用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法技术

本发明专利技术提出一种用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，该方法包括：对癌组织样本和癌旁组织样本进行前处理；将组织块转移至孔板内，并进行分组；每隔第二预设时间根据放射时间和预设剂量率对每组组织块进行照射；检测各组的吸光光度值，并计算得到癌组织的抑制率和癌旁组织的活性值。进而预测出每一放射剂量下所对应的放射敏感性。本发明专利技术提出的用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，快速、精确地预测组织的放射敏感性，有利于为临床常规实施提供有力的依据。于为临床常规实施提供有力的依据。于为临床常规实施提供有力的依据。

【技术实现步骤摘要】
用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法


[0001]本专利技术涉及肿瘤细胞放射敏感性检测
，特别涉及一种用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法。

技术介绍

[0002]肿瘤放射治疗是利用放射线治疗肿瘤的一种局部治疗方法。放射线包括放射性同位素产生的α、β、γ射线和各类x射线治疗机或加速器产生的x射线、电子线、质子束及其他粒子束等。放射疗法的成功主要依赖于总施用剂量，由于在组织对电离放射损伤的敏感性上个体差异很大。每年在世界范围内，常常出现接受放射疗法的患者由于高度敏感显示不良反应。
[0003]也就是说，决定放疗效果的主要因素是组织的放疗敏感性。不同组织、器官和不同类型的癌组织在接受放射后的反应具有明显的差异。一般认为，放射敏感性与肿瘤细胞的增殖周期和病理分级有关。表现为增殖活跃的细胞比不增殖的细胞敏感，细胞分化程度越高放射敏感性越低，反之愈高。氧含量是影响癌组织放疗敏感性的一个非常重要的环境因素。比如，早期肿瘤体积小，拥有良好的血运，氧含量充足，放疗敏感性高；而晚期肿瘤，由于体积大，瘤内血运差，甚至中心有坏死，则放射敏感性低。放射剂量也是决定放疗敏感性的重要变量。放射剂量越高，放疗敏感性也相应提高。
[0004]然而，高剂量的射线照射对正常组织也会带来更严重的损伤，因此理论上不能无限制提高放射剂量。另外，患者的身体素质和生理条件也会影响放疗敏感性。患者正常组织对治疗的敏感度相差很大，而放疗的副作用通常比较严重，若能在放射治疗前，预测患者对放射的敏感性，那么就可以获取到放射疗效较高同时对正常组织损伤较低的放射剂量，因此，亟需一种能够实现快速测试放疗敏感性结果的方案。

