分泌抗罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种分泌抗罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法和应用，涉及鱼类免疫学领域。所述杂交瘤细胞株的制备方法，包括如下步骤：采用包含有罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白基因的逆转录病毒对细胞进行感染；将感染后的细胞作为抗原进行动物免疫；动物免疫后进行细胞融合，对融合细胞筛选和克隆，以获得所述杂交瘤细胞株。采用本发明专利技术制备方法制备得到的杂交瘤细胞株2C4G3、2B7F11、1C3G6、1D2E6或3C4H8，成功制备抗尼罗罗非鱼TCRα、TCRβ、CD4

【技术实现步骤摘要】
分泌抗罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及鱼类免疫学领域，具体涉及一种分泌抗罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]作为适应性免疫应答中关键的效应细胞，T细胞是一类具有膜抗原结合受体(TCR)，并识别抗原递程细胞(APC)表面MHCI和MHCII类分子递呈的抗原肽、介导细胞免疫防御的一类淋巴细胞，在免疫反应、平衡状态和记忆的建立和维持中发挥着十分重要的作用。最初T细胞的发育是在胸腺中开始的。淋巴样祖细胞在胸腺微环境的刺激下首先开始重排TCR基因，分别产生由α和β链组装的αβT细胞以及由γ和δ链组装的γδT细胞。γδT细胞形成后离开胸腺进入外周环境中，而αβT细胞即前T细胞在IL
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7等细胞因子的诱导下开始表达CD4和CD8，进入双阳性(DP)细胞阶段。DP细胞经历阳性选择(自身MHC限制性)后进一步分化为CD4或CD8单阳性(SP)细胞。CD4单阳性T细胞和CD8单阳性T细胞经历阴性选择(自身免疫耐受)后成为成熟T本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分泌抗罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：采用包含有罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白基因的逆转录病毒对细胞进行感染；将感染后的细胞作为抗原进行动物免疫；动物免疫后进行细胞融合，对融合细胞筛选和克隆，以获得所述杂交瘤细胞株。2.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于：所述逆转录病毒复制时采用BOSC细胞传代培养；所述逆转录病毒感染的细胞为NIH/3T3细胞。3.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于：所述罗非鱼T淋巴细胞表面膜蛋白选自TCRα、TCRβ、CD4
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1、CD4
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2和CD8α中的任意一种。4.根据权利要求3所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于：当膜蛋白选自TCRα时，获得杂交瘤细胞株2C4G3；当膜蛋白选自TCRβ时，获得杂交瘤细胞株2B7F11；当膜蛋白选自CD4
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1时，获得杂交瘤细胞株1C3G6；当膜蛋白选自CD4
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2时，获得杂交瘤细胞株1D2E6；当膜蛋白选自CD8α时，获得杂交瘤细胞株3C4H8。5.如权利要求4所述的杂交瘤细胞株的制备方法制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦秀梅，李康，杨嘉龙，焦新迎，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：