检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针及制备方法技术

本发明专利技术公开了检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针及制备方法，具体为：在氩气氛下，将(E)

【技术实现步骤摘要】
检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针及制备方法


[0001]本专利技术属于分析检测
，具体涉及检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，还涉及该近红外荧光探针的制备方法。

技术介绍

[0002]过氧亚硝酸盐(ONOO
‑
)是重要的活性氧(ROS)之一，内源性ONOO
‑
通常是由一氧化氮(NO)和超氧阴离子自由基(O2·
)在扩散下制得的，ONOO
‑
无需酶催化便可参与生命系统中的一系列生物过程，可增强免疫系统防御能力。然而，过量ONOO
‑
可导致细胞中的某些酶、蛋白质和DNA受损，最终导致细胞凋亡，进而造成机体损伤。异常的ONOO
‑
表达也被证明与神经退行性疾病、炎症、心血管疾病和癌症相关。因此，使用简单、方便，高效的检测方式识别ONOO
‑
具有重要的意义。
[0003]荧光探针因其具有便携、检测方式简单、高灵敏度和高选择性等优点成为探索生理和医学诊断中的重要化学工具。近年来，研究者们已经开发了许多应用于检测ONOO
‑
的荧光探针，然而其中多数存在检测过程中响应欠佳、背景噪声大、选择性弱等问题，会导致结果的不准确性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，对ONOO
‑
识别具有优异的选择性和抗干扰能力。
[0005]本专利技术另一的目的在于提供上述检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针的制备方法。/>[0006]本专利技术所采用的技术方案是，检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，荧光探针具有如下式(1a)所示结构式：
[0007][0008]本专利技术所采用的另一技术方案是，检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针的制备方法，具体为：
[0009]在氩气氛下，将(E)
‑2‑
(3
‑
甲酰基
‑4‑
羟基苯乙烯基)
‑
5、5
‑
二甲基环己基
‑2‑
烯
‑1‑
亚基丙二腈、4
‑
溴甲基苯硼酸频哪醇酯和K2CO3混合于DMF中，搅拌，通过TCL监测，待反应结束后，水洗，萃取，干燥，柱层析分离纯化，得到的橙色固体即为近红外探针。
[0010]搅拌温度为80℃，搅拌时间为12h。
[0011]干燥时采用无水Mg2SO4干燥。
[0012]萃取时采用CH2Cl2萃取。
[0013]本专利技术的有益效果是,本专利技术的检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，对ONOO
‑
识别具有优异的选择性和抗干扰能力。该探针本身发射橙色荧光，ONOO
‑
激活后其荧光颜色可由橙色变为红色，检测限为97nM。
附图说明
[0014]图1是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针对ONOO
‑
检测的紫外可见光谱图(插图：在室内光线下，探针和添加ONOO
‑
的颜色图)；
[0015]图2是是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针对ONOO
‑
检测的荧光光谱图(插图：365nm紫外灯下，探针和添加ONOO
‑
的荧光颜色图)；
[0016]图3是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针对ONOO
‑
的荧光滴定图；
[0017]图4是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针荧光强度比与ONOO
‑
浓度之间的线性关系图
[0018]图5是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针的选择性实验图；
[0019]图6是在pH＝7.4的DMSO/PBS体系下，近红外荧光探针的抗干扰图；
[0020]图7是近红外荧光探针对ONOO
‑
的响应过程图；
[0021]图8为本专利技术制备的近红外荧光探针的核磁氢谱图；
[0022]图9为本专利技术制备的近红外荧光探针的核磁碳谱图。
具体实施方式
[0023]下面结合具体实施方式和附图对本专利技术进行详细说明。
[0024]本专利技术检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，荧光探针具有如下式(1a)所示结构式：
[0025][0026]结构式的中文名为：(E)
‑2‑
(3
‑
(3
‑
甲酰基
‑4‑
((4
‑
(4,4,5,5
‑
四甲基
‑
1,3,2
‑
二氧杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)丙二腈；
[0027]本专利技术检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针的制备方法，具体为：
[0028]在氩气氛下，将化合物(E)
‑2‑
(3
‑
甲酰基
‑4‑
羟基苯乙烯基)
‑
5、5
‑
二甲基环己基
‑2‑
烯
‑1‑
亚基丙二腈(DCI
‑
1)、4
‑
溴甲基苯硼酸频哪醇酯和K2CO3混合于DMF中，搅拌均匀，在80℃搅拌过夜，通过TCL监测，待反应结束后，水洗，CH2Cl2萃取，无水Mg2SO4干燥，柱层析分离纯化，得到的橙色固体即为近红外探针1a。
[0029]其中，水洗和CH2Cl2萃取，采用蒸馏水洗涤，CH2Cl2分液漏斗中分液，无水Mg2SO4干燥，蒸发除去溶剂得到粗产物。
[0030]柱层析分离纯化，采用CH2Cl2和CH3OH，分离得到橙色产物。
[0031]其反应式如下所示：
[0032][0033]本专利技术的荧光探针1a的设计原理：探针1a中识别基团苯硼酸频哪醇酯与DCI荧光母体之间的ICT效应被阻断，表现为弱荧光，当添加ONOO
‑
后，苯硼酸频哪醇酯在ONOO
‑
的刺激下结构发生变化，苯硼酸频哪醇酯结构脱去，会形成给电子能力更强的羟基结构，分子过渡成为荧光发射能力更强的D
‑
π
‑
A结构，ICT效应恢复，导致强荧光发射增强。
[0034]实施例
[0035]本专利技术检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针1a的制备方法，过程如下：
[0036]将化合物DCI
‑
1(0.5g，1.57mmol)、4
‑
溴甲基苯硼酸频哪醇酯(0.56g，1.88mmol)和K2CO3(0.43g，3.14mmol)混合于20mL的DMF中，在80℃搅拌过夜，通过TCL监测，待反应结束后，水洗，CH2Cl2萃取，无水Mg2SO4干燥，柱层本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针，其特征在于，荧光探针具有如下式(1a)所示结构式：2.如权利要求1所述的检测过氧亚硝酸盐的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，具体为：在氩气氛下，将(E)
‑2‑
(3
‑
甲酰基
‑4‑
羟基苯乙烯基)
‑
5、5
‑
二甲基环己基
‑2‑
烯
‑1‑
亚基丙二腈、4
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：王学川，王虓，韩庆鑫，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：