速溶细胞培养基粉末及其制造方法技术

提供了制造干燥细胞培养基粉末的方法，所述方法包括：提供期望的细胞培养基的干燥成分；将干燥成分与水性溶液混合以形成糊料；干燥糊料以形成脱水的培养基产品；以及研磨脱水的培养基产品以实现具有期望粒度的细胞培养基干燥粉末。还提供了一种迅速溶解、经过pH预调节、经过预缓冲的细胞培养基干燥粉末。经过预缓冲的细胞培养基干燥粉末。经过预缓冲的细胞培养基干燥粉末。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】速溶细胞培养基粉末及其制造方法
[0001]本申请根据35 U.S.C.
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119要求2020年7月14日提交的系列号为63/051,419的美国临时申请的优先权权益，本文依赖于该申请的内容并将其通过引用全文纳入本文。


[0002]本公开一般涉及用于培养细胞的细胞培养基，以及制造该培养基的方法。具体地，本公开涉及速溶细胞培养基粉末及制造该培养基粉末的方法。

技术介绍

[0003]在生命科学产业，细胞培养基被广泛地使用，以向细胞生长提供所需的营养和环境。用于产生疗效的细胞的培养要求使用这样的细胞培养基，它是限定的营养物质混合物，这些营养物质可包括碳水化合物、氨基酸、脂质、维生素和无机盐。通常，细胞在细胞培养基溶液中生长，以便扩增细胞系或产生一种或多种细胞副产物或化合物，这些细胞副产物或化合物被纯化并销售。细胞培养基的特性和组成根据具体的细胞要求而变化。重要的参数包括渗透压、pH和营养配方。对于期望的性能，细胞培养基应提供适当浓度的适当营养物质来用于细胞生长，具有适当的pH及维持适当pH的机理(例如缓冲剂)，具有适当的渗透压，并且包含最少量的污染物质，包括有机、无机、生物和非生物污染物。
[0004]培养基制剂已经用于培养多种细胞类型，包括动物、植物、酵母和原核细胞，包括细菌细胞。培养基中培养的细胞使可用的营养物质发生分解代谢并产生了有用的生物物质，例如，单克隆抗体、激素、生长因子、病毒等。一些产物具有治疗应用，并且随着重组DNA技术的出现，可对细胞进行设计以生产大量的这些产物。因此，培养细胞的能力不仅对于细胞生理学的研究来说是重要的，而且对于原本可能不能通过划算方式获得的有用物质的生产来说也是必要的。
[0005]细胞培养基产物以粉末和液体两种形式制造和销售，并且市场调查提示，相比于液体细胞培养基，粉末细胞培养基构成了全球细胞培养基销售额的更大部分。这些形式中的每种形式具有特别的优点和缺点。液体细胞培养基常作为即用型产品销售，这意味着液体细胞培养基溶液不需要在接种细胞之前通过添加化学物质来进行任何的制备。但是液体培养基具有缺点，它们常需要添加补充物质[例如，L
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谷氨酰胺、血清、提取物、细胞因子、脂质、维生素、营养物质(包括氨基酸、核苷和/或核苷酸、碳源、一种或多种糖、醇或其他含碳化合物)等]，以具有细胞培养的最佳性能。另外，液体培养基常难以经济的方式灭菌，因为许多化合物是热不稳定的(因此避免使用例如高压灭菌)，并且散装液体不是特别适合穿透性灭菌方法，例如伽马或紫外照射；因此，液体培养基最常通过过滤进行灭菌，这可能成为耗时且昂贵的过程。再者，大批量(例如，1000升或更多)液体培养基的生产和储存是不切实际的，并且液体培养基的组分通常具有相对较短的保质期。
[0006]另一方面，粉末细胞培养基产品不是即用型产品，而是需要一些制备来使用。在最多的情况中，由粉末细胞培养基产品制备液体细胞培养基的过程包括：将粉末细胞培养基产品溶于适当量的水中，溶解缓冲剂，以及通过添加酸或碱来调节所得溶液的pH。
[0007]虽然粉末培养基比等量的液体培养基便宜，但是使用粉末培养基形式具有众所周知的缺点。例如，通过添加
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研磨成分以形成粉末的粉末细胞培养基产品常表现出缓慢的溶解时间以及结块和/或浮在水的表面上的趋势。进一步地，通过添加
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研磨成分以形成粉末的粉末细胞培养基产品常包含高的含尘量并且还表现出差的流动特性。最终，通过添加
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研磨成分以形成粉末的粉末细胞培养基产品将趋向于通过许多深入研究的粉末偏析机制中的一种或多种机制而偏析。
[0008]已经开发了粉末细胞培养基的不同制造方法，以试图减轻与粉末细胞培养基产品的使用相关的这些困难。这些制造方法中的许多方法着重于将构成最终的粉末细胞培养基产品的粉末原料团聚，以得到溶解得更快、更易流动及粉尘更少的最终产品。团聚常通过流化床团聚或者使用压力压制材料的干法团聚来进行。
[0009]流化床团聚一般由下述组成：将配制产品所必要的原料成分投到团聚容器中，在容器中流化或悬浮原料，以及喷洒带有溶剂的所述原料成分，以通过诸如固体桥接之类的机制促进悬浮的颗粒之间的粘附和/或内聚。溶剂可以是水，以及替代性的溶剂，或者具有溶剂和溶质的溶液。团聚的产品一经干燥就从团聚容器中取出。可对团聚的产品进行包装，或者如果需要，可进一步研磨以达到更小的粒度。相比于通过添加研磨原料成分制造的产品，团聚的产品旨在具有更好的溶解性、可流动性和起尘特性。干法团聚一般由下述组成：将干燥的原料成分压制成团聚物/丸粒。然后可研磨团聚的产品以达到更小的粒度。然而，这些方法没有克服处理和使用粉末细胞培养基的所有困难。
[0010]因此，需要一种减轻粉末培养基的使用者面临的困难的粉末细胞培养基产品，这些困难包括缓慢的溶解时间、结块、漂浮、起尘、可流动性差和偏析。还需要一种粉末细胞培养基，以使培养基使用者在溶解粉末产品后摆脱不得不手动调节溶液的pH及给予适当量的缓冲剂。因此，需要经过pH预调节、经过预缓冲且均一的速溶完全培养基粉末。

