一种抗PEDV的组合物、制剂及其制备方法和应用技术

本申请提供一种抗PEDV的组合物、制剂及其制备方法和应用。本发明专利技术提供的抗PEDV的组合物，其原料包括或由植物乳杆菌和茯苓组成，其中，所述植物乳杆菌为重组植物乳杆菌NC8

【技术实现步骤摘要】
一种抗PEDV的组合物、制剂及其制备方法和应用


[0001]本申请涉及微生物发酵领域，具体涉及一种抗PEDV的组合物、制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]在整个说明书中对现有技术的任何讨论都不应被视为承认这些现有技术是广为人知的，或构成本领域公知常识的一部分。
[0003]猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪呕吐、腹泻、脱水和高致死率的病原体。猪流行性腹泻(PEDV)是一种急性、高度传染性的肠道疾病。新生仔猪和哺乳仔猪因PEDV导致的死亡率可接近100％，给世界养猪业带来重大经济损失。
[0004]仔猪最常见的腹泻是由病原微生物感染引起的，主要致病因子是病毒、细菌和寄生虫，其中仔猪流行性腹泻病毒(PEDV)在养猪生产中最为常见。PEDV可引起所有年龄组猪的发病，以仔猪发病率最高。临床上以仔猪呕吐、腹泻、脱水为特征，死亡率甚至高达100％。1970年代在英国首次发现后，疾病传播到欧洲国家。2010年，中国报道了高发病率的新变种，美国、加拿大、墨西哥、巴西等许多其他国家也有相同毒株的新报道。PEDV属于冠状病毒科的α冠状病毒属。PEDV基因组是一个长度约为28kb的正链单链RNA。它包括四个结构蛋白，即刺突蛋白(S)、包膜蛋白、膜蛋白和核衣壳蛋白，以及三种非结构蛋白，即复制酶1a、复制酶1b和ORF3。PEDV经过粪口传播进入体内，但是消化道传播并不是该病唯一的传播途径，有研究检测到带毒母猪的乳汁存在PEDV。精液、乳汁中也可携带一定数量的病毒，也是PEDV潜在的传播途径。不仅病猪呼吸道分泌物可以感染易感猪群，有研究发现PEDV气溶胶同样具有感染性。仔猪流行性腹泻正在对中国的养猪行业发展产生严重影响。
[0005]长期以来，为了控制PEDV的传播，构建了大多数种类疫苗，如氢氧化铝佐剂灭活疫苗、二价灭活传染性胃肠炎病毒(TGEV)和PEDV疫苗和PEDV减毒疫苗。虽然这些疫苗在控制PED方面发挥了重要作用，但它们都存在缺陷。灭活疫苗不能激活细胞免疫反应，减毒疫苗也不是很安全，它们都不能诱导产生足够的粘膜免疫反应的病毒特异性IgA抗体。因此，研究出一种科学性、合理性、有效性，全新的治疗仔猪流行性腹泻的方法仍是世界各地学者今后的主要目标和巨大挑战。
[0006]本专利技术的目的在于克服或改善现有技术中的至少一个缺点，或提供一个有用的替代方案。除非上下文有明确的要求，否则在整个说明书和权利要求中，“包括”、“包含”等词应从包容性的角度来解释，而不是从排他性或详尽性的角度来解释；也就是说，从“包括，但不限于”的角度来解释。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种抗PEDV的组合物，包含该组合物的药物制剂或饲料添加剂，以及该具有抗PEDV作用的组合物的制备方法。本专利技术所述的组合物对感染PEDV的猪具有良好的免疫效果，能够显著缓解感染PEDV产生的临床不适症状，显著激活体液免疫和细胞免疫、
保护肠道组织健康，以及能够显著提升干扰素水平、显著降低猪体内的病毒量，表现出对猪流行性腹泻的良好的防治作用，和对PEDV的抗病毒作用。
[0008]具体地，本专利技术的技术方案如下所述：
[0009]在本专利技术的第一方面，本专利技术提供了一种抗PEDV的组合物，其原料包括或由植物乳杆菌和茯苓组成，其中，所述植物乳杆菌为重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep，重组植物乳杆菌NC8
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DCpep由吉林农业大学(吉林省动物微生态制剂工程研究中心)保存并提供。该重组植物乳杆菌已在学术论文Huang Ke
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Yan,Yang Gui
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Lian,Jin Yu
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Bei et al.Construction and immunogenicity analysis of Lactobacillus plantarum expressing a porcine epidemic diarrhea virus S gene fused to a DC
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targeting peptide.[J].Virus Res,2018,247:84
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93中公开，可根据论文中所述方法构建获得，其中，该重组植物乳杆菌中的融合基因S
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Dcpep的序列如Seq_1中所示。
[0010]在本专利技术的实施方式中，所述组合物由重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep和茯苓共发酵制得。
[0011]在本专利技术的第二方面，本专利技术提供了一种制备上述第一方面所述的抗PEDV的组合物的方法，其包括共发酵重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep和茯苓。
[0012]在本专利技术的实施方式中，所述共发酵包括将茯苓添加到培养基中灭菌，然后接种重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep，发酵培养。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述共发酵包括将茯苓添加到液体培养基中，调节初始pH为5.5
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7后进行灭菌处理，然后接种重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep，发酵培养。
[0014]其中，所述重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep的接种量为0.5
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5％。
[0015]其中，所述共发酵的培养时间为16
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20h；
[0016]其中，所述共发酵的温度为30
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45℃。
[0017]在上述发酵培养条件下能够在获得更理想的发酵效果，尤其是，在下述发酵条件下进行时，所述共发酵重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep和茯苓的方法包括：在液体培养基(比如MRS培养基)中添加6％的茯苓，将培养基pH值调节至6.5，高压灭菌后，接种5％重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep菌液，37℃下，静置发酵培养20h。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，所述茯苓为茯苓中药液。
[0019]在本专利技术的实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗PEDV的组合物，其原料包括或由植物乳杆菌和茯苓组成，其中，所述植物乳杆菌为重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep。2.根据权利要求1所述的抗PEDV的组合物，其特征在于，所述组合物由重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep和茯苓共发酵制得。3.一种制备权利要求1或2所述的抗PEDV的组合物的方法，其包括共发酵重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep和茯苓。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述共发酵包括将茯苓添加到培养基中灭菌，然后接种重组植物乳杆菌NC8
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Dcpep，发酵培养。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，将茯苓添加至培养基中后调节初始pH为5.5
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7后进行灭菌处理；优...

【专利技术属性】
技术研发人员：王春凤，杨桂连，石春卫，叶丽萍，牛天明，李鑫洋，杨文涛，程明扬，纪锦程，孙钰，王秀权，李俊逸，潘天旭，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：