一种岩陀提取物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种岩陀提取物及其制备方法与应用，属于天然提取物技术领域，本发明专利技术以岩陀的乙醇提取物为原料，将乙醇提取物进一步用乙酸乙酯萃取，获得对猪伪狂犬具有抗病毒作用的岩陀提取物，且具有增强ST细胞预防PRV感染的效果，所得岩陀提取物在25

【技术实现步骤摘要】
一种岩陀提取物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于天然提取物
，具体的说，涉及一种岩陀提取物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]中药材不仅具有抑菌、抗病毒效果，而且具备来源广泛、价格低廉、毒副作用小、药物残留少、无耐药性等特点。随着中国2020年起饲料中全面禁止添加抗生素政策实施，从传统天然药物特别是中草药中找寻找特效抗菌、抗病毒药物是主要研发方向。岩陀为虎耳草科鬼灯檠属植物羽叶鬼灯檠(Rodgersia Pinnata Franch.)或西南鬼灯檠(Rodgersia sambucifolia Hemsl.)的干燥根茎。岩陀及其鬼灯檠属植物喜阴性或半阴性环境，适于在空气相对湿度大的林下、石隙、灌丛、潮湿的岩壁上或山谷溪沟两旁，主要分布在云南、四川、贵州等地区。
[0003]岩陀在中医上具有收敛、消炎、祛风除湿的功效，主要化学成分主要存在于根中，据研究岩陀富含多酚类化合物，其中岩白菜素含量仅次于中药材岩白菜，目前在动物医学中的开发应用较少。
[0004]猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)引起的猪的急性传染病。主要通过已感染猪排毒而传给健康猪，可引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。目前疫苗免疫接种、提高免疫力预防和控制伪狂犬病的主要措施，一旦染病，仍需要抗生素治疗。
[0005]由于抗生素滥用和过量使用，导致兽药残留严重，直接危害人类健康，随着人们生活水平的提高，对肉品质的要求越来越高。国家结合《兽药管理条列》、《饲料和饲料添加剂管理条列》，出台了相应的禁抗、限抗政策，从中药中寻找活性成分，研发替代抗生素兽用产品已成为当前研究热门。

