【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】鳞翅目害虫的基于RNA的控制
[0001]相关申请
[0002]本申请根据35U.S.C.(s)119(e)要求美国临时申请第63/024,133号和美国临时申请第63/106,614号的权益,它们通过引用以其整体并入本文。
技术介绍
[0003]作物经常是昆虫攻击的目标。根据联合国粮食及农业组织的数据,在全球范围内,农民由于病虫害损失了30%至40%的作物。作物维护和作物健康对产品的产量和质量至关重要,这最终需要长期战略来最大限度地减少病虫害的发生。估计控制作物害虫(例如鳞翅目(Lepidoptera)、双翅目(Diptera,)、鞘翅目(Coleoptera)、半翅目(Hemiptera)等)的年度成本为数千万美元,如果不加以控制,预计每年的作物损失成本将达到数十亿美元。
[0004]虽然化学农药一直是用于根除害虫侵染的一种解决方案,但是需要可替代的、对环境更安全的解决方案。化学农药对环境有害,并且可能缺乏特异性或选择性,最终导致非靶标效应。此外,鉴于化学农药缓慢的新陈代谢以及化学农药积累的可能性,很可能会产生耐药性。因此 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于控制植物的鳞翅目害虫侵染的方法,其包括:(a)使所述鳞翅目害虫与至少一种多核苷酸接触,所述多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs1
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114、229
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1623;或(b)在所述鳞翅目害虫的食物中提供至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(c)通过在所述鳞翅目害虫的幼虫的食物中提供至少一种包括至少一种沉默元件的多核苷酸,导致所述鳞翅目害虫的幼虫的死亡或发育迟缓,所述沉默元件包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA互补的至少18、19、20、21或25个连续核苷酸:SEQ ID NOs:1
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1623;或(d)向所述植物局部施用包括至少一种多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(e)以以下方式向所述植物局部施用包括至少一种多核苷酸的组合物,所述方式使得有效量的所述多核苷酸被以所述植物为食的鳞翅目物种摄取,所述至少一种多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(f)在所述植物中表达至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的序列的DNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸基本上相同或互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列基本上相同或互补的至少一个区段:SEQ ID NOs:1
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1623;或(g)使所述鳞翅目害虫与有效量的至少一种双链RNA接触,所述双链RNA的一条链与选自由以下组成的组的序列的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补:SEQ ID NOs:115
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1683。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述至少一种多核苷酸是双链RNA。3.根据权利要求2所述的方法,其中所述双链RNA是化学或酶促合成的,或者是通过在微生物中表达或通过在植物细胞中表达而产生的。
4.根据权利要求2所述的方法,其中所述双链RNA包括一条链,所述一条链与选自由以下组成的组的序列的至少约50个连续核苷酸、至少约100个核苷酸、至少约150个核苷酸或至少约200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补:SEQ ID NOs:115、116、119、121、123、127、135、140、141、143、150、151、153、158、161、201、209、213、217、434、442、451、452、453、454、456、457、461、474、476、479、489、491、492、521、522、523、524、527、528、536、538、539、823、826、827、828、830、832、833、834、840、841、842、844、845、851、853、854、862、874、877、883、892、893、901、946、947、953、998、1011、1012、1017、1018、1019、1021、1022、1023、1024、1030、1038、1041、1042、1044、1047、1089、1090、1091、1095、1096、1098、1099、1102、1103、1334、1335、1336、1341、1343、1346、1351、1353、1354、1362、1363、1377、1386、1387、1393、1396、1417、1420、1422、1425、1426、1446、1447、1470、1473、1481、1493、1494、1495、1500、1505、1509、1513、1520、1538、1540、1546、1548、1550、1624、1625、1629、1682或1683。