使用组合样品以提高灵敏度的试剂盒和方法技术

披露了使用组合的样品收集类型来检测分析物的方法。特别地，将第一样品与生物气溶胶样品组合。还披露了试剂盒，这些试剂盒包括用于收集和组合第一样品与生物气溶胶样品的部件。件。件。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用组合样品以提高灵敏度的试剂盒和方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2020年7月13日提交的美国临时专利申请序列号63/051,116的优先权和权益，该美国临时专利申请的披露内容特此通过援引以其全文并入。

技术介绍

[0002]本披露总体上涉及医学。更具体地，本披露涉及使用组合的拭子样品收集方法和生物气溶胶样品收集方法来检测分析物的方法。本披露还涉及使用组合的拭子样品收集方法和生物气溶胶样品收集方法检测分析物的试剂盒。
[0003]临床和实验室测试用于检测样品中的分析物。临床测试经常用于确定感染和疾病。精确的测试对于防止传播和扩散是重要的。病原体感染的检测通常在感染后但在感染个体表现出症状前的“窗口期”之后进行。许多分析测试缺乏灵敏度和/或窗口期期间的灵敏度，并且可能产生假阴性结果。当个体测试为阴性时，他们可能被允许返回工作。阴性测试还可使个体减少或消除保护措施，诸如戴口罩和社交距离。因此，假阴性结果可能导致在可以预防的情况下发生传播。避免来自感染过程早期进行的测试的假阴性结果的能力可减少传播。不理想的样品收集可能降低测试的总体灵敏度并产生假阴性测试结果。
[0004]临床和实验室测试需要从患者收集样品。可从患者收集多种样品，并且存在特定的样品收集方法来收集不同的样品类型。这些样品包括例如组织(活组织检查)、血液、唾液、痰液、鼻咽拭子、口咽(咽喉)拭子、咽喉洗液、脊髓液和尿液。对于呼吸道病原体测试，采集鼻咽拭子是首选的样品收集方法。口咽拭子是用于呼吸道病原体测试的样品收集的另一种可接受的方法。值得注意的是，疾病控制中心(CDC)建议如果鼻咽拭子和口咽拭子都被收集，则将两者组合在单个管中。但是，鼻咽拭子和口咽拭子两者的收集对于患者而言是不舒服的，并且可能对健康护理工作者造成风险。其他人已将鼻咽样品与唾液样品配对用于检测COVID
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19(参见，Jamal等人Clin Infect Dis.[临床传染病]2021年3月15日；72(6):1064
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1066；2020年6月25日在线发布)。Torretta等人提供了针对COVID
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19测试所报道的所有当前可用诊断技术的列表(参见Torretta等人Ear Nose Throat J.[耳鼻喉杂志]2021年4月；100(2_增刊):131S
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138S；2020年8月31日在线发布)。尽管现有技术披露了组合、配对和比较样品，但每种样品类型是独立测试的。
[0005]收集的样品和收集方法可能会出现样品中待检测的分析物数量不足的情况。这可能导致待检测的分析物的量无法检测。收集的样品量不足也会导致在患者具有分析物但样品中不含有足够的待检测分析物的情况下报告假阴性结果。为了解决这些问题，通常在收集之后进一步处理样品以浓缩被测试的样品部分中的分析物的量。
[0006]获得可检测水平的待检测分析物的一种方法是收集更多的样品。这在某些情况下可能是不方便的或不可能的。还可进行样品处理以浓缩待检测的分析物。另一种方法是试图增加测试的灵敏度，诸如进行更长的测试试剂孵育时间，增加检测试剂的浓度，以及进行更多和更长的循环。样品处理增加了大量的进行测试和获得测试结果所需的时间。需要更多的试剂增加了测试的成本。
[0007]因此，需要改进检测样品中的分析物的方法。本披露通过组合使用不同样品收集方法收集的样品来实现这一点。

