一种超氧化物歧化酶测定试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及体外检测技术领域，且公开了一种超氧化物歧化酶测定试剂盒，本发明专利技术提供的超氧化物歧化酶测定试剂盒，在碱性条件下，邻苯三酚发生自氧化显色反应，同时生成超氧阴离子自由基(O2‑

【技术实现步骤摘要】
一种超氧化物歧化酶测定试剂盒


[0001]本专利技术涉及体外检测
，具体为一种超氧化物歧化酶测定试剂盒。

技术介绍

[0002]超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在与人体的器官组织中，可以清除人体内的O2‑
自由基，从而起到抗氧化抗衰老、预防动脉粥样硬化，预防高血脂、等作用，因此检测超氧化物歧化酶指标，可以有效诊断人体代谢水平和健康状况，对预防糖尿病、心血管疾病等疾病有很好的效果。
[0003]目前超氧化物歧化酶检测方法主要是邻苯三酚底物法，如申请号为202210043148.8的专利《一种超氧化物歧化酶检测试剂盒》，公开了一种精浆超氧化物歧化酶检测试剂盒，具有基质效应小、需要试剂量和样本量少、结果的准确度和精密度高的优点，同时可与精浆生化的其他项目联检。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种高精密度的超氧化物歧化酶测定试剂盒。
[0006](二)技术方案
[0007]一种超氧化物歧化酶测定试剂盒，包括试剂1、试剂2、校准品。试剂1包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液；试剂2包括邻苯三酚、螯合剂；校准品包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、防腐剂、超氧化物歧化酶。
[0008]优选的，所述试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为30
‑
70mmol/L。
[0009]优选的，所述试剂2中邻苯三酚的浓度为45
‑
80mmol/L。
[0010]优选的，所述试剂1和试剂2的体积比为(180
‑
300):(50
‑
100)。
[0011]优选的，所述试剂2中螯合剂包括乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸钠、N,N'
‑
1,2
‑
亚乙基双[N
‑
(2,3
‑
二羟基苯甲基)]甘氨酸或柠檬酸。
[0012]优选的，所述试剂2中螯合剂的浓度为0.6
‑
1.3mmol/L。
[0013]优选的，所述校准品中防腐剂包括液态生物防腐剂、叠氮化钠或硫柳汞。
[0014]优选的，试剂盒使用方法的条件为：主波长420nm，副波长700nm，反应温度37℃，样品体积为10
‑
20uL，试剂1体积为180
‑
300uL，37℃孵育5min，读取吸光度A1；试剂2体积为50
‑
100uL，37℃孵育5min，读取吸光度A2，计算
△
A＝A2
‑
A1。
[0015](三)有益的技术效果
[0016]本专利技术提供的超氧化物歧化酶测定试剂盒，在碱性条件下，邻苯三酚发生自氧化显色反应，同时生成超氧阴离子自由基(O2‑
)。样本中超氧化物歧化酶SOD可以抑制O2‑
的歧化反应，从而抑制了邻苯三酚的自氧化反应。样本中SOD的活性与反应体系的显色反应强度呈正相关，具有精密度高、测试所需的试剂量和样本量少，适用于体外定量测定人血清中超
氧化物歧化酶SOD的活性，在糖尿病、肾脏疾病、心血管疾病、脑血管疾病、肺部疾病和自身免疫性疾病的检测和诊断中有着广阔的应用前景。
具体实施方式
[0017]实施例1
[0018]超氧化物歧化酶测定试剂盒，包括试剂1、试剂2、校准品。试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为30mmol/L；试剂2中邻苯三酚的浓度为45mmol/L、螯合剂乙二胺四乙酸，螯合剂的浓度为0.6mmol/L；校准品包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、防腐剂液态生物防腐剂、超氧化物歧化酶。
[0019]试剂盒使用方法的条件为：主波长420nm，副波长700nm，反应温度37℃，样品体积为10uL，试剂1体积为180uL，37℃孵育5min，读取吸光度A1；试剂2体积为50uL，37℃孵育5min，读取吸光度A2，计算
△
A＝A2
‑
A1。SOD浓度(U/mL)＝(
△
A
测定
‑△
A
空白
)
÷
(
△
A
校准
‑△
A
空白
)
×
C
校准
。
[0020]实施例2
[0021]超氧化物歧化酶测定试剂盒，包括试剂1、试剂2、校准品。试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为40mmol/L；试剂2中邻苯三酚的浓度为50mmol/L、螯合剂N,N'
‑
1,2
‑
亚乙基双[N
‑
(2,3
‑
二羟基苯甲基)]甘氨酸，螯合剂的浓度为0.8mmol/L；校准品包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、防腐剂液态生物防腐剂、超氧化物歧化酶。
[0022]试剂盒使用方法的条件为：主波长420nm，副波长700nm，反应温度37℃，样品体积为15uL，试剂1体积为200uL，37℃孵育5min，读取吸光度A1；试剂2体积为70uL，37℃孵育5min，读取吸光度A2，计算
△
A＝A2
‑
A1。SOD浓度(U/mL)＝(
△
A
测定
‑△
A
空白
)
÷
(
△
A
校准
‑△
A
空白
)
×
C
校准
。
[0023]实施例3
[0024]超氧化物歧化酶测定试剂盒，包括试剂1、试剂2、校准品。试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为50mmol/L；试剂2中邻苯三酚的浓度为60mmol/L、螯合剂乙二胺四乙酸钠，螯合剂的浓度为1mmol/L；校准品包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、防腐剂硫柳汞、超氧化物歧化酶。
[0025]试剂盒使用方法的条件为：主波长420nm，副波长700nm，反应温度37℃，样品体积为15uL，试剂1体积为250uL，37℃孵育5min，读取吸光度A1；试剂2体积为80uL，37℃孵育5min，读取吸光度A2，计算
△
A＝A2
‑
A1。SOD浓度(U/mL)＝(
△
A
测定
‑△
A
空白
)
÷
(
△
A
校准
‑△
A
空白
)
×
C
校准
。
[0026]实施例4
[0027]超氧化物歧化酶测定试剂盒，包括试剂1、试剂2、校准品。试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为55mmol/L；试剂2中邻苯三酚的浓度为70mmol/L、螯合剂N,N'
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超氧化物歧化酶测定试剂盒，其特征在于：所述超氧化物歧化酶测定试剂盒包括试剂1、试剂2、校准品；试剂1包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液；试剂2包括邻苯三酚、螯合剂；校准品包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、防腐剂、超氧化物歧化酶。2.根据权利要求1所述的超氧化物歧化酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂1中三羟甲基氨基甲烷缓冲液的浓度为30
‑
70mmol/L。3.根据权利要求1所述的超氧化物歧化酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂2中邻苯三酚的浓度为45
‑
80mmol/L。4.根据权利要求1所述的超氧化物歧化酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂1和试剂2的体积比为(180
‑
300):(50
‑
100)。5.根据权利要求1所述的超氧化物歧化酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂2中螯合剂包括乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸钠、N,N'
‑
1,2
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：黄钦，吕伟军，沈燕文，杨春超，俞嫒嫒，
申请(专利权)人：绍兴圣康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：