5.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法包括向所述植物局部施用包括至少一种多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包括与靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列,其中所述靶基因具有选自由以下组成的组的核苷酸序列:SEQ ID NOs:2、5、7、9、13、21、26、27、29、36、37、39、44、47、87、95、99、103、301、309、31 8、319、320、321、323、324、328、341、343、346、356、358、359、503、504、505、506、509、510、530、532、533、542、545、546、547、549、551、552、553、559、560、561、563、564、570、572、573、581、593、596、602、611、612、620、665、666、672、717、730、731、736、737、738、740、741、742、743、749、757、760、761、763、766、808、809、810、814、815、817、818、821、822、1104、1105、1106、1111、1113、1116、1121、1123、1124、1132、1133、1147、1156、1157、1163、1166、1187、1190、1192、1195、1196、1216、1217、1240、1243、1251、1263、1264、1265、1270、1275、1279、1283、1290、1308、1310、1316、1318、1320、1564、1565、1569、1622和1623;并且任选地,其中所述组合物进一步包括一种或多种选自由载剂药剂、表面活性剂、阳离子脂质、有机硅氧烷、有机硅氧烷表面活性剂、多核苷酸除草分子、非多核苷酸除草分子、非多核苷酸杀虫剂、安全剂和昆虫生长调节剂组成的组的组分。6.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法包括使所述鳞翅目害虫与有效量的包括双链RNA的溶液接触,其中所述双链RNA的至少一条链与具有选自由以下组成的组的序列的基因的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补:SEQ ID NOs:2、5、7、9、13、21、26、27、29、36、37、39、44、47、87、95、99、103、301、309、318、319、320、321、323、324、328、341、343、346、356、358、359、503、504、505、506、509、510、530、532、533、542、545、546、547、549、551、552、553、559、560、561、563、564、570、572、573、581、593、596、602、611、612、620、665、666、672、717、730、731、736、737、738、740、741、742、743、749、757、760、761、763、766、808、809、810、814、815、817、818、821、822、1104、1105、1106、1111、1113、1116、1121、1123、1124、1132、1133、1147、1156、1157、1163、1166、1187、1190、1192、1195、1196、1216、1217、1240、1243、1251、1263、1264、1265、1270、1275、1279、1283、1290、1308、1310、1316、1318、1320、1564、1565、1569、1622和1623,并且其中RNA干扰被诱导并且发生鳞翅目害虫死亡。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述溶液进一步包括一种或多种选自由有机硅氧烷表面活性剂或阳离子脂质组成的组的组分。8.根据权利要求1所述的方法,其中(a)、(b)、(c)、(d)或(e)的所述靶基因或(f)的所述DNA具有选自由SEQ ID NOs.7、9、21、26、27、29、87、95或99组成的组的序列,或其中(g)的所述双链RNA包括一条链,所述一条链与选自由以下组成的组的序列的至少约50个连续核苷酸、至少约100个核苷酸、至少约150个核苷酸或至少约200个连续核苷酸互补:SEQ ID NOs:121、123、135、140、141、143、201、209和213,或与和所选的序列或其与一条链长度相当的片段具有至少90%、至少95%或98%同一性的序列互补。9.根据权利要求1所述的方法,其中所述鳞翅目害虫选自由以下组成的组:草地贪夜蛾和小菜蛾。10.根据权利要求1至4、6或7中任一项所述的方法,其中所述至少一种双链RNA包括一条链,所述一条链与选自由以下组成的组的序列的至少约50个连续核苷酸、至少约100个核苷酸、至少约150个核苷酸或至少约200个连续核苷酸互补:SEQ ID NOs:115
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1683,或与和所选的序列或其与一条链长度相当的片段具有至少90%、至少95%或98%同一性的序列互补。11.根据权利要求10所述的方法,其中所述一条链包括与选自所述组的序列的至少约100个连续核苷酸互补的序列。12.根据权利要求1至4、6或7中任一项所述的方法,其中所述双链RNA包括至少一个选自由以下组成的组的序列:SEQ ID NOs:115
