用于溶酶体病症的基因疗法制造技术

本公开涉及用于治疗如帕金森氏病和戈谢病等与异常溶酶体功能相关的疾病的组合物和方法。本公开提供了通过向有需要的受试者施用包括编码β

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于溶酶体病症的基因疗法
[0001]相关申请交叉引用
[0002]本申请要求于2020年8月10日提交的美国临时专利申请第63/063,851号的权益，所述美国临时专利申请的公开内容通过全文引用的方式特此并入。
[0003]以电子方式提交的文本文件的描述
[0004]与本申请一起以电子方式提交的文本文件的内容通过引用以其整体并入本文：序列表的计算机可读形式副本(文件名：PRVL_014_01WO_SeqList.txt，记录日期：2021年8月10日，文件大小为约361,207字节)。

技术介绍

[0005]蛋白质，如溶酶体酸β
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葡糖脑苷脂酶(Gcase)和α
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突触核蛋白的异常表达涉及许多中枢神经系统病症。戈谢病(Gaucher disease)是由Gcase的缺乏引起的鞘糖脂代谢的罕见先天性缺陷。患者患有非CNS症状，以及包含肝脾肿大、骨髓功能不全的发现，导致全血细胞减少、肺病症和纤维化以及骨缺损。另外，大量患者患有神经表现，包含缺陷性眼球跳动和凝视、癫痫发作、认知缺陷、发育延迟和运动病症，包含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于治疗患有或怀疑患有具有葡糖脑苷脂酶
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1(GBA1)突变的帕金森氏病(Parkinson's disease)的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司(sirolimus)；(B)甲基强的松龙(methylprednisolone)；(C)利妥昔单抗(rituximab)；以及(D)强的松(prednisone)。2.一种用于抑制患有或怀疑患有具有葡糖脑苷脂酶
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1(GBA1)突变的帕金森氏病的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述rAAV以范围为约5x 10
13
个载体基因组(vg)至约5x 10
14
个vg的剂量向所述受试者施用。4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述rAAV以约1.4x 10
14
个vg或约2.8x 10
14
个vg的剂量向所述受试者施用。5.一种用于治疗患有或怀疑患有2型戈谢病(Gaucher disease)或3型戈谢病的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。6.一种用于抑制患有或怀疑患有2型戈谢病或3型戈谢病的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：
重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。7.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述rAAV以范围为约5x 10
10
个vg/g脑至约5x 10
11
个vg/g脑的剂量向所述受试者施用。8.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述rAAV以约1.3x 10
11
个vg/g脑的剂量向所述受试者施用。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述rAAV通过注射到小脑延髓池中施用。10.一种用于治疗患有或怀疑患有1型戈谢病的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。11.一种用于抑制患有或怀疑患有1型戈谢病的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括与编码葡糖脑苷脂酶(Gcase)蛋白的转基因插入片段可操作地连接的启动子，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。12.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述rAAV以范围为约5x 10
13
个vg至约5x 10
14
个vg的剂量向所述受试者施用。
13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述rAAV是静脉内施用的。14.一种用于治疗患有或怀疑患有突触核蛋白病或震颤麻痹的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括转基因，所述转基因包括(a)包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列的Gcase蛋白编码序列；以及(b)包括SEQ ID NO:20的核苷酸序列的抑制性核酸编码序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。15.一种用于抑制患有或怀疑患有突触核蛋白病或震颤麻痹的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括转基因，所述转基因包括(a)包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列的Gcase蛋白编码序列；以及(b)包括SEQ ID NO:20的核苷酸序列的抑制性核酸编码序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。16.一种用于治疗患有或怀疑患有突触核蛋白病或震颤麻痹的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括转基因，所述转基因包括抑制性核酸编码序列，所述抑制性核酸编码序列包括SEQ ID NO:20的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。17.一种用于抑制患有或怀疑患有突触核蛋白病或震颤麻痹的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：
(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸包括表达构建体，所述表达构建体包括转基因，所述转基因包括抑制性核酸编码序列，所述抑制性核酸编码序列包括SEQ ID NO:20的核苷酸序列；以及(ii)腺相关病毒(AAV)9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松。18.根据权利要求14至17中任一项所述的方法，其中所述突触核蛋白病或震颤麻痹是多系统萎缩、帕金森氏病、具有GBA1突变的帕金森氏病、路易体病(Lewy body disease)、路易体痴呆(dementia with Lewy bodies)、具有GBA1突变的路易体痴呆、进行性核上性麻痹或皮质基底综合征。19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述启动子是鸡β肌动蛋白(CBA)启动子。20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述rAAV载体进一步包括巨细胞病毒(CMV)增强子。21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述rAAV载体进一步包括土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(Woodchuck Hepatitis Virus PosttranscriptionalRegulatory Element，WPRE)。22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述rAAV载体进一步包括牛生长激素polyA信号尾部。23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法，其中所述核酸包括侧接所述表达构建体的两个腺相关病毒反向末端重复(ITR)序列。24.根据权利要求23所述的方法，其中每个ITR序列是AAV2 ITR序列。25.根据权利要求23或24所述的方法，其中所述rAAV载体进一步包括5'ITR与所述表达构建体之间的TRY区，其中所述TRY区包括SEQ ID NO:28。26.一种用于治疗患有或怀疑患有具有GBA1突变的帕金森氏病的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸按5'至3'顺序包括：(a)腺相关病毒(AAV)2ITR；(b)巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)鸡β肌动蛋白(CBA)启动子；(d)编码Gcase蛋白的转基因插入片段，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；(e)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；(f)牛生长激素polyA信号尾部；以及(g)AAV2反向末端重复序列(ITR)；以及(ii)AAV9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：
(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松，其中所述rAAV以范围为约5x 10
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个vg至约5x 10
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个vg的剂量向所述受试者施用。27.一种用于抑制患有或怀疑患有具有GBA1突变的帕金森氏病的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸按5'至3'顺序包括：(a)腺相关病毒(AAV)2ITR；(b)巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)鸡β肌动蛋白(CBA)启动子；(d)编码Gcase蛋白的转基因插入片段，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；(e)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；(f)牛生长激素polyA信号尾部；以及(g)AAV2反向末端重复序列(ITR)；以及(ii)AAV9衣壳蛋白；以及以下中的一种或多种：(A)西罗莫司；(B)甲基强的松龙；(C)利妥昔单抗；以及(D)强的松，其中所述rAAV以范围为约5x 10
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个vg至约5x 10
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个vg的剂量向所述受试者施用。28.一种用于治疗患有或怀疑患有2型戈谢病或3型戈谢病的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用：重组腺相关病毒(rAAV)，所述rAAV包括：(i)rAAV载体，所述rAAV载体包括核酸，所述核酸按5'至3'顺序包括：(a)腺相关病毒(AAV)2ITR；(b)巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)鸡β肌动蛋白(CBA)启动子；(d)编码Gcase蛋白的转基因插入片段，其中所述转基因插入片段包括SEQ ID NO:15的核苷酸序列；(e)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；(f)牛生长激素polyA信号尾部；以及(g)AAV2反向末端重复序列(ITR)；以及(ii)AAV...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿萨，
申请(专利权)人：普利维尔治疗公司，
类型：发明
国别省市：