神经酰胺类化合物在抗氧化应激中的应用制造技术

本发明专利技术提供了神经酰胺类化合物在制备抗氧化应激药物中的应用，神经酰胺类化合物提取自海红米皮糠，用于减轻氧化应激造成的毒性效应和细胞损伤。本发明专利技术通过试验发现，神经酰胺类化合物能够延长秀丽隐杆线虫的平均寿命，能够提高秀丽隐杆线虫体内SOD、CAT和GSH的活性，降低MDA的含量，并能降低秀丽隐杆线虫体内ROS的水平。本发明专利技术提取的神经酰胺类化合物能够降低氧化应激造成的毒性效应和细胞损伤，增强秀丽隐杆线虫抗氧化能力。丽隐杆线虫抗氧化能力。丽隐杆线虫抗氧化能力。

【技术实现步骤摘要】
神经酰胺类化合物在抗氧化应激中的应用


[0001]本专利技术属于海洋生物应用
，涉及海水稻提取物的生物功能应用，具体涉及海红米皮糠中神经酰胺类化合物在抗氧化应激中的应用。

技术介绍

[0002]海红米是一种生长在沿海地区的新型耐盐水稻，含有高水平的矿物质、蛋白质和脂质化合物。尤其特别的是，海红米皮糠中含有比普通水稻皮糠更为丰富的神经酰胺类化合物（Ceramides, Cers）。
[0003]神经酰胺类化合物被认为是脂质第二信使，在细胞增殖、分化和凋亡等各种信息传递过程中发挥重要作用。目前，神经酰胺类化合物作为第二信使在细胞凋亡中的作用机理研究相对深入。研究发现，神经酰胺类化合物主要通过激活促凋亡蛋白Bcl
‑
2和其他相关蛋白的特异性下游靶向参与细胞内线粒体的凋亡过程，以近端促进线粒体细胞色素C和外膜通透性的改变。在哺乳动物细胞和动物模型中，神经酰胺类化合物还可以激活几种产生活性氧（ROS）的酶，如NADPH氧化酶、解偶联eNOS和黄嘌呤氧化酶等。
[0004]秀丽隐杆线虫(C.elegans)是一种公认的体内模式生物，与哺乳动物具有高度的遗传同源性，并且对环境胁迫敏感。在正常条件下，可以使用各种应激刺激（如辐射、毒素和紫外线）诱导秀丽隐杆线虫细胞凋亡和损伤。秀丽隐杆线虫突变体可以作为体内实验模型，用于研究细胞凋亡和炎症因子的信号转导机制。
[0005]秀丽隐杆线虫(C.elegans)是一种公认的体内模式生物，与哺乳动物具有高度的遗传同源性，并且对环境胁迫敏感。在正常条件下，可以使用各种应激刺激（如辐射、毒素和紫外线）诱导秀丽隐杆线虫细胞凋亡和损伤。秀丽隐杆线虫突变体可以作为体内实验模型，用于研究细胞凋亡和炎症因子的信号转导机制。

