀用液体ＭＳ溶解并稀释至浓度ＯＤ６００为０．４～０．６加入液体ＭＳ中，放入受体材料进行侵染，把侵染过的鳞片放到滤纸上吸干，接种到含有２０ｍｇ／ＬＡＳ和２００ｍｇ／Ｌ头孢霉素的分化培养基上暗培养３ｄ，而后接种到含有２ｍｇ／Ｌ代表潮霉素的分化培养基上，２６℃暗培养直至长出抗性芽；将抗性芽行进一步的筛选培养，待生长至４～５片叶子时，进行生根培养，而后进行移栽。为培育优良水稻品种开辟了新的途径。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法，其特征在于，包括如下步骤：　　１）切取组培苗鳞片在分化培养基上暗培养２天作为受体材料；　　２）将供体菌株接种到加有卡那霉素、链霉素和利福平的ＬＢ液体培养基上培养，收集菌液，离心，倒去上清，沉淀用液体ＭＳ溶解并稀释至浓度ＯＤ６００为０．４～０．６；　　３）将步骤２）制备的菌液加入液体ＭＳ中，放入受体材料进行侵染，把侵染过的鳞片放到滤纸上吸干，接种到含有２０ｍｇ／Ｌ　ＡＳ和２００ｍｇ／Ｌ头孢霉素的分化培养基上暗培养３ｄ，而后接种到含有２ｍｇ／Ｌ代表潮霉素的分化培养基上，２６℃暗培养直至长出抗性芽；　　４）将抗性芽移植到继代培养基上进行进一步的筛选培养，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马锋旺，师守国，冯凤娟，李永红，李善菊，梁东，王爱莲，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：61[中国|陕西]