技术实现思路

[0008]本披露总体上涉及医学。更具体地，本披露涉及使用组合的样品收集类型检测病原体的方法。
[0009]在一个方面，该方法包括收集第一样品；收集生物气溶胶样品；将该第一样品引入缓冲液中，其中该缓冲液将该第一样品的至少一部分洗脱到该缓冲液中以形成第一洗脱液缓冲液；使该第一洗脱液缓冲液的至少一部分与该生物气溶胶样品接触，其中该第一洗脱液缓冲液洗脱该生物气溶胶样品的至少一部分以形成组合样品；以及分析该组合样品中的该分析物。
[0010]在另一方面，本披露涉及试剂盒，该试剂盒包括：拭子、唾液收集小瓶、痰液收集小瓶和灌洗液收集部件中的至少一种；生物气溶胶收集装置；缓冲液；以及用于使用该试剂盒的说明书。
附图说明
[0011]图1A
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图1C是描绘样品的3种组合的图示。图1A描绘了单独洗脱并组合到单独小瓶中的样品。图1B描绘了洗脱到相同小瓶中的样品。图1C描绘了连续洗脱的样品。
[0012]图2是描绘假阴性拭子PCR速率相对于COVID传播率的图。病毒传播数据和测试假阴性率数据均表明SARS
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CoV
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2直到症状发作前约2天才能检测到。青色显示来自He等人(Nat.Med.[自然医学],2020,26:672
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675)的症状发作当天的病毒载量数据。品红色显示来自Kucirka等人(Ann.Intern.Med.[内科学年鉴],2020)的每日测试的假阴性率。在症状发作前约2天，传播概率开始增加，同时测试的假阴性率开始下降。(来自Jarvis和Kelley,Scientific Reports[科学报告],2021,11:9221)。
[0013]图3是根据暴露天数组合了拭子和生物气溶胶相对强度的图。拭子和生物气溶胶样品独立地归一化，组合信号未归一化。
[0014]图4是描绘基于病原体时间动力学的样品灵敏度、测试方法不可知(LFA或PCR)动态模型的维恩图。
[0015]图5是描绘样品类型的组合以增加PCR和LFA的样品灵敏度从而减少病原体时间动力学和收集问题的影响的图示。
[0016]图6是总结比较单独的鼻咽拭子(NP)测试、单独的生物气溶胶测试以及组合的NP和生物气溶胶测试的临床测试的预期结果的表。
[0017]图7是用于生物气溶胶收集和检测的流程图。
[0018]图8是描绘测试试剂盒的示例性实施例的部件的图示。
[0019]图9是描绘与口罩插入物(mask insert)(生物气溶胶)收集方法组合的拭子收集的图示。在步骤1和2中，由受试者佩戴具有附接的口罩插入物的口罩。将来自口罩插入物的收集基材从口罩中取出并置于具有洗脱/提取缓冲液的小瓶中，以洗脱/提取由口罩插入物的收集基材收集的生物气溶胶样品中的分析物(步骤3)。使用拭子从受试者收集拭子样品(步骤4)。然后将拭子与口罩插入物的收集基材置于同一小瓶中(步骤5)，以从拭子洗脱/提
取分析物。然后分析组合样品的一部分(显示LFA)(步骤6)并读取结果(步骤7)。
[0020]图10是描绘用于生物气溶胶样品收集的示例性口罩插入物的图示。内部收集基材长度4.25cm；宽1.25cm。外部基材(前和后)长6.3cm，宽2.3cm。生物气溶胶穿过外部基材到达内部收集基材。内部收集基材收集大于50纳米的生物气溶胶和病原体。COVID
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19约100nm；流感约80
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120nm，分枝杆菌<7微米，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于检测从受试者获得的组合样品中的分析物的方法，该方法包括：收集第一样品；收集生物气溶胶样品；将该第一样品引入缓冲液中，其中该缓冲液将该第一样品的至少一部分洗脱到该缓冲液中以形成第一洗脱液缓冲液；使该第一洗脱液缓冲液的至少一部分与该生物气溶胶样品接触，其中该第一洗脱液缓冲液洗脱该生物气溶胶样品的至少一部分以形成组合样品；以及分析该组合样品中的该分析物。2.如权利要求2所述的方法，其中使用液滴收集装置收集该生物气溶胶样品。3.如权利要求3所述的方法，其中该液滴收集装置选自口罩、口罩插入物、呼气液滴收集条、驻极体过滤材料以及它们的组合。4.如权利要求1所述的方法，其中该生物气溶胶收集使用生物气溶胶收集装置，其中该受试者对着该生物气溶胶收集装置吹气、对着该生物气溶胶收集装置咳嗽、对着该生物气溶胶收集装置哼唱、对着该生物气溶胶收集装置讲话，以及它们的组合。5.如权利要求2所述的方法，其中使用能够捕获由该受试者呼出的病原体的材料收集该生物气溶胶样品。6.如权利要求1所述的方法，其中该第一样品选自拭子样品、唾液样品、痰液样品、抽吸物样品、灌洗液样品以及它们的组合。7.如权利要求1所述的方法，其中该分析选自扩增、免疫测定...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔，
申请(专利权)人：三M创新有限公司，
类型：发明
国别省市：