技术实现思路

[0005]基于此，本专利技术的目的是为了提出一种用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，以快速、精确地预测组织的放射敏感性，有利于为临床常规实施提供有力的依据。
[0006]根据本专利技术提出的一种用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，在肿瘤患者进行放射治疗前，所述方法包括：
[0007]获取肿瘤患者编号，根据所述肿瘤患者编号获取分别预存在组织保存液中的癌组织样本和癌旁组织样本，并将所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行样本前处理，得到若干第一预设尺寸的癌组织块和癌旁组织块；
[0008]将所述癌组织块和所述癌旁组织块转移至若干孔板内，每个孔板的每个孔至多接种一个组织块，根据所述癌组织块或所述癌旁组织块的数量将孔板中的组织块划分成若干组，并根据预设放射剂量峰值和划分的组数计算并标记每组组织块分别对应的放射剂量，分组结果包括空白组、对照组以及实验组；
[0009]根据每组组织块分别对应的放射剂量和预设剂量率计算得到每组组织块分别对应的放射时间，将孔板放置在放射仪器的照射区域内，并每隔第二预设时间根据放射时间和预设剂量率控制所述放射仪器对每组组织块进行第一预设次数的照射；
[0010]分别检测完成照射后的空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值，并根据空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值计算得到每一放射剂量下所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值，以根据所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值预测所述肿瘤患者在每一放射剂量下分别对应的敏感性。
[0011]进一步地，所述将所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行样本前处理，得到若干第一预设尺寸的癌组织块和癌旁组织块的步骤包括：
[0012]采用组织培养基分别对所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行冲洗2
‑
4次，每次持续0.5
‑
2min；
[0013]将冲洗后的癌组织样本和癌旁组织样本中坏死或形态不佳的区域进行剔除，并在碘伏消毒液中浸泡10
‑
60s后，将所述癌组织样本和所述癌旁组织均分割成第一预设尺寸的微组织块。
[0014]进一步地，所述在将所述癌组织块和所述癌旁组织块转移至若干孔板内，每个孔板的每个孔至多接种一个组织块，根据所述癌组织块或所述癌旁组织块的数量将孔板中的组织块划分成若干组，并根据预设放射剂量峰值和划分的组数计算并标记每组组织块分别对应的放射剂量的步骤包括：
[0015]根据其中一种组织样本分出的微组织块的数量和孔板的规格计算得到每种组织样本的孔行数或孔列数，以根据所述孔行数或所述孔列数将组织块划分成若干类，每类包括空白组、对照组以及实验组各一组，其中：
[0016]同类中的对照组和实验组所划分的孔均接种有相同类型的组织块，每组空白组所划分的孔均未接种有组织块，同类中的空白组和实验组标记有相等的放射剂量，每组对照组所对应的放射剂量均为零。
[0017]进一步地，所述根据每组组织块分别对应的放射剂量和预设剂量率计算得到每组组织块分别对应的放射时间，将孔板放置在放射仪器的照射区域内，并每隔第二预设时间根据放射时间和预设剂量率控制所述放射仪器对每组组织块进行第一预设次数的照射的步骤包括：
[0018]分组完成后采用计算得到的放射时间和预设剂量率对空白组或实验组进行第一次射线照射，照射完成后向每个孔内加入50
‑
200μL的组织培养基，并放入细胞培养箱中进行培养，在第二预设时间后吸除组织培养基，并进行第二次射线照射，直至完成第一预设次数的射线照射。
[0019]进一步地，所述分别检测完成照射后的空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值，并根据空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值计算得到每一放射剂量下所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值的步骤包括：
[0020]照射完成后，从细胞箱中取出样本，吸除组织培养基，并用PBS洗涤2
‑
4次，然后加入CCK8反应液并放回细胞培养箱中孵育第四预设时间，孵育后依次检测每孔的吸光度值；
[0021]根据每孔的吸光度值计算得到每一组的吸光度平均值，并根据每一组的吸光度平均值计算得到所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值。
[0022]进一步地，所述根据每孔的吸光度值计算得到每一组的吸光度平均值，并根据每一组的吸光度平均值计算得到所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值的步骤包括：
[0023]根据以下公式计算得到癌旁组织的活性值：
[0024]γ
i0
＝(A
si0
‑
A
bi0
)/(A
ci0
‑
A
bi0
)
[0025]其中，γ
i0
表示癌旁组织样本第i类分组中的癌旁组织对应的活性值，A
si0
表示癌旁组织样本第i类分组中的实验组对应的平均吸光度值，A
bi0
表示癌旁组织样本第i类分组中的空白组对应的平均吸光度值，A
ci0
表示癌旁组织样本第i类分组中的对照组对应的平均吸光度值；
[0026]根据以下公式计算得到癌组织的抑制率：
[0027]γ
i1
＝(A
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，其特征在于，在肿瘤患者进行放射治疗前，所述方法包括：获取肿瘤患者编号，根据所述肿瘤患者编号获取分别预存在组织保存液中的癌组织样本和癌旁组织样本，并将所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行样本前处理，得到若干第一预设尺寸的癌组织块和癌旁组织块；将所述癌组织块和所述癌旁组织块转移至若干孔板内，每个孔板的每个孔至多接种一个组织块，根据所述癌组织块或所述癌旁组织块的数量将孔板中的组织块划分成若干组，并根据预设放射剂量峰值和划分的组数计算并标记每组组织块分别对应的放射剂量，分组结果包括空白组、对照组以及实验组；根据每组组织块分别对应的放射剂量和预设剂量率计算得到每组组织块分别对应的放射时间，将孔板放置在放射仪器的照射区域内，并每隔第二预设时间根据放射时间和预设剂量率控制所述放射仪器对每组组织块进行第一预设次数的照射；分别检测完成照射后的空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值，并根据空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值计算得到每一放射剂量下所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值，以根据所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值预测所述肿瘤患者在每一放射剂量下分别对应的敏感性。2.根据权利要求1所述的用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，其特征在于，所述将所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行样本前处理，得到若干第一预设尺寸的癌组织块和癌旁组织块的步骤包括：采用组织培养基分别对所述癌组织样本和所述癌旁组织样本进行冲洗2
‑
4次，每次持续0.5
‑
2min；将冲洗后的癌组织样本和癌旁组织样本中坏死或形态不佳的区域进行剔除，并在碘伏消毒液中浸泡10
‑
60s后，将所述癌组织样本和所述癌旁组织均分割成第一预设尺寸的微组织块。3.根据权利要求2所述的用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，其特征在于，所述在将所述癌组织块和所述癌旁组织块转移至若干孔板内，每个孔板的每个孔至多接种一个组织块，根据所述癌组织块或所述癌旁组织块的数量将孔板中的组织块划分成若干组，并根据预设放射剂量峰值和划分的组数计算并标记每组组织块分别对应的放射剂量的步骤包括：根据其中一种组织样本分出的微组织块的数量和孔板的规格计算得到每种组织样本的孔行数或孔列数，以根据所述孔行数或所述孔列数将组织块划分成若干类，每类包括空白组、对照组以及实验组各一组，其中：同类中的对照组和实验组所划分的孔均接种有相同类型的组织块，每组空白组所划分的孔均未接种有组织块，同类中的空白组和实验组标记有相等的放射剂量，每组对照组所对应的放射剂量均为零。4.根据权利要求3所述的用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，其特征在于，所述根据每组组织块分别对应的放射剂量和预设剂量率计算得到每组组织块分别对应的放射时间，将孔板放置在放射仪器的照射区域内，并每隔第二预设时间根据放射时间和预设剂量率控制所述放射仪器对每组组织块进行第一预设次数的照射的步骤包括：
分组完成后采用计算得到的放射时间和预设剂量率对空白组或实验组进行第一次射线照射，照射完成后向每个孔内加入50
‑
200μL的组织培养基，并放入细胞培养箱中进行培养，在第二预设时间后吸除组织培养基，并进行第二次射线照射，直至完成第一预设次数的射线照射。5.根据权利要求4所述的用于预测肿瘤患者放射敏感性的体外快速检测方法，其特征在于，所述分别检测完成照射后的空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值，并根据空白组、对照组以及实验组中每孔的吸光度值计算得到每一放射剂量下所述癌组织的抑制率和所述癌旁组织的活性值的步骤包括：照射完成后，从细胞箱中取出样本，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈传军，
申请(专利权)人：南昌研湾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：