技术实现思路

[0006]为了克服
技术介绍
中存在的问题，本专利技术提供了一种岩陀提取物及其制备方法与应用，从岩陀乙醇提物的乙酸乙酯萃取相获得，所得岩陀提取物对PRV具有抗病毒作用，且在在25
–
0.78μg/mL时对ST细胞没有毒性，可作为治疗或预防猪伪狂犬病的天然药物使用。
[0007]为实现上述目的，本专利技术是通过如下技术方案实现的：
[0008]所述的岩陀提取物及其制备方法包括以下步骤：
[0009](1)将岩陀粉碎过筛；
[0010](2)用乙醇提取岩陀，得到岩陀的乙醇提取物；
[0011](3)将乙醇提取物用乙酸乙酯萃取，获得乙酸乙酯萃取相物。
[0012]进一步的，所得乙酸乙酯萃取相物旋转蒸发浓缩，所得浓缩液低温冷冻干燥获得粉末状岩陀提取物。
[0013]进一步的，步骤(2)所用乙醇为70％乙醇。
[0014]一种岩陀提取物，用上述制备方法获得。
[0015]进一步的，所述的岩陀提取物对猪伪狂犬具有抗病毒活性。
[0016]进一步的，所述的岩陀提取物在预防模式下对ST细胞免受猪伪狂犬病毒感染有明显保护作用。
[0017]所述的岩陀提取物在预防或治疗猪伪狂犬中的应用。
[0018]一种用于预防或治疗猪伪狂犬的药物，含有上述岩陀提取物。
[0019]本专利技术的有益效果：
[0020]岩陀乙醇粗提物的乙酸乙酯相物质具有明显的抗猪伪狂犬病毒作用，且具有增强ST细胞预防PRV感染的效果，为进一步研究和发现活性单体成分提供物质基础。
[0021]本专利技术岩陀乙醇粗提物的乙酸乙酯相物质，具有原料来源广、抗病毒作用显著、使用安全等特点，通过使用该提取物制备兽药，能减少抗生素的使用，减少兽药残留，提升猪肉品质。
附图说明
[0022]图1是本专利技术实施例1不同萃取相得率对比图；
[0023]图2是本专利技术不同岩陀提取物对ST细胞存活率影响对比图；
[0024]图3是本专利技术不同岩陀提取物在预防模式下对ST细胞成活率影响对比；
[0025]图4是本专利技术不同岩陀提取物在治疗模式下对ST细胞成活率影响对比；
[0026]图5是本专利技术不同岩陀提取物在毒杀模式下对ST细胞成活率影响对比；
[0027]图6是正离子模式下采集的总离子图TIC；
[0028]图7是负离子模式下采集的总离子图TIC；
[0029]备注：图2中，***P<0.001；**P<0.01；*P<0.05；
[0030]图3至5中，***P<0.001；**P<0.01；*P<0.05；与病毒组相比###P＜0.001；##P<0.01；#P<0.05；
[0031]图2至5中，A为乙醇提取物，B为乙醇提取物的乙酸乙酯萃取相，C为乙醇提取物的正丁醇萃取相，D为乙醇提取物的水相。
具体实施方式
[0032]为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本专利技术的技术方案进行详细的说明，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例。基于本专利技术的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下多获得的其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0033]实施例1：岩陀乙醇粗提物及制备方法
[0034]岩陀打粉过60目筛，称取50g，加入3000mL 70％乙醇，料液质量比为1：60，超声15min，常温磁力旋转过夜。过滤，旋转蒸发，用蒸馏水置换乙醇，浓缩至一定体积后，使用冷冻干燥机冻干，称重量(W)。
[0035]用相同的方法分别用甲醇和丙酮进行岩陀提取，提取得率＝(W/50)
×
100％，得粗提物备用。
[0036]表1不同溶剂提取得率
[0037]名称提取率(％)70％乙醇提取物33.2甲醇提取物29.80丙酮提取物14.02
[0038]由表1可知，从岩陀提取得率看，70％乙醇提取物＞甲醇提取物＞丙酮提取物。
[0039]岩陀粗提物经纯净水定溶至一定体积后，使用乙酸乙酯同体积萃取3次，每次30min，将3次所得液体合并，得乙酸乙酯萃取溶液。用正丁醇、纯净水用同样方法萃取，得正丁醇萃取溶液和水相溶液。将3种萃取溶液分别旋蒸浓缩至一定体积后，使用冷冻干燥机冻干称重量。计算萃取得率。得岩陀粗提物的乙酸乙酯、正丁醇、纯净水萃取相物备用。
[0040]不同萃取相得率见附图1，正丁醇萃取相＞乙酸乙酯萃取相＞水相。而70％乙醇提取物的水相得率大于乙酸乙酯相得率。
[0041]依据岩陀不同溶剂提取得率和不同萃取相得率总体分析比较，最终选取岩陀乙醇粗提物作为兽药原料候选物有效部位，依次开展抗猪伪狂犬病毒相关试验。
[0042]实例2：岩陀乙醇提取物体外抗PRV试验
[0043]主要溶液配置：
[0044]胎牛血清，胰酶及双抗过滤，分装于
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20℃保存备用。细胞生长完全培养基：90mL DMEM高糖培养液中加入10mL胎牛血清，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种岩陀提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将岩陀粉碎过筛；用乙醇提取岩陀，得到岩陀的乙醇提取物；将乙醇提取物用乙酸乙酯萃取，获得乙酸乙酯萃取相物。2.根据权利要求1所述的一种岩陀提取物的制备方法，其特征在于：所得乙酸乙酯萃取相物旋转蒸发浓缩，所得浓缩液经低温冷冻干燥获得粉末状岩陀提取物。3.根据权利要求1或2所述的一种岩陀提取物的制备方法，其特征在于：步骤（2）所用乙醇为70%乙醇。4.一种岩陀提取物，其特征在于，如权利要求1至3人一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋春莲，舒相华，张莹，高利波，王余磊，
申请(专利权)人：昆明伟牧得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：