技术实现思路

[0006]本申请专利技术人研究发现，神经酰胺类化合物具有在不同极端环境下缓解秀丽隐杆线虫氧化应激的作用。
[0007]本申请对研究神经酰胺类化合物的抗氧化应激的应用提供了思路，对提高生物体抗氧化和抗衰老具有实质性参考意义。
[0008]本专利技术的目的在于研究海红米皮糠中神经酰胺类化合物抗氧化应激的功能，为神经酰胺类化合物的应用提供新的思路，为提高生物体抗氧化和抗衰老能力提供新的材料和参考。
[0009]为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：神经酰胺类化合物在制备抗氧化应激药物中的应用，所述神经酰胺类化合物提取自海红米皮糠，用于减轻氧化应激造成的毒性效应和细胞损伤。
[0010]本申请专利技术人通过试验证明，本申请所述神经酰胺类化合物能够延长秀丽隐杆线虫的平均寿命，能够提高秀丽隐杆线虫体内SOD、CAT和GSH的活性，降低MDA的含量，并且，能
降低秀丽隐杆线虫体内ROS的水平。基于秀丽隐杆线虫与哺乳动物的高度遗传同源性及其优质的体内试验模型的经验，本专利技术所要求保护的应用能够通过本专利技术的具体实施例及结果得到支持。
[0011]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果或者优点：本专利技术所述的海红米皮糠中神经酰胺类化合物，可以有效延长秀丽隐杆线虫的寿命。
[0012]本专利技术所述的海红米皮糠中神经酰胺类化合物，有效地缓解了秀丽隐杆线虫的氧化应激，改善秀丽隐杆线虫氧化应激的损伤，使得秀丽隐杆线虫的抗氧化酶活性（SOD、CAT、GSH）出现显著提升，而代谢产物（MDA）出现显著下降，其体内的ROS水平也出现了显著的下降。
[0013]本专利技术为神经酰胺类化合物的应用提供了新的思路，为提高生物体抗氧化和抗衰老能力提供了新的材料和参考。
附图说明
[0014]图1为应激条件为30%过氧化氢溶液下秀丽隐杆线虫摄入不同浓度神经酰胺类化合物寿命分布图。空白组表示浓度为0的神经酰胺类化合物，即对照组，0.10 mg/mL、0.25 mg/mL和0.50 mg/mL分别表示对应浓度的神经酰胺类化合物。
[0015]图2为应激条件为5mM百草枯下秀丽隐杆线虫摄入不同浓度神经酰胺类化合物寿命分布图。空白组表示浓度为0的神经酰胺类化合物，即对照组，0.10 mg/mL、0.25 mg/mL和0.50 mg/mL分别表示对应浓度的神经酰胺类化合物。
[0016]图3为神经酰胺类化合物对秀丽隐杆线虫SOD活性的影响。空白组表示浓度为0，即对照组，0.10、0.25和0.50分别表示神经酰胺类化合物浓度（mg/mL）。
[0017]图4为神经酰胺类化合物对秀丽隐杆线虫CAT活性的影响。空白组表示浓度为0，即对照组，0.10、0.25和0.50分别表示神经酰胺类化合物浓度（mg/mL）。
[0018]图5为神经酰胺类化合物对秀丽隐杆线虫GSH活性的影响。空白组表示浓度为0，即对照组，0.10、0.25和0.50分别表示神经酰胺类化合物浓度（mg/mL）。
[0019]图6为神经酰胺类化合物对秀丽隐杆线虫MDA活性的影响。空白组表示浓度为0，即对照组，0.10、0.25和0.50分别表示神经酰胺类化合物浓度（mg/mL）。
[0020]图7为不同浓度神经酰胺类化合物对秀丽隐杆线虫体内ROS形成的影响。空白组表示浓度为0，即对照组，0.10、0.25和0.50分别表示对应浓度的神经酰胺类化合物（mg/mL），纵坐标表示ROS的相对含量（%）。
具体实施方式
[0021]下面，结合实施例对本专利技术的技术方案进行说明，但是，本专利技术并不限于下述的实施例。
[0022]下述各实施例中实验方法和检测方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述药剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到，所用试剂均为分析纯；所述指标数据，如无特殊说明，均为常规测量方法。
实施例1
[0023]本实施例所述海红米皮糠中神经酰胺类化合物的提取方法，参考本专利专利技术人已提交的专利技术申请CN114807258A。
[0024]本实施例所述海红米皮糠原料产自广东湛江，购于湖北巨胜科技有限公司。
[0025]将干燥的海红米皮糠原料除杂，粉碎，过筛，得20~40目的皮糠原料粉。取海红米皮糠粉100g，加入300mL制剂的酶解液（以酶活力单位计，鞘磷脂酶和纤维素酶的配比为4:6，浓度为0.2w/v%）中，在35℃下，pH调至5，酶解60min，过滤，得酶解皮糠（含水）。取1g酶解皮糠（含水），加入500mL 75%乙醇溶液，搅拌20分钟后静置浸泡1h，然后封口并将其放入超声波清洗机中，开启程序，超声功率选择为360w，加热温度为45℃，提取时间为1h。提取完毕，过滤，将神经酰胺的乙醇提取液转移至旋转蒸发器中进行浓缩，至乙醇浓度为10%，将浓缩液转移至干净的三口平底烧瓶中，按浓缩液体积加入2倍量的石油醚，搅拌0.5h，转移至分液漏斗中静置0.5h，分层后收集上层的醚相萃取2次。合并醚相，回收石油醚浓缩至浸膏，得棕色的神经酰胺样品I，重量为16.4g。
[0026]硅胶层析纯化，上样量为1g粗品（神经酰胺样品I）配合100g硅胶（购于上海坪尧贸易有限公司）。称取300目本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.神经酰胺类化合物在制备抗氧化应激药物中的应用，所述神经酰胺类化合物提取自海红米皮糠，用于减轻氧化应激造成的毒性效应和细胞损伤。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述神经酰胺类化合物能够提高动物体内SOD的活性。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述神经酰胺类化合物能够提高动物体内C...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟赛意，王刚，宋兵兵，汪卓，刘寿春，陈建平，张杰良，李瑞，刘晓菲，贾学静，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：