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盐芥V-焦磷酸酶基因启动子序列和其缺失突变体的应用制造技术

技术编号:3778626 阅读:444 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开一种盐芥V-焦磷酸酶基因(TsVP1)启动子序列和其缺失突变体的应用,是从盐生植物盐芥的基因组文库中筛选出携带TsVP1启动子的克隆,截取TsVP1编码框5′上游的2200核甘酸序列为全长启动子,通过PCR扩增获得不同长度的启动子片段,然后分别与gus基因融合,重组到植物表达载体中转化拟南芥。检测转基因植株的GUS酶活性,确定了TsVP1启动子和其部分缺失突变体是盐胁迫诱导型启动子。其中T5启动子不仅序列短(667bp),而且具有根特异性。将TsVP1启动子和T5启动子分别与来自大肠杆菌的betA基因相连,转入烟草和玉米,确定了TsVP1启动子和T5启动子在转基因烟草和玉米中能正常行使功能,是盐胁迫诱导型的强启动子,并在植物基因工程的产业化开发中有重要应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
盐芥V-焦磷酸酶基因(TsVP1)启动子序列和其缺失突变体的应用,其特征是,从盐生植物盐芥的基因组文库中筛选出携带TsVP1启动子的克隆,截取TsVP1开放读码框5′上游的2200核苷酸序列作为全长启动子序列,以此为模板通过PCR扩增获得不同长度的启动子片段T2~T7,分别将其与报告基因融合后转入拟南芥,确定了TsVP1启动子和其部分系列缺失突变体是盐胁迫诱导型启动子,其中T5启动子具有较强的根特异性;TsVP1启动子和T5启动子分别与来自大肠杆菌的betA基因相连转入烟草和玉米,确定了它们在转基因烟草和玉米中能正常行使启动功能,是盐胁迫诱导型的强启动子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张举仁孙清华李坤朋高强高峰
申请(专利权)人:山东大学
类型:发明
国别省市:88[]

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