微生物染色方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开一种微生物染色方法和装置，微生物染色方法包括以下步骤：在液体样本中加入缓冲液和磁性材料孵育；孵育结束后，使用磁铁分离，弃去上清液，加入无菌水重悬；将在重悬液放置在磁场环境下的载玻片上，进行染色；染色结束后，待载玻片自然晾干，取下载玻片离开磁场环境用于显微镜观察；实现上述微生物染色方法的微生物染色装置，包括载玻片、磁性底座和固定器；所述载玻片可拆卸地设置在磁性底座上，固定器将载玻片固定在磁性底座上；通过磁性材料与磁场的作用，避免在传统染色过程中，加热或离心等固定方式造成微生物损伤及染色、脱色和清洗过程中微生物损失，提高低浓度微生物样本的染色检出率，缩短显微镜检查时间。缩短显微镜检查时间。缩短显微镜检查时间。

【技术实现步骤摘要】
微生物染色方法和装置


[0001]本专利技术涉及微生物检测领域，特别涉及通过磁场与磁性材料的相互作用将微生物样本富集、固定在载玻片上，实现微生物染色的微生物染色方法和装置。

技术介绍

[0002]细菌感染是日益严重威胁全球人类健康的疾病，其发病率和死亡率均有上升，细菌感染主要包括尿路感染、菌血症和脑膜炎，控制细菌感染在临床上仍是一项具有挑战性的任务。准确和快速的细菌鉴定是控制细菌感染和及时采取治疗措施的关键。尽管培养是细菌感染的金标准，然而在大多数的医院中需要72个小时左右。且由于病患在医生经验性治疗阶段已经使用抗生素，导致培养结果呈阴性。
[0003]革兰氏染色作为首要的也是最常规的临床一线微生物分析方法，可以在很短的时间内提供给医生微生物的革兰氏阴阳性分类、形貌、大小等信息。医生再结合临床表现及经验，可以对所感染的病原微生物做出初步的判断，确定基本的用药方案。但革兰氏染色常常由于临床样本样本量少或是样本中所含病原微生物量少，导致检出率较低。再者，传统的革兰氏染色方法通过热固定将细菌固定在载玻片上，加热过程中可能导致细胞破裂，产生的碎片对病原微生物的显微镜观察带来极大的干扰。
[0004]目前，革兰氏染色仍是各类微生物实验室细菌分类的基本步骤。不管是临床微生物实验室还是工业微生物实验室，都无法避免常规的革兰氏染色。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种提供磁性材料的富集提高低浓度微生物样本染色检出的微生物染色方法和装置。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]一种微生物染色方法，该方法包括以下步骤：在液体样本中加入缓冲液和磁性材料孵育；孵育结束后，使用磁铁分离，弃去上清液，加入无菌水重悬；将在重悬液放置在磁场环境下的载玻片上，进行染色；染色结束后，待载玻片自然晾干，取下载玻片离开磁场环境，载玻片可使用显微镜观察。
[0008]所述磁性材料采用纳米磁性材料，具体可采用磁珠。磁珠可以与药物、蛋白质、酶、抗体或核酸结合，具有微生物结合能力。
[0009]进一步，在将重悬液放置在磁场作用下载玻片上之后，使用吸水纸将多余的水分吸走，吸水纸吸走水分后进行染色。
[0010]一种微生物染色装置，包括载玻片、磁性底座和固定器；所述载玻片可拆卸地设置在磁性底座上，磁性底座给载玻片提供磁场环境，固定器将载玻片固定在磁性底座上。
[0011]进一步，所述磁性底座呈板状，载玻片与磁性底座按两层堆叠，固定器将按层设置的载玻片与磁性底座固定；所述固定器呈U字型，U字型固定器的开口夹持载玻片与磁性底座。
[0012]进一步，所述U字型的固定器为两个，两个U字型的固定器在相对应的两侧分别夹持载玻片与磁性底座。
[0013]所述磁性底座可采用与载玻片相同宽度的尺寸，两个U字型的固定器在宽度方向上夹持载玻片与磁性底座；为进一步防止磁性底座与载玻片的相对滑动，两个固定器的U字型底部抵触载玻片与磁性底座宽度方向上的侧边
[0014]进一步，所述U字型的固定器使用硅胶材料制作。
[0015]进一步，所述磁性底座为磁铁。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术提供一种微生物染色方法，与磁性材料相互作用的微生物在外加磁场的作用下固定在载玻片表面，避免了传统微生物染色过程中，染色、脱色和清洗过程中微生物的损失提高染色检出率，避免了传统染色过程中加热或离心等方式固定微生物对微生物造成的损伤，通过磁性材料的富集，可以提高低浓度微生物样本的染色检出率；且在显微镜下，磁性材料与背景色差明显，实验者可依据磁性材料的分布快速定位目标微生物所在的位置，缩短显微镜检查时间。