技术实现思路

[0011]根据本公开的一个实施方式，提供了一种制造细胞培养基干燥粉末的方法。所述方法包括：提供期望的细胞培养基的干燥成分；将干燥成分与水性溶液混合以形成糊料；干燥糊料以形成脱水的培养基产品；以及研磨脱水的培养基产品以实现具有期望粒度的细胞培养基干燥粉末。
[0012]作为一些实施方式的一方面，干燥可包括：将糊料暴露于真空。干燥还可包括：将糊料暴露于真空直到糊料的重量停止因水蒸发而减少。干燥还可包括：加热糊料。
[0013]作为一些实施方式的另一方面，混合包括：混合干燥成分直到糊料均一。水性溶液包括酸和碱中的至少一种。所述方法还可包括：调整水性溶液的组成，以预调节细胞培养基干燥粉末的pH。水性溶液可包括HCl和NaOH中的至少一种。作为另一方面，所述方法可包括：向脱水的培养基产品添加缓冲剂。缓冲剂可包括碳酸氢钠。
[0014]根据本公开的附加的实施方式，提供了一种根据上述方面和实施方式制造的细胞培养基干燥粉末。
[0015]根据另外的实施方式，提供了由脱水的细胞培养基粉末制备液体细胞培养基的方法。所述方法包括：提供根据上述方法制造的细胞培养基干燥粉末。所述方法还包括：将细胞培养基干燥粉末加入到溶剂中；以及使细胞培养基干燥粉末溶解于溶剂中以提供液体细
胞培养基。作为实施方式的另一方面，所述方法包括：在细胞培养基干燥粉末溶解于溶剂中的同时，搅拌溶剂。
[0016]根据一些实施方式的方面，干燥的细胞培养基的溶解在小于或等于约2.5分钟内，小于或等于约2分钟内，小于或等于约1.5分钟内，小于或等于约1分钟内，小于或等于约50秒内，小于或等于约45秒内，小于或等于约40秒内，小于或等于约35秒内，小于或等于约30秒内，小于或等于约25秒内，小于或等于约20秒内，小于或等于约15秒内，或小于或等于约10秒内完成。
[0017]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种制造细胞培养基干燥粉末的方法，所述方法包括下述步骤：提供期望的细胞培养基的干燥成分；将干燥成分与水性溶液混合以形成糊料；干燥糊料以形成脱水的培养基产品；以及研磨脱水的培养基产品以实现具有期望粒度的细胞培养基干燥粉末。2.如权利要求1所述的方法，其中，干燥包括：将糊料暴露于真空。3.如权利要求2所述的方法，其中，干燥包括：将糊料暴露于真空，直到糊料的重量停止因水蒸发而降低。4.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中，干燥包括：加热糊料。5.如权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中，混合包括：对干燥成分进行混合直到糊料均一。6.如权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中，水性溶液包括酸和碱中的至少一种。7.如权利要求6所述的方法，所述方法还包括：调整水性溶液的组成，以预调节细胞培养基干燥粉末的pH。8.如权利要求1
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7中任一项所述的方法，其中，水性溶液包括HCl和NaOH中的至少一种。9.如权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括：向脱水的培养基产品添加缓冲剂。10.如权利要求9所述的方法，其中，缓冲剂包括碳酸氢钠。11.一种根据权利要求1
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10中任一项所述的方法制造的细胞培养基干燥粉末。12.一种由脱水的细胞培养基粉末制备液体细胞培养基的方法，所述方法包括：提供根据权利要求1
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10中任一项所述的方法制造的细胞培养基干燥粉末；将细胞培养基干燥粉末加入到溶剂中；以及使细胞培养基干燥粉末溶解于溶剂中以提供液体细胞培养基。13.如权利要求12所述的方法，所述方法还包括：在细胞培养基干燥粉末溶解于溶剂中的同时，搅拌溶剂。14.如权利要求12或权利要求13所述的方法，其中，干燥的细胞培养基的溶解在小于或等于约2.5分钟内，小于或等于约2分钟内，小于或等于约1.5分钟内，小于或等于约1分钟内，小于或等于约50秒内...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：康宁股份有限公司，
类型：发明
国别省市：