【技术实现步骤摘要】
一种烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂及其制备方法
[0001]本专利技术涉及生物肥料
，特别涉及一种烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂及其制备方法。
技术介绍
[0002]烟草属于我国重要的经济作物，是国民经济重要组成，对地方经济发展有突出作用。
[0003]烟草的生长发育过程最终决定烟叶产量和品质，该过程也是人们有效调控和干预烟草生长的重要时期。
[0004]烤烟育苗是烤烟生产中的重要环节，培育壮苗是获得高产优质的首要关键。根据生产经验，培育无病、适龄、整齐、粗壮、载后成活率高、生长旺盛的烟苗，必须施加足量的基肥，烟草基肥施用有以下几种方式：1、随翻地将肥料全面施人土壤表层，然后耕入土中；2、单或双条式施肥，在烟草行间靠近作物根处开一条沟，把肥料施入沟里；3、环穴式施肥，将肥料施用与穴坑的底部。以实现土壤的内部营养平衡，为烟草的生长营造一个良好的生长环境，有助于促进烟草生长。但是，肥料离植株营养吸收部位赿远，越不容易被吸收，比如单条式施肥将施肥量过于集中在一边，两边根系吸收营养不均衡，如果局部施肥过多，环穴...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：将荧光假单胞菌、枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌进行高密度发酵扩大，获得液体菌种；S2：将所述液体菌种，进行固液分离，获得微生物菌泥；S3：将所述微生物菌泥与载体混合，添加冷冻保护剂，进行冷冻干燥，得到烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂。2.根据权利要求1所述的烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中发酵的具体步骤如下：将荧光假单胞菌、枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌在LB液体培养基中分别传代扩配两次获得各菌种的二级种子液，再采用不同的发酵方式分别培养；所述LB液体培养基为：1％胰蛋白胨、0.05％酵母提取物、1％NaCl；培养条件为：pH调节至7.0，121℃高压蒸汽灭菌20min，接种量为5％，在20℃，180r/min的转速条件下培养，培养15～30h。3.根据权利要求2所述的烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中发酵还包括枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌混菌发酵过程，具体为对二代种子液进行显微镜镜检计数按照2:1的比例复配种子液，再接种到发酵培养基中，初始pH值为7.3，培养温度28℃，接种量3～5％，发酵罐装液量60
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80％，搅拌转速150r/min，无菌空气通气量1.5m3/h，罐压0.05Mpa，流加1％氨水控制pH值在6.5，流加50％葡萄糖控制底糖浓度在0.5％，培养时间为30h，菌体密度达到5.6
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CFU/mL后完成发酵，获得枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌混菌；所述发酵培养基为：3％葡萄糖、0.25％酵母粉、1％豆粕粉、0.05％(NH4)2SO4、0.1％KH2PO4‑
K2HPO4缓冲盐体系、0.01％MgSO4·
7H2O、0.01％KC1 0.1g/L。4.根据权利要求3所述的烟草根际促生微生物固体颗粒菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中发酵还包括荧光假单胞菌二代种子液培养18h后培养基菌体密度达到8
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CFU/mL后，接种到发酵培养基中，接种量为5％，发酵时间为18h，温度为30℃，初始pH值为7，转数为180r/min，发酵罐装液量60
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80％，搅拌转速200r/min，无菌空气通气量3m3/h，罐压0.08～0.1Mpa，流加1％氨水控制pH值在6.0，流加50％葡萄糖和2％玉米粉进行补料，控制底糖浓度在1％，培养时间为16h，菌体密度达到3.5
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CFU/mL后完成发酵，得到荧光假单胞菌发酵液，发酵结束后将发酵罐温度在5h内提升到40℃，得孢率80％；所述发酵培养基为可溶性淀粉20g/L、酵母膏2g/L、KH2PO
4 1g/L、KCl 1g/L、MgSO
4 0.5g/L、MnSO
4 5.0mg/L、CuSO
4 0.16mg/L、FeSO<...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾维爱，何命军，周世民，翟争光，尹华群，张贺田，谢鹏飞，李帆，蔡海林，黎娟，戴杏华，赵阿娟，向世鹏，唐春闺，陈治锋，
申请(专利权)人：湖南省烟草公司长沙市公司，
类型：发明
国别省市：
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