[0017]进一步的，使用吸水纸吸干水分，能够降低在染色过程中与磁性材料作用的微生物的损耗，进一步提升微生物的检出率。
[0018]微生物染色装置的磁性底座能够提供稳定的磁场，确保与微生物作用的磁珠受到磁场的作用检出液体样本中的微生物，实现低浓度微生物样本的检出。
[0019]进一步的，两个U字型固定器能够进一步确保载玻片与磁性底座的固定，同时还可放置载玻片与磁性底座的相对滑动。
[0020]C字型的固定器与本专利技术的U字型固定器，以及U字型固定器两边长度不一致均属于等同技术方案。
[0021]进一步的，硅胶材料具有弹性，能够保证将载玻片固定在磁性底座上，且硅胶材料还具有防滑的作用，避免载玻片与磁性底座的滑动。
[0022]进一步的，磁铁简单易获得，成本低且磁场稳定。
附图说明
[0023]图1是微生物染色装置的一种实施方式的立体图；
[0024]图2是图1中微生物染色装置的正视图；
[0025]图3是分别采用传统的革兰氏染色法和采用本专利技术微生物染色方法从脑脊液中富集表皮葡萄球菌的染色镜检图；
[0026]图4是分别采用传统的革兰氏染色法和采用本专利技术微生物染色方法从玻璃体中富集表皮葡萄球菌的染色镜检图；
[0027]图5是分别采用传统的革兰氏染色法和采用本专利技术微生物染色方法从自来水中富集肺炎克雷伯氏菌的染色镜检图；
[0028]图6是分别采用传统的革兰氏染色法和采用本专利技术微生物染色方法从超纯水中富集肺炎克雷伯氏菌的染色镜检图；
[0029]图7是采用本专利技术微生物染色方法对脑脊液中不同浓度表皮葡萄球菌的染色镜检图；
[0030]图8是采用本专利技术微生物染色方法对脑脊液中不同浓度头状葡萄球菌的染色镜检
图；
[0031]图9是采用本专利技术微生物染色方法对脑脊液中不同浓度溶血葡萄球菌的染色镜检图；
[0032]图10是采用本专利技术微生物染色方法对脑脊液中不同浓度肺炎克雷伯氏菌的染色镜检图；
[0033]图11是采用本专利技术微生物染色方法对脑脊液中不同浓度大肠杆菌的染色镜检图。
具体实施方式
[0034]以下结合附图对本专利技术的具体实施例做详细说明。
[0035]本专利技术的微生物染色方法是通过磁性物质与微生物作用，以及磁性物质在磁场中作用实现的。具体来说，该微生物染色方法，已革兰氏染色法为例，包括如下步骤：
[0036](1)将在液体样本中加入缓冲液和磁性材料孵育；具体实施时，取液体样于离心管中，先后加入缓冲液和磁性材料，在离心环境下下孵育20min。
[0037](2)孵育结束后，使用磁铁分离，弃去上清液，加入无菌水重悬；
[0038](3)取重悬液放置在磁场作用下载玻片1上；即将载玻片1、磁性底座2和固定器3按照图1、图2安装好，将提取的重悬液放置于载玻片1上。
[0039](4)向载玻片1上滴加几滴结晶紫溶液，结晶紫溶液覆盖肉眼可见的磁珠即可，反应1min后，用去离子水快速冲洗载玻片上染料。
[0040](5)向载玻片1上滴加几滴革兰氏碘液，革兰氏碘液覆盖肉眼可见的磁珠即可，反应1min后，用去离子水快速冲洗载玻片上染料。
[0041](6)向载玻片1上滴加95％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微生物染色方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：在液体样本中加入缓冲液和磁性材料孵育；孵育结束后，使用磁铁分离，弃去上清液，加入无菌水重悬；将在重悬液放置在磁场环境下的载玻片上，进行染色；染色结束后，待载玻片自然晾干，取下载玻片离开磁场环境，载玻片可使用显微镜观察。2.根据权利要求1所述的微生物染色方法，其特征在于，在将在重悬液放置在磁场作用下载玻片上之后，使用吸水纸将多余的水分吸走，吸水纸吸走水分后进行染色。3.根据权利要求1或2所述的一种微生物染色装置，其特征在于，包括载玻片、磁性底座和固定器；所述载玻片可拆卸地设置在磁性底座上，磁性底座给载...

【专利技术属性】
技术研发人员：余绍宁，施海梅，俞梦欢，
申请(专利权)人：传鸣宁波化学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：