一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，将大肠杆菌DH5

【技术实现步骤摘要】
一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法


[0001]本专利技术属于纳米生物医药
，具体涉及一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法。

技术介绍

[0002]细菌现如今在基因工程领域与仿生递送平台都有着突出贡献。不论是通过利用细菌作为基因改造的平台还是通过利用细菌特性作为仿生递送药物的方式，细菌在生物医药领域都有着不可忽视的作用。因此，如何将细菌进行转化，通过电转的方法使其可以稳定表达荧光性是本方案所要解决的技术问题。

技术实现思路

[0003]本专利技术目的是提供一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法。
[0004]本专利技术的技术方案是：
[0005]一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，该方法包括：
[0006](1)将冻存的大肠杆菌接种于LB培养基中，过夜培养，离心，获得细菌沉淀；
[0007](2)用蒸馏水将所述细菌沉淀重悬，进行离心，用甘油将所述细菌沉淀重悬，并离心两次，用甘油重悬，分装于预冷的EP管中；
[0008](3)在每管所述EP管中加入质粒，轻轻混匀，冰上放置，再本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，其特征在于，该方法包括：(1)将冻存的大肠杆菌接种于LB培养基中，过夜培养，离心，获得细菌沉淀；(2)用蒸馏水将所述细菌沉淀重悬，进行离心，用甘油将所述细菌沉淀重悬，并离心两次，用甘油重悬，分装于预冷的EP管中；(3)在每管所述EP管中加入质粒，轻轻混匀，冰上放置，再转移至电转杯中，进行电转；(4)电转后，将已预热的SOC培养基放于电击杯中，将转化后的细菌进行培养；(5)离心，留取沉淀，用SOC培养基进行重悬，取适量细菌涂板于已加入抗生素的平板上，进行培养；(6)将所述细菌进行单克隆挑选，将挑选出的细菌进行培养贮存，获得用于荧光成像转化大肠杆菌。2.根据权利要求1所述的一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述过夜培养为在气浴回旋式恒温振荡器中培养，转速为180
‑
220rpm，培养时间为18
‑
20h，最终使细菌OD达到0.5
‑
0.6。3.根据权利要求1所述的一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述离心的速度为4000rpm，时间为15min，温度为4℃。4.根据权利要求2所述的一种用于荧光成像转化大肠杆菌的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，分装于预冷的EP管中的细菌的浓度为2.5
×
10
10
CFU/ml，每管分装80微升细菌，在步骤(3)中每管所述EP管中加入质粒的重量为10ng。5.根据权利要求2所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩亮，周梦圆，缪彤彤，陈海燕，林圆圆，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：