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1683,或其至少约50个连续核苷酸、至少约100个核苷酸、至少约150个核苷酸或至少约200个连续核苷酸的片段,或与所述双链RNA或其片段具有至少90%、至少95%或98%同一性的序列。13.根据权利要求10或11所述的方法,其中所述至少一个双链RNA包括一条链,所述一条链与选自由以下组成的组的序列的至少约50个连续核苷酸、至少约100个核苷酸、至少约150个核苷酸或至少约200个连续核苷酸互补:SEQ ID NOs:115、116、119、127、150、151、153、158、161、217、434、442、451、452、453、454、456、457、461、474、476、479、489、491、492、521、522、523、524、527、528、536、538和539、823、826、827、828、830、832、833、834、840、841、842、844、845、851、853、854、862、874、877、883、892、893、901、946、947、953、998、1011、1012、1017、1018、1019、1021、1022、1023、1024、1030、1038、1041、1042、1044、1047、1089、1090、1091、1095、1096、1098、1099、1102、1103、1334、1335、1336、1341、1343、1346、1351、1353、1354、1362、1363、1377、1386、1387、1393、1396、1417、1420、1422、1425、1426、1446、1447、1470、1473、1481、1493、1494、1495、1500、1505、1509、1513、1520、1538、1540、1546、1548、1550、1624、1625、1629、1682和1683,或与和所选的序列或其与一条链长度相当的片段具有至少90%、至少95%或98%同一性的序列互补。14.根据权利要求1所述的方法,其中(a)、(b)、(c)、(d)或(e)的所述靶基因或(f)的所述DNA具有选自由以下组成的组的序列:2、5、13、36、37、39、44、47、103、301、309、318、319、320、321、323、324、328、341、343、346、356、358、359、503、504、505、506、509、510、530、532、533、542、545、546、547、549、551、552、553、559、560、561、563、564、570、572、573、581、593、596、602、611、612、620、665、666、672、717、730、731、736、737、738、740、741、742、743、749、
757、760、761、763、766、808、809、810、814、815、817、818、821、822、1104、1105、1106、1111、1113、1116、1121、1123、1124、1132、1133、1147、1156、1157、1163、1166、1187、1190、1192、1195、1196、1216、1217、1240、1243、1251、1263、1264、1265、1270、1275、1279、1283、1290、1308、1310、1316、1318、1320、1564、1565、1569、1622和1623。15.根据权利要求13或14所述的方法,其中所述鳞翅目害虫是小菜蛾。16.一种通过根据权利要求1所述的方法提供的对鳞翅目害虫侵染具有改善的抗性的植物,或所述植物的果实、种子或可繁殖部分。17.根据权利要求16所述的植物,其中所述植物是作物植物。18.一种用于控制鳞翅目害虫的杀虫组合物,其包括:(a)杀虫有效量的至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs 1
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1623;或(b)杀虫有效量的至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包括与靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21或25个连续核苷酸互补的至少一种沉默元件,其中所述靶基因具有选自由以下组成的组的核苷酸序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(c)杀虫有效量的至少一种RNA,所述RNA包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18个连续核苷酸相同或互补的至少一个区段:SEQ ID NOs:1
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1623;或(d)当被鳞翅目害虫摄取或接触时导致所述鳞翅目害虫的死亡或发育迟缓的RNA分子,其中所述RNA分子包括与具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补的核苷酸序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(e)杀虫双链RNA分子,所述杀虫双链RNA分子当被鳞翅目害虫摄取或接触时导致所述鳞翅目害虫死亡或生长发育迟缓,其中所述杀虫双链RNA分子的至少一条链与靶基因或从所述靶基因转录的RNA的至少18、19、20、21、25、50、100、150或200个连续核苷酸互补,或与和所述连续核苷酸具有至少90%、95%或98%同一性的核苷酸序列互补,其中所述靶基因具有选自由以下组成的组的序列:SEQ ID NOs:1
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1623;或(f)杀虫有效量的至少一种双链RNA,其中所述双链RNA的一条链与选自由以下组成的组的序列的至少18、19、20、...
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